1、GBT 14926.4194 1 主题内容与适用范围 本标准规定了无特定病原体（SPF）动物、无菌（GF）动物生活环境和粪便标本的检验方法。适用于SPF和GF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔的检验。 2 引用标准 GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 GBT 14926.14 实验动物 金黄色葡萄球菌检验方法 GBT 14926.17 实验动物 绿脓杆菌检验方法 3 材料和试剂 3.1 厌氧培养装置。 3.2 脑心浸液肉汤 3.2.1 成分 3.2.2 制法：溶解后调好pH值，12115min灭菌备用。 3.3 硫乙醇酸钠肉汤 3.3.1 成分 脑浸液干粉 12.5g心浸
2、液干粉 5g 胰蛋白胨 10g氯化钠 5g葡萄糖 2g磷酸二氢钠（无水） 2.5g蒸馏水 1000mLpH 7.4酵母浸出粉 5g胰蛋白胨 15g葡萄糖 5.5g硫乙醇酸钠 0.5g氯化钠 25g刃天青（Resazurin） 0.001g琼脂 0.5g蒸馏水 1000mLpH 7.2页码，1/3GB/T 14926.41942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92641R.htm3.3.2 制法：溶解后调好pH值，12115min灭菌备用。 3.4 大豆蛋白胨肉汤 3.4.1 成分 3.4.2 制法：溶解后调好pH值，12115min灭菌备用。 3.
3、5 血琼脂平板 GB 4789.28中3.6。 3.6 NAC液体及固体培养基 GBT 14926.17中3.1及3.2。 3.7 7.5氯化钠肉汤及高盐甘露醇平板 GB 4789.28中3.48及GBT 14926 .14中3.4。 4 SPF动物生活环境和粪便标本的检验方法 4.1 标本采集 将SPF动物的新鲜粪便、饮水及垫料分别收集在无菌试管中，按程序从隔离器或SPF动物房中取出。 4.2 分离培养 标本分别接种NAC液体培养基和7.5氯化钠肉汤，按国家标准中实验动物绿脓杆菌检验标准和金黄色葡萄球菌检验标准，分离培养绿脓杆菌和 金黄色葡萄球菌。 4.3 结果报告 凡绿脓杆菌或金黄色葡萄球
4、菌分离阳性者，则认为其生活环境不符合SPF动物要求。 5 GF动物生活环境和粪便标本的检验方法（无菌试验方法） 5.1 标本采集 同3.1标本采集。其中粪便标本中加入适量无菌生理盐水制成粪悬液。 5.2 接种培养基 标本按下表所列项目接种培养基。接种后分别在3个温度下培养至少14天，观察有无细菌和真菌生长。在第7天和第14天，从37培养的两种液体培养基中转种血琼脂平板，再放37培养4天，观察平板上有无细菌生长。 无菌试验方法 胰酶消化酪蛋白 17g木瓜酶消化大豆粉 3g氯化钠 5g磷酸氢二钾 2.5g葡萄糖 2.5g蒸馏水 1000mLpH 7.3 检样 脑 心浸液肉 汤 硫乙醇酸 钠 肉 汤 大豆蛋白 胨 肉 汤 血 琼 脂平板37(需氧、厌氧)25 56 37(需氧、厌氧)25 56 25 37 (需氧、厌氧)粪便 饮页码，2/3GB/T 14926.41942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92641R.htm 注：必须检查；必要时检查。 5.3 结果报告 标本经4种培养基，3个温度培养18天，如未发现培养基混浊 和菌落生长，可报告标本无菌。 水垫料页码，3/3GB/T 14926.41942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92641R.htm
