1、中华人民共和国出入境检验检在行业标准SN/T 1680-2005 蜜蜂武氏蜂盾瞒病诊断方法Protocol of diagnosis for acariosis of bees 2005-09-30发布中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局2006-05-01实施削自本标准参考了OIE(陆生动物诊断试剂和疫苗标准手册)2004版。本标准的附录A为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国北京出入境检验检疫局。本标准主要起草人:史莫玲、乔军、苏世敏。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。SN/T 1680-2005 1 蜜蜂武氏蜂盾蜗病诊断方法1
2、 范回本标准规定了蜜蜂武氏蜂盾蜗病的诊断方法。本标准适用于蜜蜂武氏蜂盾蜗病的检疫。2 原理SN/T 1680一2005蜜蜂武氏蜂盾蜻病(acariosisof bees)是由蜜蜂武氏蜂盾蜗引起的。是蜜蜂呼吸系统的一种体内寄生虫，主要在蜜蜂前胸气管内生活、繁殖，以寄主的血淋巴为食.有时也寄生于头、胸和腹部气囊。随着寄生虫高虫数量的增加，气管逐渐出现病变.由于黑色素的缘故.原来正常的白色半透明的气管壁变成不透明并带有黑色斑点.气管内充满不同阶段的气管蜗。3 设备和试剂需要准备的设备和试剂为:一一光学显微镜:一一解剖镜:一-8%氧氧化饵;容液:一一-1%亚甲基蓝搭液:一-70%酒精。4 方法和判定4
3、. 1 解剖法4. 1. 1 随机抽取50只蜜蜂样品(活、死或濒死)，先用酒精或冷冻致死.将蜂体脚朝上.背朝下仰卧固定或用拇指和食指捏住。4. 1.2 用慑子去掉头和前脚.除去颈四周的颈片.打开暴露气管.查看离气孔最近的气管是否侵染。4. 1. 3 在中部两腿到前腿之间切开胸腔.薄困片经进一步处理.清除肌肉组织。4. 1. 4 置8%氢氧化押溶液(溶液配制见酣录A)微加热约20min或不加热过夜浸软。4. 1. 5 用18X20X解剖镜检查有肌肉组织的第一对气管.或将气管移到另一载玻片上加甘油或水.以更高的放大倍数观察。4. 1. 6 通过透明的气管壁可很容易看到小的卵圆形蜗虫体。4. 1.7
4、 判定:在解剖镜下检查，发现气管内有卵圆形蜗虫体为阳性结果.未发现气管内有卵圆形蜗虫体为阴性结果。4.2 染色法4.2.1 去掉头和前腿。4.2.2 在前翅基部中间一对腿向前面再横切一刀。4.2.3 取下切片1mml. 5 mm，置8%氢氧化饵溶液。4.2.4 轻轻搅拌.加热至接近;沸弗点约1刊omi让m.直至内部组伊织、j溶容解、清除.勿动几丁质组织。4.2.5 过滤由收切片并用自来水冲洗2rnin 5 min 4.2.6 染色:用1%亚甲基蓝q溶容液配制见附录A)染色.切片在蒸榴水中分化2min5 min.用70%酒精淋洗，当用95%酒精保存时.蜗可再着色6h。SN/T 1680-2005
5、 4.2.7 封由切片。4.2.8 判定:在光学显微镜下检查，发现气管内有染色蜻虫体为阳性结果，未发现气管内有染色蜗虫体为阴性结果。? A.1 8%的氢氧化押溶液附录A(规范性甜隶)溶液配制称取氮氧化锦8.0g，加蒸锚水溶解至100mL, A.2 1%的亚甲基蓝溶液称取亚甲基蓝1.0 g，加蒸馆水j容解至100rnL , SN/T 1680-2005 的OON-o严HZ中华人民共和国出入境检验检疫行业标准蜜蜂武氏蜂盾蜻病诊断方法S.! /T 1680-2005 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政绵码:1000-!5同址电话:68523946685175-!8 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷+ 开本880 1230 1/16 印张O.5 字数5千字2006年1月第一版2006年1月第一次印刷印数1-2000 亏咛书号:155066.2-16604 定1ft6.00元SN/T 168。一2005
