1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l，nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E，nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布G/T 14926.41- 2001 前本标准是对GB/T14926.41-1994(无特定病原体动物、无菌动物生活环境及粪便标本的检验方法的修订。本标准删除了GB/T14926.41-1994中对元特定病原体动物生活环境及粪便标本的检验，保留无菌动物生活环境及粪便标本的检测并作了如下修改:增加了硫乙醇酸铀培养基在使用前需煮沸驱氧程序;在从液体培养基转种血琼脂平皿时增加涂片染色镜检，以防止在转种时因死亡细菌不能在血平皿上生长而漏检。66 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口
3、。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:李红。本标准于1994年1月首次发布。1 范围中华人民共和国国家标准实验动物无菌动物生活环境及粪便标本的检测方法Laboratory animal-Method for examination of environment and faeces of GF animals 本标准规定了无菌动物生活环境及粪便标本中细菌的检测方法。本标准适用于无菌小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔的微生物检测。2 引用标准GB/ T 14926. 41 - 2001 代替GB/T14926. 41 - 1994 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的
4、条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926.43- 2001 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3 原理污染元菌动物的微生物主要是细菌(需氧菌和厌氧菌)和l真商，所以通过不同的培养基、不同的培养温度和培养环境可以对污染菌进行检测。4 主要设备和材料4. 1 普通恒温培养箱。4.2 生化培养箱。4. 3 水平流洁净工作台。4.4 恒温水浴箱。5 培养基及试剂5. 1 脑心浸液肉汤。5.2 硫乙醇酸铀肉汤。5. 3 大豆蛋白脏、肉汤。5.4 血琼脂平皿。5. 5 无菌生理盐水。中华人民共和国国家质量监督检
5、验检瘦总局2001-08 -29批准2002 - 05 -01实施67 G/T 14926.41- 2001 检测程序6 大豆蛋白陈肉汤硫乙醇酸纳培养基脑心浸液肉汤操作步骤7. 1 采样将元菌隔离器内饮水、饲料、垫料和新鲜动物粪便等分别收集于元菌小试管中，按无菌动物饲养操作程序从隔离器中取出。7.2 接种及观察7. 2. 1 将硫乙醇酸铀培养基加热煮沸至无色，置45C水浴箱平衡温度。7.2.2 按无菌操作程序在水平流洁净工作台中进行样品接种前制备及接种。分别加人少量无菌生理盐水(以没过样品为宜于待检样品小试管中，用毛细吸管充分吹打。分别吸取O.lO.5 mL样品溶液于上述三种培养基中，其中脑心
6、浸液培养基和硫乙醇酸纳培养基置(36士1).C培养至少14d，并在培养第7d和第14d涂片、革兰染色镜检，同时接种血琼脂平皿，(36士l)C培养48h，观察有无细菌生长;大豆蛋白陈肉汤培养基置2528C培养至少14d，观察有无真菌生长。7 结果报告凡镜检未观察到细菌、血琼脂平皿上无细菌生长、大豆蛋白脏、培养基无真菌生长者可报告无菌检测合格，其中一项检出细菌或真菌者为不合格。8 68 FCON-导.N叮!叮叮.Nm叮CON-5.N叮俨问筒。OONi止.N叮!.N叮FCON-.N白叮!二N叮俨同阁。同阁。同阁。华人民共和国家标准实验动物微生物学检测方法(2)GB/T 14926.1-14926.6
7、-2001 GB/T 14926.8-14926.17 2001 国中GB/T 14926.41-2叫01GB/T 14926.44-14926.49 2001 中国标准出版社出版北京复兴门外三里洞北街16号邮政编码:100045电话:68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售68517548 普* 印张6字数180千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/16 2002年2月第一版印数1-2000峰7巳定价45.00网址书号:155066 1-18097 也略595-547 版权专有侵权必究举报电话;(010)68533533科目GB/T 14926. 1-2001 H
