1、I65.020.30 B 44 道童3中华人民共和国国家标准GB/ T 14926.18 14926. 32- 2001 GB/ T 14926. 5614926. 64- 2001 实验动物微生物学检测方法(4)Laboratory animal- Microbiological examination methods 2001- 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局G8/ T 14926. 23- 2001 前本标准是对GB/T14926.23-1994实验动物仙台病毒检验方法的修订。增加了检测病毒抗体的免疫荧光试验方法。16 本标准由中
2、华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:贺争鸣。本标准于1994年1月首次发布。1 范围中华人民共和国国家标准实验动物仙台病毒检测方法Laboratory animal-Method for examination of Sendai virus (SV) 本标准规定了仙台病毒CSV)的检测方法、试剂等。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔仙台病毒的检测。2 引用标准GB/ T 14926. 23-2001 代替GB/T14926. 23-1994 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有
3、标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T 14926.50-2001 实验动物酶联免疫吸附试验GB/ T 14926. 51- 2001 实验动物免疫酶试验GB/ T 14926.52- 2001 实验动物免疫荧光试验GB/ T 14926.54- 2001 实验动物血凝抑制试验3 原理根据免疫学原理，采用SV抗原检测小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔血清中仙台病毒抗体;或根据SV在一定的条件下，能凝集鸡、豚鼠红细胞，这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理，检测小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔血清中仙台病毒抗体。4 主要试剂和器材4. 1 试剂:4.1.1 ELI
4、SA抗原4. 1. 1. 1 特异性抗原用SV感染9d龄SPF鸡胚尿囊腔，培养于36C温箱，72h后收冻于4C，次日元菌收取尿囊液，4C2 000 r/min离心10min，用0.5%鸡或豚鼠红细胞和SV阳性血清做血凝和血凝抑制试验，验证其病毒特异性和血凝效价。上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。4.1. .2 正常抗原9d龄SPF鸡胚尿囊液。4. ,. 2 抗原片SV感染BHK21细胞，接种后23d，病变达十十+时用膜酶消化分散，PBS洗涤，涂片。室温干燥后，冷丙嗣固定10min，-20C保存。中华人民共和国国家质量监督检验检疲总局2001-08 -29批准2002 - 05-01实
5、施17 G8/ T 14926.23- 2001 4. ,. 3 血凝素见ELISA特异性抗原的制备。4.1.4 阳性血清SV抗原免疫清洁或SPF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠或普通级兔所获得的抗血清。4.1.5 阴性血清清洁或SPF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠血清和无仙台病毒感染的兔血清。4. 1.6 酶结合物辣根过氧化物酶标记羊或兔抗小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠IgG抗体，用于检测相应动物血清抗体。辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG抗体，用于检测兔血清抗体。辣根过氧化物酶标记葡萄球菌蛋白A(SPA)可用于小鼠、豚鼠、地鼠、兔血清抗体的检查。4.1.7 异硫氨酸荧光素标记羊或兔抗小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠IgG抗体，用
6、于检测相应动物血清抗体。异硫氨酸荧光素标记羊抗兔IgG抗体，用于检测兔血清抗体。4.2 器材4.2.1 酶标仪。4.2. 2 荧光显微镜。4.2.3 普通显微镜。4. 2.4 370C培养箱或水洛箱。5 检测方法5.1 采用ELISA方法(见GB/T14926.50-2001)进行血清学检测。5.2 采用lFA方法(见GB/T14926.52-2001)进行血清学检测。5. 3 采用IEA方法(见GB/T14926. 51一2001)进行血清学检测。5.4 采用HAI方法(见GB/T14926. 54-2001)进行血清学检测。6 结果判定对阳性检测结果，选用同一种方法或另一种方法重试。如仍为
7、阳性则判为阳性。7 结果报告根据判定结果，作出报告。18 CON-3.N叮lg.Nm叮CON-s.N叮Fj.N叮H阁。H国。华人民共国家标准实验动物微生物学检测方法(4)GB/ T 14926. 18- 14926. 3-2001 GBj T 14926.56- 14926.64- 2001 国和中 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售4峰印张4字数102千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/ 16 2002年2月第一版印数1-2000定价35.00元* 书号:155066 .1-18099 网址版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533* 595- 548 科目 GB/ T 14926.18-2001
