1、ICS 67.060 X 04 中华人民11: ./、和国国家标准GB/T 23816-2009 大豆中三嗦类除草剂残留量的测定Method for determination of triazine herbicide residues in soybean 2009-05-25发布中华人民共和国国家质量监督检验检夜总局中国国家标准化管理委员会2009-09-01实施发布中华人民共和国国家标准大豆中三嚷类除草剂残留量的测定GB/T 23816-2009 * 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛
2、印刷厂印刷各地新华书店经销争6开本880X 1230 1/16 印张1字数25千字2009年8月第一版2009年8月第一次印刷* 书号:155066 1-38302 定价18.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533目。吕本标准的附录A、附录B和附录C均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。G/T 23816-2009 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中国农业大学、中华人民共和国江西出入境检验检疫局。本标准主要起草人:陈冬东、祁彦、张新忠、杨强、占春瑞、李建中、安娟、李淑娟、储晓刚。I GB/T 23816-2009
3、 大豆中三曝类除草剂残留量的测定1 范围本标准规定了大豆中西玛通、西玛津、氧草津、阿特拉通、嗦草酣、西草净、秀去津、扑灭通、特了通、芳灭净、特丁津、扑草净、异丙净残留量的高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱的测定方法。本标准适用于大豆中西玛通、西玛津、氧草津、阿特拉通、嗦草酣、西草净、秀去津、扑灭通、特丁通、秀灭净、特丁津、扑草净、异丙净残留量的检测及确证。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用
4、文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析试验室用水规格和试验方法CGB/T6682-2008 , IS0 3696: 1987 , MOD) 3 原理试样中三嗦类除草剂用乙腊提取，经凝胶渗透色谱仪CGPC)及中性氧化铝SPE柱净化后，用高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。4 试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4. 1 乙腊:色谱纯。4.2 二氯甲烧。4.3 甲酸。4.4 磷酸。4.5 固相萃取柱:中性氧化铝1000 mg, 6 mL，使用前用5mL二氯甲:院活化。4.6 滤膜:0.22m。4. 7 标准品:西玛通、西玛津
5、、氨草津、阿特拉通、嗦草酣、西草净、劳去津、扑灭通、特丁通、秀灭净、特丁津、扑草净、异丙净，纯度均大于98%，相关信息参见附录A中表A.1o4.8 标准储备液z准确称取适量的13种三嗦类农药标准品，用乙腊分别配制成浓度为100g/mL的标准储备液。4.9 混合标准工作液:根据需要，分别吸取13种三嗦类农药标准储备液用流动相稀释配制成适当浓度的混合标准工作液。5 仪器和设备5. 1 高效液相色谱仪CHPLC):配有二极管阵列检测器。5.2 液相色谱一质谱质谱仪CLC-MS/M曰:配有电喷雾离子源CESD。5.3 均质器。5.4 凝胶渗透色谱:玻璃柱，700mmX25 mm ;填料，Biobead
6、s S-X3 , 40 g。5.5 振荡器。5.6 离心机。5. 7 旋转蒸发仪。1 GB/T 23816-2009 5.8 固相萃取装置。5.9 氮吹仪。5.10 聚四氟乙烯离心管。6 试样制备与保存6. 1 试样制备取代表性试样500g，用粉碎机粉碎并使其全部通过0.425mm的样品筛，混和均匀，装人洁净的容器内，密封并标识。6.2 试样保存试样于ooC ,._, 4 oC避光保存。取样、制样及保存过程中应防止试样受到污染或者残留农药含量发生变化。7 分析步骤7. 1 提取称取10g(精确至0.01g)试样于50mL聚四氟乙烯离心管中，加入40mL乙脂，旋涡2min混匀，于振荡器振荡30m
7、in, 4 000 r/min下离心5min，将上清液转移至100mL圆底烧瓶中。样品残渣再加入40mL乙腊重复以上操作提取一次，合并两次提取液，于350C下旋转浓缩至约1mL，N2吹干。用二氯甲烧溶解残渣，定容至10mL。7.2 净化由GPC自动进样系统吸人上述提取样品液7.5mL，定量环5.0mL进样，以二氯甲:皖为流动相，流量5mL/min，检测波长228nm，收集14mill-24 min的馆分于梨形瓶中，在400C水浴下旋转蒸发至近干。用5mL二氯甲:皖溶解。将上述溶解液转移至活化好的小柱中。从上样开始就接收流出液(流速约1mL/min)，再用5mL 二氯甲烧洗脱，收集洗脱液，合并流
8、出液和洗脱液，经氮气吹干后用1mL流动相定容。过0.22m滤膜，供HPLC和LC-MS/MS测定。7.3 测定7.3.1 HPLC参考条件a) 色谱柱:C18柱，250mmX4. 6 mm(内径)，5m，或相当者zb) 流动相:乙腊-水，梯度条件参见附录B中表B.1;c) 流速:1. 0 mL/min; d) 检测波长:228nm; e) 进样量:10L;f) 柱温:30oC。7.3.2 LC-MS/MS参考条件a) 色谱柱:C18柱，150mmX 2.1 mm(内径), 3. 5m，或相当者;b) 流动相z乙睛一0.1%甲酸水溶液，梯度条件参见附录B中表B.2; c) 流速:0.2mL/mi
9、n; d) 进样量:10L;e) 柱温:30oC; f) 质谱条件:参见附录B中表B.3和表B.4 7.3.3 定量测定7.3.3. 1 HPLC法:根据样液中三嗦类除草剂的含量，选定浓度相近的标准工作溶液，待测样液中三嗦类除草剂的响应值应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液及样液等体积参插进样测定。在上述HPLC仪器条件下，参考保留时间分别为:西玛通9.10min，西玛津12.10min，氧草津12.30min，阿GB/T 23816-2009 特拉通13.36min，嗦草酣13.96min，西草净16.70min，芳去津17.53min，扑灭通19.21min，特丁通21. 32 min
10、，芳灭净23.42min，特丁津25.52min，扑草净29.00min，异丙净32.80mino液相色谱图参见附录C中图C.1。7.3.3.2 LC-MS/MS法:根据样液中三嗦类除草剂的含量，选定浓度相近的标准工作溶液，待测样液中三嗦类除草剂的响应值应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液及样液等体积参插进样测定。在上述仪器条件下，参考保留时间分别为:西玛通7.66min，西玛津9.12min，氨草津9.23min，阿特拉通9.06min，嗦草酣9.38 min，西草净9.96 min，秀去津10.15 min，扑灭通10.19 min，特丁通10.45 min，芳灭净10.88min，特
11、丁津11.21 min，扑草净11.62 min，异丙净12.23 mino液相色谱-质谱/质谱色谱图参见附录C中图C.2。7.3.4 定性测定按照上述条件测定试样和标准溶液，如果试样中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶液相比在士2.5%的允许偏差之内;样品中待测组分的两个子离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液相比，相对丰度偏差不超过表1的规定，则可判断样品中存在相应的目标化合物。表1定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%I 50 允许的相对偏差/%I 士207.4 空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。8 结果计算和表达试样中待测化合物的残留量可以采用测定仪器的软件处理器或者
12、按式。)计算:l: 25 士3010 :l: 50 2050 1O20 V一-m FH一拟-AX ( 1 ) 式中zX 试样中被测组分的残留含量，单位为毫克每千克(mg/kg); A一一样液中被测组分的峰面积;As标准工作液中被测组分的峰面积3Cs一一标准工作液中被测组分的浓度，单位为微克每毫升(g/mL); V一一样液最终定容体积，单位为毫升(mL);m一一最终样液所代表的试样量，单位为克(g)。注=计算结果需将空白值扣除。9 测定低眼和回收率9. 1 测定低限本标准液相色谱法对各待测物的测定低限为0.02mg/kg;液相色谱-质谱/质谱法对各待测物的测定低限为0.005mg/kg。9.2
13、回收率本标准高效液相色谱法三嗦类除草剂添加浓度在O.020 mg/kg_ 1. 00 mg/kg范围内，平均回收率为71.87 %,._, 101. 94%，相对标准偏差为2.25% ,._, 10. 73%。本标准液相色谱-质谱/质谱法三嗦类除草剂添加浓度在O.02 mg/kg_ 1. 0 mg/kg范围，平均回收率为62.66%，._，120.1%，相对标准偏差为2.55% ,._, 19. 61%。3 GB/T 23816-2009 附录A(资料性附录)三瞟类除草剂信息表表A.113种三曝类除草剂基本信息三嗦类除草剂CAS 分子式结构式名称编码相对分子质量西玛通C8 H 1S NsO 6
14、73-04-1 SI口letone197.2 刚一/西玛津C7 H 12 CINs 飞号122-34-9 SI口laZlne201. 7 氧草津HIJCIN6 21725-46-2 cyanazme 240. 7 芳去通1610-17-9 H17NsO atraton 21 1. 3 嗦草酣21087-64-9 C8 H14 N4 0S metribuzin 214.2848 。4 GB/T 23816-2009 西草净C8 H1SNsS 1014-70-6 Slmetryn 213.3 Cl C8H14CINs 秀去津1912-24-9 atrazlne 215. 7 H 扑灭通1610-1
15、8-0 C10 H19NsO prometon 225.293 |人H /丫丫ClO H19NsO 特丁通33693-04-8 terbumeton 225.3 Cg H17 NsS 秀灭净834-12-8 ametryn; ametryne 227.3 5 GB/T 23816-2009 表A.1(续)三嗦类除草剂CAS 分子式名称编码相对分子质量结构式H 特丁津5915-41-3 Cg Hl6CIN5 terbuthylazine 229. 7 人NH扑草净7287-19-6 CIO Hl9N5S prometryn 241. 4 异丙净4147-51-7 Cll H21 N5 S dip
16、ropetryn 255.4 6 GB/T 23816-2009 附录B(资料性附录)高效液相色谱法和液相色谱-质谱/质谱法测定参数1)表B.1 高效液相色谱法液相色谱梯度程序洗脱时间/min水/%乙腊/%0.00 80 20 2.00 65 35 11. 00 60 40 12.00 57 43 16.00 57 43 27.00 40 60 28.00 35 65 34.00 25 75 34.01 10 90 40.00 。100 40.01 80 20 45.00 80 20 表B.2液相色谱-质谱/质谱法法相色谱梯度程序时间/min乙腊/%0.1%甲酸水溶液/%0.00 20 80
17、7.00 90 10 9.00 90 10 10.00 20 80 16.00 20 80 表B.3质谱条件电离方式ESI十毛细管电压3.0 kV 源温度120 .C 去溶剂温度350 .C 锥孔气流氮气，100L/h 去溶剂气流氮气，600L/h 碰撞气压氧气，2. 40 X 10-6 Pa 监测模式多反应监测(MRM)1) 非商业性声明:附录B所列参数是在WatersQuattro Ultima Pt质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。7 GB/T 23816-2009 表B.4多反应监测条件化合物名称母离子
18、(m/z)子离子(m/z)驻留时间/s锥孔电压/V碰撞能量/eV1248 0.05 17 西玛通198 40 128 O. 05 17 1328 0.05 16 西玛津202 40 104 0.05 19 2148 0.05 15 氧草津241 40 132 0.05 20 1008 0.05 20 阿特拉通212 40 170 0.05 16 1878 0.05 15 嗦草酣215 40 131 0.05 18 1248 0.05 17 西草净214 40 96 0.05 20 174 0.05 15 莞去津216 40 132 0.05 18 1848 0.05 16 扑灭通226 40
19、142 0.05 19 132 0.05 21 特丁津230 40 174 0.05 15 114 0.05 21 特丁通226 40 170 0.05 15 芳灭净968 0.05 21 228 40 186 0.05 16 2008 0.05 16 扑草净242 40 158 0.05 20 异丙净1728 0.05 20 256.2 40 144 0.05 24 a用于定量。8 附录C(资料性附录)标准物质液相色谱图及质量色谱图mAU 12 10 8 6 4 2 。1一一西玛通;2一一西玛津;3一一氧草津;4 阿特拉通;5一-嗦草酣;6一一西草净;7一一芳去津;100., %-1 5 1
20、0 图C.1o L i I i I . _. - ,. - - ,-2.00 4.00 100, %1 o i i i i I i i i i i i j j i i i 2.00 4.00 1 阿特拉通;2一一西玛通;3一二扑灭通;4一一西玛津;5嗦草酣;6 西草净;7一一氧草津;2 6 7 10 3 4 15 20 8-一扑灭通;9一一特丁通;10一一秀灭净;11 特丁津;12 扑草净;13 异丙净。13种三睡类除草剂HPLC色谱图6.00 fITTTT 6.00 9.06 1 1- , I 00 12.00 9.05 11 B, , . 6 .1 8.00 10.00 12.00 8 特
21、丁通;9一一-特丁津;10 秀灭净;11 莞去津;12 异丙净;13一一一扑草净。GB/T 23816-2009 12 11 25 30 212170 14.00 t/min 212100 i ii ji l圃14.00 t/min 13 t/min 图C.213种三瞟类除草剂LC-MS/MS多反应监测色谱图9 GB/T 23816-2009 7.66 2 198128 . , 。2.00 4.00 6.00 14.00 8.00 10.00 12.00 t/min 7.66 198124 t-frrt-rr E 。 . rr.1 5 . , t 1 1 2.00 4.00 6.00 8.00
22、 10.00 12.00 14.00 t!min 10.19 3 226184 t咱咱 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 t/min 10.15 3 226142 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 t/min 9.12 10%0O4 1 A 4 202132 r4 E 14.00.thin 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 4.00 6.00 nu nHd 202104 14EAa4，唱E4244，唱%0 i l ., i i吨2.00 r 8.00 i,1.oo 1 ;n 9.3
23、8 5 215187 r- r 。. E 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 t/min 2.00 4. 00 6. 00 8. 00 9.38 12.00 14.00 t/min 11jiL 0%0 5 215131 图C.2(续)10 GB/T 23816-2009 9.96 6 214124 . 1h . . 2.00 4.00 6.00 8. 00 10.00 12.00 14.00 t/min 9.96 6 21496 。 I l . 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 t/min 9.23 7 2412
24、14 、.,. eI ,. . 1400/min 。2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 6.00 9.23 , I I 7 241132 100, %-1 0.,.,.,. , , 2.00 4.00 1 I l于12.0。14.00 i t/min 咱E4，唱，咱E吨，咱E4电Anu-onu nuo-A 2.00 4.00 rr宁.，.6.00 MI川川(nu I 8 226114 8.00 12.00 1日t/min100, %-1 0 . 1 2.00 ,. 1 , , 1 1 226170 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 i4.OO ,
25、 , i)in 11. 21 9 230174 r 14. 00rt/min 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 11. 21 9 230132 。. 晤 ,., .,., . . 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 t/min 图C.2(续)gONlg的NH闰。228186 10 10.88 1 4.00 6.00 8.00 10.00 GB/T 23816-2009 157伽n12.00 2.00 22896 10 34唱134唱卫%0 A 14.00 . t/min 216 174 11 12.00 川川6.00 4.0
26、0 2.00 12.00 14.00 t/min 216132 11 i r-r-r-r-rT 8.00 TTT吁.，.-rr-r6.00 4.00 2.00 114唱3nu-onu nUOJ 咽AfTTT t/min TT1T 14.00 12.00 8.00 ,.,.-y 6.00 TT 4.00 fTTTTT 2.0。12.23 i 12.00 、4E唱E叮4E唱4，咱A%0 且256.2172 12 t/min 14.00 12.23 i 12.00 10.00 .,. 8.00 -唱.，.6.00 4.00 2.00 1114444tnu-onv nuo一唱-A256.2172 12 t/min 242200 14.00 13 11. 62 i 12.00 10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 144E144t1444%0 A t/min 14.00 10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 miHH门川HMU14E唱，唱E4，唱4a唱，唱Anu-onu nUO二唱A242158 13 t/min 14.00 10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 图C.2(续)侵权必究版权专有* 书号:155066 1-38302 18.00元定价:GB/T 23816-2009 打印日期:2009年11月16日
