1、ICS 67050X 04 囝亘中华人民共和国国家标准GBT 23749-2009食品中叶绿素铜钠的测定分光光度法Determination of sodium copper chlorophyllin in foodsSpectrophotometric method2009-05-13发布 20090801实施宰瞀鹳紫瓣訾麟瞥星发布中国国家标准化管理委员会锚1”前 言本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准起草单位：国家农业标准化监测与研究中心(黑龙江)。本标准主要起草人：孔鲁裔、彭丽萍、汪发文、王志强、王世琨、牟钰。GBT 23749-2009食品中叶绿素铜钠的测定分光光度法GBT 2
2、3749-20091范围本标准规定了果蔬汁(肉)饮料、碳酸饮料、风味饮料、配制酒、糖果、罐头食品中叶绿素铜钠的测定分光光度方法。本标准适用于果蔬汁(肉)饮料、碳酸饮料、风味饮料、配制酒、糖果、罐头食品中叶绿素铜钠的测定。本标准检出限为0001 gkg，定量限为0005 gkg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引甩文件，其最新版本适用于本标准。GBT 6682-2008分析实验室用水规格和试验方
3、法(ISO 3696：1987，MOD)3原理试样中的叶绿素铜钠在酸性条件下经聚酰胺粉吸附，解吸液洗脱，分光光度计测定，标准曲线法定量。4试剂与材料以下试剂除有特殊说明外，均为分析纯，用水均为GBT 6682-2008中规定的三级水。41无水甲醇。42冰乙酸。43聚酰胺粉：80目100目。44 01 molL氢氧化钠溶液：称取0400 g氢氧化钠，加水至100 mL，溶解混匀。45 4molL氢氧化钠溶液：称取160 g氢氧化钠，加水至100mL，溶解混匀。46 02molL乙酸铵缓冲液：称取7708 g乙酸铵，加水至500mL，溶解混匀。47解吸液：01 molL氢氧化钠溶液+无水甲醇溶液一
4、1+10(体积比)。48 叶绿素铜钠标准品：大于等于997。49标准储备溶液：精确称取经105干燥至恒重并按其纯度折算为100质量的叶绿素铜钠标准品0050 0 g，用蒸馏水溶解并定容至100mL棕色容量瓶中，此溶液浓度为500-gmL，当天配制，避光保存。5仪器与设备51分光光度计。52天平：感量0000 1 g、0001 g和01 g。53 G3砂芯漏斗。54抽滤装置：真空泵、抽滤瓶。1GBT 23749-20096分析步骤61标准曲线的绘制611标准工作溶液的配制准确移取500 pgmL标准溶液10mL至100mL烧杯中，加入02molL的乙酸铵溶液30mL，用4 molL氢氧化钠溶液和
5、冰乙酸词pH至56。加入30 g聚酰胺粉，充分搅拌2 min，避光静置5min，用约20mL蒸馏水转移至G3砂芯漏斗中抽滤，弃去滤液。用75mL解吸液分三次解吸色素：每次倒人约25 mL解吸液，浸泡2 rain，再摇匀2 rain，抽滤并用10 mL解吸液洗净抽滤瓶中残液。收集滤液，用解吸液定容至100 mL，配制成浓度为50 PgmL的标准溶液，此溶液临用时配制。612标准系列的绘制分别吸取标准工作液0 mL、50 mL、100 mL、200 mL、300 mL、400 mL、500 mL，至50 mL容量瓶中，用解吸液稀释至刻度，配制成浓度为0#gmL、5LgmL、10-gmL、20 pg
6、mL、30 PgmL、40#gmL、50 pgmL的标准系列。以0 pgmL溶液为空白，用分光光度计以1 am比色杯于404 rim波长下测定其吸光值。62样品处理621饮料、酒样品的处理将样品摇匀，准确称取5 mL10 mL(精确至01 mL)样品至i00 mL烧杯中，加入02 molL的乙酸铵溶液30 mL，在5560的水浴中加热3 min5 min，去除酒精。用4 molL氢氧化钠溶液和冰乙酸调pH至56。再加入30 g聚酰胺粉，充分搅拌2 rain。将样品溶液用约20 mL蒸馏水转移至G3砂芯漏斗中抽滤，弃去滤液。用45 mL解吸液分三次解吸色素(同61_1)，收集滤液，用解吸液定容至
7、50 mL。622糖果样品的处理将样品置于瓷研钵中研细、混匀，准确称取5 g10 g(精确至0001 g)至100 mL烧杯中。加入02 molL的乙酸铵溶液30mL，用4molL氢氧化钠溶液和冰乙酸调pH至56。再加入30 g聚酰胺粉，充分搅拌2 min。将样品溶液用约20 mL 60C蒸馏水转移至G3砂芯漏斗中抽滤，弃去滤液。再用45 mL解吸液分三次解吸色素(同611)，收集滤液，用解吸液定容至50mL。623罐头样品的处理取有代表性的样品置于捣碎机中充分捣碎，精确称取1 g5 g(精确至0001 g)混匀浆液至100 mL烧杯中，加入02 molL的乙酸铵溶液30 mL。充分搅匀后，用
8、4 molL氢氧化钠溶液和冰乙酸调pH至56，分数次转移到G3漏斗中抽提。用约100 mL蒸馏水洗残渣数次，直至色素全部被抽提完为止。将抽出的色素液合并于250 mL烧杯中，加入30 g聚酰胺粉，充分搅拌2 min，避光静置2 min。将样品溶液用约20 mL蒸馏水转移至G3砂芯漏斗中抽滤，弃去滤液。再用45 mL解吸液分三次解吸色素(同611)，收集滤液，用解吸液定容至50 mL。63样品测定取以上样品的制备液，以标准曲线的0-gmL溶液为空白，用分光光度计以1 cm比色杯于404 rim波长下测定其吸光值(24 h内完成测定)。7结果计算样品中叶绿素铜钠的含量(gkg或gL)按式(1)计算：c。XV一i又r丽式中：c样品中叶绿素铜钠的含量，单位为克每千克或克每升(gkg或gL)矗从标准曲线上查得的叶绿素铜钠的含量，单位为微克每毫升(pgmL)y样品定容体积，单位为毫升(mL)；m称取样品量，单位为克或毫升(g或mL)。结果精确至小数点后两位。GBT 23749-20098精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。
