1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1697-2006 猪传染性胃肠炎病毒和猪呼眼道荒草状病毒抗体阻断ELISA鉴别试验操作规程Protocol of blocking ELISA for differentiating antibodies of swine transmissible gastroenteritis virus and porcine respiratory coronavirus 2006心1-26发布060712000112 2006酬。8-16实施建辛2中华人民共和国发布守哪?国家质量监督检验检疫总局前吉本标准的附录A、附录B、附录C均为规范性附录。本标准出
2、国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位z中华人民共和国广东出人境检验检疫局。本标准主要起草人z罗长保、陈茹、刘琳琳。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。SN/T 1697-2006 I 1 范留的操作技术要求。2 规范性引用文件3 材料3. 1 病毒及细胞猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒抗体阻断ELISA鉴别试验操作规程SNjT 1697-2006 ELISA鉴别试验ST细胞生长在阿拉不大于10%时固定细胞。24h后待细胞病变率4. 7 室温2h或40C过夜。4.8 周PBST洗三次。4.9 每孔加入100L工作浓度辣根过氧化物酶标记的亲和絮，室温中培养30min40
3、mino 4. 10 PBST洗三次。4. 11 每孔加入100LABTS(见附录。4. 12 室温30min后加入100L5%十二烧基磺酸铀(质蠢浓度)停止反应。1 SN/T 1697-2006 4. 13 读取OD值414nmc 5 结果判定当阴、阳性血清对照成立，用阴性血清平均OD值乘以0.5为阻新值。样品OD值高于阻断点时为阴性，OD值低于姐断点时为阳性。抗A、D位点抗体均为阳性则为TGE病毒抗体阳性。仅抗A位点拭体阳性，抗D位点阴性时为PRC病毒抗体阳性。2 而胃草草工主- 氧化锦8.0 g 氧化饵0.2 g 磷酸氢二铀1. 15 g 磷酸二氧铀0.2 g 7.). 1 000 mL
4、 使用前加入0，1%吐温20。实验用水应符合GB/T6682的要求。l 2 pos pos neg neg Sl Sl S2 S2 S3 S3 S4 S4 S5 S5 S6 S6 磷酸工氢铀拧攘酸3 4 5 S7 S7 S15 S8 S8 S16 S9 S9 S17 S10 S10 S18 S11 S11 S19 S12 S12 S20 S13 S13 S21 S14 S14 S22 附录A(规范性附来)PBST溶班配制附录B规范性附录加样表格6 7 S15 S23 S16 S24 S17 S25 S18 S26 S19 S27 S20 S28 S21 S29 S22 S30 附录C规范性附录
5、)ABTS缓冲滚配制8 S23 S24 S25 S26 S27 S28 S29 S30 1. 84 g O. 51 g ABTS，2，2仁Azino-bis-(3-ethyl benzt biozoline 6sulfonic) 50 mg 3%双氧水200L 水100mL SN/T 1697-2006 9 10 11 12 S31 S31 S39 S39 S32 S32 S40 S40 S33 S33 S41 S41 S34 S34 S42 S42 S35 S35 S43 S43 S36 S36 S44 S44 S37 S37 S45 S45 S38 S38 S46 S46 OON-khF HZm 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准猪传染性胃肠炎病毒和猪呼眼道冠状病毒抗体阻断ELISA鉴别试验操作规程SN/丁169720069夺中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本880X 1230 1/16 印张0.5字数7千字2006年4月第一版2006年4月第一次印刷印数1-2000* SN/T 1697-2006 书号:155066 2-16751 定价6.00元
