1、GB/T 168731997 前 言 为保护散鳞镜鲤的种质资源，保存散鳞镜鲤的种质性状，防止变异和退化，特制定本标准。 本标准是“七五”、“八五”科技攻关成果和前人生产实践的总结。 本标准的附录A至附录C是标准的附录。 本标准自1998年1月1日起实施。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所。 本标准主要起草人：刘明华、沈俊宝、范兆廷。 1 范围 本标准规定了散鳞镜鲤（ Cyprinus carpio haematopterus Temm.et Sch.）良种主要生物学性状、生化指标、
2、遗传学特性，以及检测方法。适用于散鳞镜鲤良种鉴定。 2 名称与分类 2.1 学名 鲤（ Cyprinus carpio haematopterus Temm.et Sch.） 2.2 分类位置 属鲤形目（Cypriniformes），鲤科（Cyprinidae），鲤亚科（Cyprininae），鲤属（ Cyprinus），鲤亚属（ Cyprinus），鲤种（ Cyprinus carpio haematopterus）。 3 主要生物学性状 3.1 外部特征 3.1.1 形态性状 体纺锤形，背部稍隆起，头较小，吻钝，口亚下位，略呈马蹄形，上下颚可伸缩。由头部至尾鳍有一行背鳞，沿侧线连续或不连续
3、排列大小不规则的鳞片，在鳃盖后缘和尾部覆盖稍大鳞片，而胸、腹、臀鳍基部有较小鳞片，其他部位裸露。侧线较平直。体青灰色或棕褐色，尾鳍下叶呈浅桔红色，见图1 页码，1/7GB/T 1687319972006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbhH168730a.htm图 1 散鳞镜鲤外形 3.1.2 可数性状 3.1.2.1 背鳍硬棘（），分枝鳍条数1621，多数为1920。 3.1.2.2 左侧第一鳃弓鳃耙数2024，多数为22。 3.1.2.3 须2对，口须较长，一般为颌须长的2倍左右。 3.1.3 可量性状 不同体长组个体，可量性状变动值见表1。 表 1 组别
4、项目 1 2 3 全长，mm 84.0147.0 244.0278.0 392.0469.0 体长，mm 65.0116.5 193.0223.0 306.0360.0 体长/体高 2.25 2.62 2.82 页码，2/7GB/T 1687319972006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbhH168730a.htm3.2 内部特征 3.2.1 鳔 鳔分两室，前室较后室大，长度约为后室的1.5倍。 3.2.2 肋骨 肋骨有16对。 3.2.3 下咽齿 下咽齿3行。齿式为113/311。 3.2.4 脊椎骨 脊椎骨总数为颅后椎骨、腹椎骨、尾椎骨数之和。 脊椎骨总
5、数、颅后椎骨、腹椎骨、尾椎骨数分别为3637、4、1617、16块。 3.2.5 腹膜 腹膜为银白色。 3.3 生长与繁殖 3.3.1 生长 不同年龄组的鱼体长和体重的实测值见表2。 表 2 体长/头长 3.08 3.21 3.49 体长/尾柄长 7.41 7.08 8.06 体长/尾柄高 7.37 6.90 6.57 头长/吻长 2.88 2.61 2.49 头长/眼径 3.88 6.00 6.86 头长/眼间距 2.49 2.58 2.43 页码，3/7GB/T 1687319972006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbhH168730a.htm3.3.2
6、 繁殖 3.3.2.1 成熟年龄：雌鱼24龄，雄鱼13龄。 3.3.2.2 性腺一年成熟一次，分批产卵。 3.3.2.3 繁殖水温：1625。 3.3.2.4 怀卵量：不同年龄个体怀卵量见表3。 表 3 4 生化指标 同工酶谱与基因位点。肝脏酯酶（EST）有谱带68条，基因位点有6个，其中EST-1有三种表现型，EST-6有二种表现型（见图2）。 年龄1），龄1 2 3 4 体长，mm 65116 222276 265353 332410 体重，g 1355 408810 7501350 13252705 1）年龄，主要依据脊椎骨上的年轮标志年龄 年龄，龄 4 5 6 7 体重，g 12002
7、200 15502700 22753850 35004900 绝对怀卵量，粒 112103301.4103180103320103300103520103342103682103相对怀卵量，粒/g 93137 97127 118135 97136 页码，4/7GB/T 1687319972006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbhH168730a.htm 图 2 散鳞镜鲤肝酯酶电泳图谱 5 遗传学特性 5.1 体细胞染色体2倍数 2n=100。 5.2 核型 中部着丝粒染色体和亚中部着丝粒染色体（m组和sm组）23对，亚端部和端部着丝粒染色体（st组和t组）27
8、对，染色体臂数（NF）146（见图3）。 图 3 散鳞镜鲤的染色体组型 5.3 脱氧核糖核酸（DNA）含量 每个红血球细胞核的DNA含量为4.57pg（与鸡血对照）。 6 检测方法 6.1 生化遗传分析 6.1.1 样品制备 页码，5/7GB/T 1687319972006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbhH168730a.htm 取活体健康鱼的肝脏0.3g，用蒸馏水稀释（13）匀浆，在4条件下离心（15000r/min）20 min，取上清液放冰箱（4）保存备用。 6.1.2 电泳方法及染色 使用水平平板恒温电泳仪。聚丙烯酰胺凝胶浓度为5.59。三羟甲基氨基
9、甲烷-柠檬酸缓冲液pH值为7.0。从冰箱取出上清液与指示剂（0.4溴酚蓝）混合后点样，每个加样孔加10 L，每一样品重复一次。电泳经过：预电泳（点样前，恒流50mA，30min），前电泳（点样后，恒流20mA，10min），前电泳后正式电泳（恒压 900 V，30100min），电泳恒温4，染色，染色液配方见附录A（标准的附录）。 6.1.3 结果判定 将测定结果对照图2谱带确定该种同工酶的编码座位数和多态座位的同位基因数。 6.2 染色体检测 6.2.1 标本制备 采用肾组织细胞加植物血凝聚素（PHA），在25条件下培养24h，经吹风或者自然干燥制片，吉姆萨（Giemsa）染色。Giemsa
10、染色液的配制见附录B（标准的附录）。 6.2.2 计数 在光镜下，选取染色体铺散良好，完整的中期分裂相计算染色体数目，确定2n数。 6.2.3 形态分类 选择10个以上的分裂相，进行显微拍照，按放大照片对染色体组型分析。染色体的形态类别，按以下要求划分：即臂比1.01.7为中部着丝粒染色体（m组）；1.713.0为亚中部着丝粒染色体（sm组）；3.17.0为亚端部着丝粒染色体（st组）；7.1的为端部着丝粒染色体（t组）。m组和sm组染色体臂数为2；st组和t组染色体臂数为1。 6.3 脱氧核糖核酸（DNA）含量测定 6.3.1 血涂片制备 从尾动脉采血0.5mL，生理盐水稀释制成血涂片；同时
11、采小公鸡血，用同法制片作对照。6.3.2 固定 血涂片空气干燥后，用卡诺氏液（甲醇：冰乙酸，为31）固定1h，然后将血涂片移出存放于4冰箱中或者直接染色。 6.3.3 染色 血涂片经3.5mol HCl水解30 min（28），蒸馏水冲洗，放入希夫（Schiff）试剂其配制方法见附录C（标准的附录），于28暗处染色1h，立即用二氧化硫水洗35次，每次210min，再经梯度酒精70、80、90、95、100脱水，二甲苯透明后用胶封片。 6.3.4 DNA含量测定 页码，6/7GB/T 1687319972006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbhH168730a.
12、htm 用显微分光光度计测量，波长560nm，扫描步距0.51 m。 附 录 A （标准的附录） 酯酶染色液配方 附 录 B （标准的附录） 吉姆萨（Giemsa）染色液配制 B1 Giemsa 染色母液配制 称量0.5g Giemsa粉，量取甘油33mL，在研钵中先用少量甘油与Giemsa粉混合，研磨至无颗粒时再将剩余甘油加入，在56条件下保温2h后，加入33mL甲醇，保存于棕色瓶内。 B2 pH7.2 磷酸缓冲液配制 0.2mol磷酸氢二钠（Na2HPO4）溶液72.0mL加上0.2mol磷酸二氢钠（NaH2PO4）溶液28.0mL即成。 B3 Giemsa工作染色液配制 取100mL p
13、H7.2磷酸缓冲液，加入3mL Giemsa染色母液即成。 附 录 C （标准的附录） 希夫（Schiff）试剂的配制 将0.5g碱性品红溶于100mL热蒸馏水中，使之充分溶解，待溶液冷却至50时过滤，再冷却到25时加入1 mol盐酸（HCl）10mL和1g亚硫酸氢钠（NaHSO3）或1.5g偏重亚硫酸钠（Na2S2O5），放置暗处，静置24h后，加0.250.5g活性炭摇荡1min，过滤，溶液呈无色，装入棕色瓶中塞紧瓶塞，保存在冰箱内（04），用前预先取出，使之恢复至室温后再用。如溶液呈粉红色就不能用，须重配。 -乙酸萘酯 40mg坚牢蓝B盐 100mg三羟甲基氨基甲烷-柠檬酸缓冲液（1 mol，pH7.0） 15 mL蒸馏水 135mL页码，7/7GB/T 1687319972006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbhH168730a.htm
