1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l,nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E,nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布GB/ T 14926. 14-2001 前本标准是对G/T14926.14一1994(实验动物金黄色葡萄球菌检测方法的修订。本标准删除了GB/T14926.14-1994中5.2分离培养中用7.5%氯化铀肉汤增菌的方法,改用直接接种高盐甘露醇培养基进行分离;增加了6.3.3甘露醇发酵试验阳性。50 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:黄韧。本标准于1994年1月首次发布。中华人民共和国国家标准实验动物金黄色葡萄球菌检测
3、方法1 范围Laboratory animal- Method for examination of Staphylococcus aureus 本标准规定了实验动物金黄色葡萄球菌的检测方法。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔金黄色葡萄球菌的检测。2 引用标准G/ T 14926. 14-2001 代替GB/T14926.14-1994 下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926.42- 2001 实验动物细菌学检测标本采集GB/ T 14926
4、.43- 2001 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3 原理金黄色葡萄球菌是革兰阳性球菌,具有特定的菌落形态、卢溶血性和生化反应特征。据此可与其他细菌区别。4 主要设备和材料4.1 普通恒温培养箱。4. 2 生物显微镜。4.3 恒温水浴箱。5 培养基和试剂5.1 高盐甘露醇琼脂平皿(SP)。5.2 血琼脂平皿。5. 3 普通肉汤。5.4 甘露醇发酵管。5. 5 正常兔血浆。5.6 已知血浆凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌参考菌株各一株。中华人民共和国国家质量监督检验检症总局200108-29批准2002 - 05 -01实施51 GB/ T 14926. 14- 2001 检测程序6 血浆凝固
5、酶试验甘露醇发醉试验操作步骤7. 1 采样采取回盲部内容物或病灶组织或病灶分泌物。7.2 分离培养将已接种的高盐甘露醇培养基置(36土l)C培养18-24h。7. 3 鉴定? 3. 1 菌落特征高盐甘露醇培养基上形成1mm左右、凸起、黄色的菌落,菌落周围的培养基由红变成黄色。转种血琼脂平皿(36土1).C培养1824h形成白色或金黄色、凸起、圆形、不透明、表面光滑、周围有卢榕血环的菌落。7.3.2 菌体形态52 7 GB / T 14926.14- 2001 革兰阳性球菌,排列成葡萄状,无芽胞,无英膜,直径约为0.51.0m。7. 3. 3 甘露醇发酵试验阳性。7. 3. 4 血浆凝固酶试验吸
6、取1: 4新鲜兔血浆或-20C保存的兔血浆0.5mL,放入小试管中,再加入待检菌24h肉汤培养物0.5mL,摇匀,放(36土l)C培养箱或水浴内,每30min观察一次,观察6儿同时应用已知的血浆凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌菌株及肉汤培养基作对照。当己知的阳性株和待检株均出现凝固时或有凝块时,可判断为阳性。8 结果报告凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告,不符合者作出阴性报告。53 FCON-导.N叮!叮叮.Nm叮CON-5.N叮俨问筒。OONi止.N叮!.N叮FCON-.N白叮!二N叮俨同阁。同阁。同阁。华人民共和国家标准实验动物微生物学检测方法(2)GB/T 14926.1-14926.6-2
7、001 GB/T 14926.8-14926.17 2001 国中GB/T 14926.41-2叫01GB/T 14926.44-14926.49 2001 中国标准出版社出版北京复兴门外三里洞北街16号邮政编码:100045电话:68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售68517548 普* 印张6字数180千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/16 2002年2月第一版印数1-2000峰7巳定价45.00网址书号:155066 1-18097 也略595-547 版权专有侵权必究举报电话;(010)68533533科目GB/T 14926. 1-2001 H