1、ICS 65140B 47 囝宫中华人民共和国国家标准GBT 24283-20092009-07-08发布蜂Propolis胶200912-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局岩布中国国家标准化管理委员会及111刖 吾GBT 24283-2009本标准由中华全国供销合作总社提出。本标准由全国蜂产品标准化工作组归口。本标准起草单位：北京天恩生物工程高新技术研究所、浙江大学动物科学学院、杭州天厨蜜源保健品有限公司、中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、北京百花蜂产品科技发展有限公司、广州宝生园有限公司、江西汪氏蜜蜂园有限公司。本标准主要起草人：吕泽田、胡福良、郑春强、李立群、范春林、郭利
2、军、汪玲、胡元强。蜂 胶GBT 24283-20091范围本标准规定了蜂胶及蜂胶乙醇提取物的定义及其品质、检验方法、包装、标志、贮存、运输要求。本标准适用于蜂胶及蜂胶乙醇提取物的加工、贸易。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 191包装储运图示标志3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。31蜂胶propolis工蜂采集植物树脂等分泌物与其上颚腺、蜡腺等分泌
3、物混合形成的胶粘性物质。32蜂胶乙醇提取物ethanol extracted propolis乙醇萃取蜂胶后得到的物质。33总黄酮total flavonoids黄酮类物质含量的总和。4要求41感官要求411 蜂胶的感官要求应符合表1的规定。表1蜂胶的感官要求项目 特 征色泽 棕黄色、棕红色、褐色、黄褐色、灰褐色、青绿色、灰黑色等，有光泽状态 团块或碎渣状，不透明，约30以上随温度升高逐渐变软，且有粘性气味 有蜂胶所特有的芳香气味，燃烧时有树脂乳香气，无异味滋昧 微苦、略涩，有微麻感和辛辣感GBT 24283-2009412蜂胶乙醇提取物的感官要求应符合表2的规定。表2蜂胶乙醇提取物的感官要求
4、项 目 特 征结构 断面结构紧密色泽 棕色、褐色、黑褐色，有光泽状态 固体状，约30以上随温度升高逐渐变软，且有粘性气味 有蜂胶所特有的芳香气味，燃烧时有树脂乳香气，无异昧滋昧 微苦、略涩，有微麻感和辛辣感42理化要求蜂胶及蜂胶乙醇提取物的理化要求应符合表3的规定。表3蜂胶及蜂胶乙醇提取物的理化要求蜂胶 蜂胶乙醇提取物项 目一级品 二级品 一级品 二级品乙醇提取物含量(glOO g) 60 40 95总黄酮(gOO g) 15 8 20 17氧化时间s 2243真实性要求不应加入任何树脂和其他矿物、生物或其提取物质。非蜜蜂采集，人工加工而成的任何树脂胶状物不应称之为“蜂胶”。44特殊限制要求应
5、采用符合卫生要求的采胶器等采集蜂胶，不应在蜂箱内用铁纱网采集蜂胶；不应高温加热、曝晒。5试验方法51取样方法从被检样品的不同部位均匀取样，每批取样总量不超过300 g。52感官要求的检验521蜂胶感官要求的检验5211色泽、状态在自然光线良好的条件下，观察样品外表色泽。取少许上述样品混匀后，加热至35左右，用手揉搓成条，再慢慢向两端拉伸。含胶量越大，粘性越大，拉伸长度越长。5212气味、滋味取少许样品，嗅其气味是否有蜂胶特有的明显芳香气味，再点燃，嗅其气味是否异常；口尝其滋味。522蜂胶乙醇提取物感官要求的检验5221结构将蜂胶乙醇提取物样品放在15以下2 h3 h，用锤砸开，观察其断面。52
6、22色泽、状态按52 11规定的方法检验。2GBT 24283-20095223气味、滋味按5212规定的方法检验。53理化要求的检验531样品制备按51取样的样品放人10以下的冰箱中1 h后，将其粉碎，从中取样100 g备检。532乙醇提取物含量5321原理称量乙醇不溶物质量，用减量法计算其占样品质量的百分比。5322试剂和材料a) 乙醇：分析纯(95)；b)定量滤纸125 cm。5323仪器a)天平(感量0001 g)；b)100mL烧杯；c)电热鼓风干燥箱；d)超声波仪；e)玻璃漏斗60mm；f)玻璃棒；g)250 mL锥形瓶；h)称量瓶70 mm35 mm；i)干燥皿。5324步骤称取
7、经过粉碎处理的蜂胶样品5 g(称准至0001 g)，置于100 mL烧杯中，加适量95乙醇，放人超声波仪中超声，使样品溶解，将上清液倒人事先干燥称重过的滤纸及玻璃漏斗过滤到锥形瓶中，反复数次，直至完全溶解，再用少量乙醇洗涤100 mL烧杯及滤纸两次。然后将残渣及滤纸与玻璃漏斗在50下干燥至恒重。在相同条件下作平行实验。5325计算按式(1)计算：x1一堕二丝i00 m1式中：x，样品中乙醇提取物含量，；m1样品质量，单位为克(g)；mz残渣质量，单位为克(g)。平行实验允许误差不超过15，取三次测定的平均值。533总黄酮含量5331试剂和材料a)聚酰胺粉(100目)；b)芦丁标准溶液：取50
8、mg芦丁(99)，加甲醇溶解并定容至100 mL，即得50 pgmLc)乙醇：分析纯(95)；d)甲醇：分析纯(95)。GBT 24283-20095332仪器a) 紫外一可见分光光度计；b)层析柱：350 ram(长)15 mm(内径)，具活塞、砂芯、抽气嘴、圆底烧瓶，见图l图1层析柱示意图c)容量瓶：10 mL；d) 移液器：100 pL1 000 pL；e)移液管：1 mL5 mL；f)玻璃蒸发皿：90 mm。5333步骤a)试样处理：称取经过粉碎处理的蜂胶样品1 g，或蜂胶乙醇提取物05 g于容量瓶中，用乙醇定容至100 mL，摇匀后，超声提取20 min，放置，用移液管吸取上清液i
9、mL于玻璃蒸发皿中，加入5 mL乙醇及I g聚酰胺粉，用玻璃棒混匀吸附，于60水浴上挥去乙醇，然后转入关闭活塞的层析柱中。量取20 mL苯液，清洗玻璃蒸发皿再将苯液转入层析柱中，分3次完成。15 min后开启层析柱活塞，弃去苯液并关闭层析柱活塞，取下圆底烧瓶，将25 mL容量瓶装于层析柱下方。量取20 mL甲醇，分3次清洗玻璃蒸发皿，再将甲醇转入层析柱中，15 min后开启层析柱活塞将黄酮洗脱于25 mL容量瓶中，用甲醇定容至25 mL。此液置I cm比色皿中于波长360 nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品，用标准曲线法定量。b)芦丁标准曲线：分别吸取芦丁标准溶液0、10、20、30、40、5
10、0mL于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，置1 cm比色皿中于波长360 nm测定吸收值，绘制标准工作血线，计算回归方程。5334计算和结果表示按式(2)计算：、， AV2100Vim31 000式中：xz试样中总黄酮的含量，单位为毫克每百克(mg100 g)A由标准曲线算得被测液中黄酮量，单位为微克(pg)；4GBT 24283-2009v：试样定容总体积，单位为毫升(mL)；V。吸取的上清液体积，单位为毫升(mL)；豫试样质量，单位为克(g)。计算结果保留二位有效数字。534氧化时间5341原理通常用高锰酸钾紫红色溶液消退的时间来表示蜂胶中还原性物质的含量。5342试剂和材料a)乙醇：
11、分析纯(95以上)；b) 高锰酸钾标准溶液：精确称取1580 g高锰酸钾(分析纯95)，用水稀释至1 000 mL，配制成001 molL的高锰酸钾溶液；c)硫酸：分析纯(9598)，配制成20硫酸液；d)蒸馏水。5343仪器a)天平(感量0001 g)；b)振荡器；c)秒表；d)250 mL具塞磨口锥形瓶；e)50 mL、100 mL、1 000 mL容量瓶；f)50mL锥形瓶；g)02 mL、10 mL、20 mL、50 mL、100 mL移液管；h)漏斗、定量滤纸；i)250 nL微量移液器。5344步骤a) 在室温下称取1 g(精确到0001 g)样品，置于250 mL具塞锥形瓶中，加
12、入25 mL乙醇，盖好瓶塞，于振荡器上低速振荡1 h，然后加入100 mL蒸馏水，充分摇匀后，过滤，收集滤液。b)用移液管吸取05 mL上述滤液放入50 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度并混匀。c)用移液管吸取10 mL稀释液于50 mL锥形瓶中，加入20 mL 20硫酸，振荡1 min，然后用200 mL微量移液器加入005 mL 001 molL高锰酸钾溶液，在加入高锰酸钾溶液的同时，开动秒表振荡，当溶液的紫红色完全消退时，停止秒表，记录溶液的紫红色完全消退所耗用的时间(以“s”计)，即是该样品的氧化时间。每个样品平行测定三次，取算术平均值作为该样品的测定值。6包装61应采用符合国家食品安
13、全卫生要求的材料包装。蜂胶乙醇提取物应定量包装。包装场地应符合食品安全卫生要求。包装应严密、牢固，便于装卸、贮存和运输。62应按等级分别包装。7标志71包装上应标明产品名称、等级、数量、生产者的名称、地址和生产日期。5GBT 24283-200972图示标志应符合GBT 191的规定。8贮存81贮存场所应清洁卫生、干燥、阴凉、通风，不应与有毒、有害、有异味、有腐蚀性、有放射性和可能发生污染的物品同场所贮存。82产品应按等级、规格分别存放。9运输91运输工具应清洁卫生。92不应与有毒、有害、有异味、易污染的物品混装运输。93防高温、曝晒、雨淋。参考文献GBT 24283-20091保健食品检验与评价技术规范中“保健食品中总黄酮的测定”(2003版 中华人民共和国卫生部)
