1、ICS 65. 160 X 87 h:温E._o.j，-:.:冒.寺._f!SE!,:!iiJ t，:tI畏.、._.温r: . 圃:I口叫Z孟矗画面画.v.，r:._ L一一、:，.野性胃._V:，.斗ii-g:. 飞革!.，:，:，.t，IP.:，气开:.:.，:.，:.:.，唱唱国中华人民共和国国家标准GB/T 28971-2012 卷烟侧流烟气中烟草特有N-亚硝肢的测定气相色谱E热能分析仪法Cigarettes-Determination of tobacco specific N-nitrosamines in sidestream smoke-GC-TEA method 2012-
2、12-31发布2013-06-01实施.，. . 码冒r8;生Lf/FKj飞二-，/ j 唱ggp刮京ffj_且伪中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布G/T 28971-2012 目。自本标准按照GB/T1. 1-2009和GB/T20001. 4-2001给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会(SAC/TC144)归口。本标准起草单位=中国烟草总公司郑州烟草研究院、红塔烟草(集团)有限责任公司。本标准主要起草人z刘克建、杨柳、王洪波、彭斌、张凤梅、
3、庞永强、赵乐、张晓兵、谢复炜、黄华发、白若石。I GB/T 28971-2012 1 范围卷烟侧流烟气中烟草特有N-亚硝肢的测定气相色谱-热能分析仪法本标准规定了卷烟侧流烟气中N亚硝基降烟碱(NNN)、N-亚硝基新烟碱(NAT)、N-亚硝基假木贼喊(NAB)和4-(甲基亚硝胶基)-1-(3-毗院基)-1-丁酣(NNK)4种烟草特有亚硝胶的气相色谱热能分析仪测定方法。本标准适用于卷烟侧流烟气中NNN、NAT、NAB、NNK等4种烟草特有亚硝肢的测定。本方法测定卷烟侧流烟气中NNN的检出限为1.0 ng/cig，定量限为3.3ng/cig;NAT的检出限为0.9 ng/cig，定量限为2.9ng/
4、cig;NAB的检出限为1.0 ng/cig，定量限为3.5 ng/ cig; NNK的检出限为1. 0 ng/c毡，定量限为3.5ng/cigo 2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 19609卷烟用常规分析用吸烟机测定总粒相物和焦袖YC/T 185卷烟侧流烟气中焦油和烟碱的测定3 术语和定义3. 1 下列术语和定义适用于本文件。烟草特有N-亚硝肢tobacco specific N-nitrosam
5、ines(TSNAs) 仅在烟草及烟草制品中存在的N-亚硝肢。4 原理使用抗坏血酸处理后的玻璃纤维滤片和侧流抽吸专用鱼尾罩，分别捕集卷烟侧流烟气中的总粒相物，用二氯甲烧萃取粒相物中的TSNAs，浓缩萃取物并用碱性氧化铝层析柱进行纯化。通过气相色谱热能分析联用仪(GC-TEA)测定萃取物中亚硝腊的含量。5 试剂与材料除特别要求以外，均应使用分析纯级试剂，水应符合GB/T6682中二级水的规定。警告一-NNN和NNK是强烈致癌物质。所有前处理操作应在通风橱内进行，实验人员要佩带防护手套、面具以保证安全。实验废液收集后要统一处理。1 GB/T 28971-2012 5. 1 二氯甲皖，色谱纯。5.2
6、 甲晖，色谱纯。5.3 元水硫酸铀，应在550c条件下活化5h. 5.4 抗坏血酸，白色粉末，不应有颜色变化。5.5 碱性氧化铝(200300)目，pH为9.5士O.吨，应在110C下活化8h以上。5.6 N-戊基-(3-甲基毗睫基亚硝胶(内标、NNN、NAT、NAB、NNK，纯度应不小于98%。5. 7 竣甲基纤维素铀(CMC)。5.8 抗坏血酸-甲醇饱和溶液用不少于5g抗坏血酸(5.4)溶解于100mL甲醇(5.2)中，振荡摇匀，应确保底部有不榕固体物存在。5.9 抗坏血酸饱和溶液用不少于40g抗坏血酸(5.的语解于100mL水中，振荡摇匀，应确保底部有不溶固体物存在。5. 10 甲酶-二
7、氯甲烧榕液(8%，体积比)，用作洗脱液。5. 11 内标溶液5. 11. 1 内标储备液称取(10士O.5)mg N-成基(3甲基毗院基亚硝肢。.6) ，精确至0.1mg，使用的50mL二氯甲烧(5.1)完全溶解后，转移至100mL棕色容量瓶中，用二二氧甲:民(5.1)定容至刻度。该肉标储备液在一20c条件下存放，有效期为6个月。5. 11.2 一级内标溶液移取2mL内标储备液(5.11.1)至50mL棕色容量瓶中，用二氯甲皖(5.1)定容至刻度。该内标溶液在一20.C条件下存放，有效期为6个月。5. 11. 3 二级内标潜液移取10mL一银内标溶液(5.11.2)至100mL棕色容量瓶中，用
8、二氯甲烧(5.1)定容至刻度。该内标溶液在一20.C条件下存放，有效期为3个月。5.12 TSNAs标准潜被5. 12. 1 标准储备掖分别称取(10士O.5)mg NNN、NAT、NAB和NNK(5.的，精确至0.1mg，使用约5mL二氯甲烧(5.1)完全溶解后，转移至10mL栋色容量瓶中，用二氯甲烧白.1)定容至刻度。该标准储备液在一20c条件下存放，有效期为6个月。5. 12.2 一级标准储备液移取1mL标准储备液(5.12.1)至100mL棕色容量瓶中，用二氯甲炕(5.1)定容至刻度。该标准储备溶液在一20.C条件下存放，有效期为6个月。5. 12.3 二级标准储备液移取1mL一级标准
9、储备痞液(5.12. 2)至10mL棕色容量瓶中，用二氯甲烧(5.1)定容至刻度。该标准储备榕液在一20c条件下存放，有效期为3个月。5. 12.4 TSNAs工作标准溶液分别移取0.5mL、1mL、2mL、5mL二级标准储备液(5.12.3)，1mL、2mL一级标准储备液(5. 12.2)至不同的10mL棕色容量瓶中，再分别加入1mL二级内标榕液(5.11.3)，最后用二氯甲烧(5.1)定容至刻度。对含量低于最低标线的测试样品，应重新配置工作标准溶液。对于高浓度样品，应稀释后进样。TSNAs工作标准榕液应即配即用。GB/T 28971-2012 6 仪器设备常用实验仪器以及下述各项。6. 1
10、 分析天平，感量0.1mg。6.2 气相色谱-热能分析联用仪按照制造商操作手册运行气相色谱-热能分析联用仪。以下分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性。二十一程序升温z初始温度150.C，保持2min; 3 .C/min升至175.C，保持8min;以5.C/min升至210C;以30.C/min升至250OC，保持5min; 进样口温度:230 C, 载气z氮气，恒流10mL/tnin; 进样量2l，.不分流，不分流时间1min，吹扫流量50mL/mJn; 一一热裂解温度:500C; 接口温度:250c。6.3 超声波发生器功率可调或功率280W)。6.4 氮吹散缩仪(或旋转蒸发仪)。
11、6.5 色谱柱z弹性毛细管柱30mXO. 53 mmXlm.推荐固定液:50%二苯基50%二甲基硅氧烧共聚物，其他色谱柱J1L验证其适用性。6.6 保护柱=弹性石英毛细管桂1mXO. 53 mm，经脱活处理。样品分析次数达罔30次即应更换保护柱。6. 7 玻璃层析柱z具塞，内轻20mm，长度300mm, 6.8 侧流眼烟机。7 分析步骤7. 1 玻璃纤维谑片处理于洁净容器上，向44mm瑛璃纤维滤片加人2mL抗坏血酸-甲薛饱和谐液(5.8)，在避光通风场所自然晾干后，转人温度为(22士1)C、相对湿度为(60士2)%的环境下平衡48h以上。处理后玻璃纤维滤片应常温避光保存，有效期为一周。7.2
12、鱼尾罩处理称取200g抗坏血酸饱和溶液(5.的，在磁力搅拌下缓慢加入3g援甲基纤维素铀(5.7)，搅拌至完全榕解，得到粘度约为1200 cp的溶液。该溶液-20c条件下存放，有效期为一周。用上述溶液充分浸润侧流吸烟机专用标准鱼尾罩内壁后，将鱼尾罩口向下悬挂于通风避光处静止过夜，使罩内壁完全变干。7.3 卷烟抽吸按照GB/T19609的要求调节烟支水分，并确定和标记烟蒂长度。按照YC/T185的要求，调节鱼尾罩气体流量为(3士O.l)L/mino按照GB/T19609的要求在每张滤片抽吸2支卷烟(对侧流烟气亚硝腊传输量特别低的卷烟可每张滤片抽吸3支)，抽吸完成后，应在6h内完成样品的分析处理。3
13、 GB/T 28971-2012 7.4 样晶处理7.4. 1 样晶革取将抽吸后的5张滤片(7.3)置于250mL锥形瓶中，每个鱼尾罩使用20mL二氯甲烧(5.1)洗涤，合并洗涤液于具滤片锥形瓶中。将锥形瓶置于超声波发生器(6.3)内，超声萃取30min。萃取完成后将萃取液转移至浓缩瓶中。分3次，每次15mL二氯甲烧(5.1)淋洗萃取瓶，合并后转移至浓缩瓶。7.4.2 萃取液浓缩在氮吹浓缩仪或旋转蒸发仪(6.4)上，将萃取液(7.4.1)在40c条件下浓缩至约5mL。7.4.3 样品净化7.4.3. 1 层析柱准备向玻璃层析柱(6.7)中加人30mL二氯甲皖(5.口，用湿法将15g碱性氧化铝(
14、5.5)加到层析柱中，充分搅拌并赶走所有气泡，然后再向柱中装人10g元水硫酸铀(5.3)。用50mL二氯甲皖(5.1)淋洗层析柱。7.4.3.2 层析(样品分离)将浓缩萃取液(7.4.2)一次性加入到层析柱(7.4.3.1)中。分3次，每次5mL二氯甲烧(5.1)洗涤浓缩瓶，合并洗涤液加入到层析柱中。用30mL二氯甲烧(5.1)淋洗层析柱，流速约为2mL/min，不收集该部分洗脱液。用100mL洗脱液(5.10)淋洗层析柱，收集此部分洗脱液至另一浓缩瓶中。7.4.4 洗脱液浓缩洗脱液(7.4.3.2)中加人1mL二级内标潜液(5.11.3)，在氮吹浓缩仪或旋转蒸发仪(6.4)上浓缩至0.5mL
15、，使用0.5mL二氯甲皖(5.1)洗涤浓缩瓶壁，合并转移至2mL色谱分析瓶中待分析。7.5 样晶测定用气相色谱-热能分析联用仪(6.2)测定TSNAs工作标准溶液(5.12.的，得到4种TSNAs和内标的积分峰面积，用TSNAs与内标峰面积的比值作为纵坐标，TSNAs的浓度作为横坐标，分别建立4种TSNAs成分的校正曲线。对校正数据进行线性回归.RZ应不小于0.995。测定浓缩洗脱液(7.4.的，根据样品中的峰面积比值计算每一个卷烟侧流烟气样品中4种TSNAs的浓度。标准样品和卷烟样品典型色谱图参见附录A。8 结果的计算与表述4 侧流烟气中4种TSNAs的传输量m由公式(1)计算得出zoXL
16、m=-一一n 式中zm一一卷烟侧流烟气TSNAs的传输量，单位为纳克每支(ng/cig); p一一浓缩洗脱液中TSNAs的质量浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL); L-一浓缩洗脱液的体积，单位为毫升(mL);n -一烟支数量，单位为支(cig)。. ( 1 ) GB/T 28971-2012 取两个平行样品的算术平均值作为样品的测试结果。结果精确到0.1ng/cig。两次平行测定结果的相对标准偏差不超过10%。9 精密度和回收率本方法的精密度和回收率结果参见附录B.10 检验报告检验报告应包括以下内容:一一检验环境大气条件g一卷烟的名称、规格、类型、盒标焦袖量、盒标烟气烟碱量F检验结果包括各
17、单次测定结果及其平均值;一一卷烟总粒相物产生量F一总粒相物中烟碱含量(或烟气烟碱量);一二总粒相物中水分含量;依据本标准所使用的试验方法;测定结果，包括各单次测定结果及其平均值F与本标准规定的分析步骤的差异;一一在试验中观察到的异常现象;一一试验日期p一一测定人员。5 GB/T 28971-2012 附录A(资料性附录色谱圄示倒按照本标准规定的方法对卷烟样品和标准样品进行分析得到的典型色谱图如图A.l和图A.2。6 15V口脯1A. A1B帆嗣啊。、，T5阳E田DAT，翩翩田剧目回国1203拥向2酶12-223町15 10 5 。-5 -10 7.5 1一-IS;2一-NNN;3一一-NAT，
18、4一一-NAB;5一-NNK。10 2 12.5 15 17.5 20 22.5 固A.1典型卷烟样晶色谱圄1臼5V=A剧19剧1A比飞.剧比M咽t阳B剧怕A.曲扭蜡寻(D丸fs盹眉田凯飞DA盯龟盯A吐田009盹喧e田t咀0咀宦e田田树四回1 10 7.5 5 2.5 4 2 3 。-2.5 -5 -7.5 -10 3 5 10 15 1一一-IS;2-一-NNN，3一一-NAT;4一一-NAB;5一一-NNK.图A.2标准样晶色谱圄25 27.5 30 mm 5 20 25 min GB/T 28971-2012 附录B(资料性附录)方法的精密度和回收率本方法的精密度和回收率结果见表B.L表
19、B.1本方法的精密度和回收率结果单位:%TSNAs 混合型卷烟测定变异系数姥烟型卷烟测定变异系数加标回收率(n=25) (n=25) (n=5) NNN 4.4 9.1 91. 8 NAT 5.9 7.9 88.3 NAB 9 9.8 94.3 NNK 4.3 7.2 90. 1 NFON-hgNH阁。华人民共和国家标准卷烟侧流烟气中烟草特有N-亚硝股的测定气相色谱-热能分析仪法GB/T 28971-2012 国白* 中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100013)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心:(010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销 印张0.75字数14千字2013年5月第一次印刷开本880X12301/16 2013年5月第一版* 书号:155066 146525定价16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107GB/T 28971-2012 打印日期:2013年5月22HF002A
