1、I65.020.30 B 44 道童3中华人民共和国国家标准GB/ T 14926.18 14926. 32- 2001 GB/ T 14926. 5614926. 64- 2001 实验动物微生物学检测方法(4)Laboratory animal- Microbiological examination methods 2001- 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局G8/ T 14926. 59- 2001 前空口本标准规定了犬瘟热病毒的检测方法。犬瘟热是犬的主要烈性传染病之一，在我国犬群中广泛流行，是目前危害我国养犬业最为严重的疾病，是
2、普通级犬和SPF犬的必检项目。因此增加该病毒的检测方法。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:田克恭。55 1 范围中华人民共和国国家标准实验动物犬瘟热病毒检测方法Laboratory animal-Method for examination of canine distemper virus (CDV) 本标准规定了犬瘟热病毒CCDV)的检测方法、试剂等。本标准适用于犬CDV的检测。2 引用标准G/T 14926.59-2001 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都
3、会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926. 50-2001 实验动物酶联免疫吸附试验GB/ T 14926.51-2001 实验动物免疫酶试验3 原理根据免疫学原理，采用CDV抗原检测犬血清中CDV抗体。4 主要试剂和器材4.1 试剂4. 1. 1 ELISA抗原4. 1. 1. 1 特异性抗原用CDV感染Vero细胞，接种810d后，当病变达+十+十+时收获。冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。4. 1. ,. 2 正常抗原Vero细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液。4. 1.
4、 2 抗原片CDV接种Vero细胞，接种后57d，病变达十+.+十+时，用膜酶消化分散，PBS洗涤，涂片。室温干燥的同时，在紫外线下20cm处照射30min，冷丙隅固定10min，-20C保存。4. 1. 3 阳性血清CDV实验感染或自然感染的犬血清。4.1.4 阴性血清元CDV感染、未经免疫的犬血清。4. 1- 5 酶结合物中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001- 08-29批准2002 - 05 -01实施56 GB/ T 14926.59- 2001 辣根过氧化物酶标记羊或兔抗犬IgG抗体;或辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(SPA)。4.2 器材4.2.1 酶标仪。4.2. 2
5、 普通显微镜。4.2. 3 3TC培养箱或水浴箱。5 检测方法5.1 采用ELISA方法(见GB/T14926.50-2001)进行血清学检测。5.2 采用IEA方法(见GB/T14926. 51一2001)进行血清学检测。6 结果判定6. 1 普通级犬，接种疫苗后，经ELISA检测抗体效价注1: 160，或IEA检测j抗体效价:;:1: 20判为合格。6.2 SPF级犬，不应进行疫苗接种，对阳性检测结果，选用同一种方法或另一种方法重试。如仍为阳性则判为阳性。7 结果报告根据判定结果，作出报告。57 CON-3.N叮lg.Nm叮CON-s.N叮Fj.N叮H阁。H国。华人民共国家标准实验动物微生
6、物学检测方法(4)GB/ T 14926. 18- 14926. 3-2001 GBj T 14926.56- 14926.64- 2001 国和中 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售4峰印张4字数102千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/ 16 2002年2月第一版印数1-2000定价35.00元* 书号:155066 .1-18099 网址版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533* 595- 548 科目 GB/ T 14926.18-2001
