1、ICS 6718020X 11中华人民 共和，、7-H囝目国国家标准GBT 224281-2008IS0 5377：1 98 1代替GBT 12099-1989淀粉水解产品 还原力和葡萄糖当量测定Starch hydrolysis products-Determination ofreducing power and dextrose equivalent(IS()5377：1981，Starch hydrolysis products-Determination of reducing powerand dextrose equivalent Lane and Eynon constant
2、titre method，IDT)20081019发布 2009030 1实施宰瞀粥鬻瓣警雠瞥星发布中国国家标准化管理委员会“”1刖 吾GBT 224281-2008ISO 53771981本标准等同采用ISO 5377：1981淀粉水解产品 还原力和葡萄糖当量测定 莱恩艾农滴定法(英文版)，因该版本较老，为适应当前需要，结构略作调整，内容保持-致，仪做了编辑性修改。本标准代替GBT 12099 1989淀粉水解产品还原力和葡萄糖当量测定方法。本标准和OBT 12099 1989相比主要修改如下：一标准名称改为淀粉水解产晶 还原力和葡萄糖当量测定；完善了标准格式，按国际单位制规范了单位；一增加
3、了“lo实验报告”；一增加了附录A；增加了参考文献。本标准的附录A为资料性附录。本标准由中国商业联合会提出并归口。本标准起草单位：中国商业联合会商业标准中心、江南犬学食品学院、中国淀粉工业协会变性淀粉专业委员会、苏州高峰精细化工有限公司、罗盖特(中国)精细化工有限公司。本标准主要起草人：顾正彪、洪雁、程力、陈洪兴、杨钟超、庞艳生、李燕、靳晓蕾。GBT 224281-2008ISO 5377：198淀粉水解产品 还原力和葡萄糖当量测定1范围本标准规定了莱恩一艾农(Lanc and Eynon)滴定法测定淀粉水解产品的还原力和葡萄糖当量的方法。本标准适用于淀粉水解产品，2规范性引用文件下列文件中的
4、条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使膪这些文件的最新版本。凡是不往日期的引用文件，其最新版本适目1一本标准。GBT 224278淀粉及其衍生物硫酸化灰分测定(GBT 224278 2008，ISO 5809：1 982，II)T)GBT 224283葡萄糖干燥失重测定(GBT 224283 2008，ISO 1741：l 980，IDT)GBT 224284葡萄糖浆干物质测定(GBT 224284 2008，ISO 1742：1980，IDT)ISO 1743
5、葡萄糖浆干物质测定折射率法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。31还原力reducing power；RP还原糖的含量。以100 g样品中无水D一葡萄糖的克数来表示。32葡萄糖当量dextrose equivalent；DE淀粉水解产品的还原能力。以100 g样品干基中无水D葡萄糖的克数来表示。4原理以亚甲基蓝作指示剂，用已知体积的费林试剂滴定葡萄糖溶液。5试剂应使用分析纯试剂和蒸馏水或相当纯度的水。51费林试剂511储液A：将五水硫酸铜(CuSOt5H：0)693 g加水溶解并定容至1 0000 mi。512储液B：四水合酒石酸钾钠(KNaCtHOs4H。0)3460 g和氢氧化钠(Na
6、OH)1000 g，加水定容至1 0000 mL。若有沉淀，使用前过滤。513混合费林溶液：将】00 mL储液A(5，11)和100 m1储液B(512)倒人下燥试剂瓶中，并混合均匀。注：此溶液现配现用。52无水D一葡萄糖无水D葡萄糖应符合下列要求：a)溶液浓度为400 gL，这样可避免出现混浊和沉淀并保持溶液透明无色，可通过纳氏管(65)】GBT 224281-2008ISO 5377：1981来检验。b)按GBT 224278规定的方法测定时，硫酸化灰分含量质量分数应不超过001。修改后的GBT 224278如下：1)试样质量：部分应增重到20 g。2) 只能用铂坩埚来测定灰分。3)在测定
7、灰分之前，称重铂坩埚，精确到01 g。c) 麦芽糖和(或)异麦芽糖含量的质量分数应不超过01，并检测不出较大分子质量的糖。53 D一葡萄糖标准溶液531按GBT 224283规定的方法(参见附录A)，测定无水D一葡萄糖(52)中干物质的含量。532称取0600 g无水D葡萄糖(52)，精确至0000 1 g。溶解于水中，再将溶液定量移入i00 mL的容量瓶(64)内，用水定容至刻度，并摇匀。现配现用。54亚甲基蓝指示剂C-1 g。水溶液。6仪器61细口烧瓶：250 mL。62酸式滴定管：25 mL，最小刻度是005 ml。63移液管：1 mL和25 mL。64容量瓶：100 mL、500 mL
8、和l 000 mL。65纳氏管：50 mL。66加热装置：根据714要求能使溶液保持沸腾状态，并无须将烧瓶从加热器上移去而观察溶液的颜色变化。67秒表。7操作过程在操作中应添加防沸物避免溶液暴沸。在测定时应防止滴定管靠近加热装置。71 混合费林溶液(513)的标定711用移液管(63)移取25 mL的混合费林溶液(513)，将其注人干燥洁净的细口烧瓶(61)中。712将D一葡萄糖标准溶液(53)注入滴定管(62)至刻度。713将滴定管中的18 mL D葡萄糖标准溶液(53)注入烧瓶，摇动烧瓶，混合溶液。714把烧瓶放在事先调节好的加热装置上，使溶液在120 s15 S内开始沸腾。沸腾开始后不要
9、再去调节加热装置，使沸腾开始产生的蒸汽始终充满烧瓶，并持续在整个滴定过程中，这样以防止空气进入烧瓶而氧化瓶中溶液。715使瓶中溶液沸腾并持续120 s，以秒表定时，快速加入1 mL亚甲基蓝指示剂溶液(54)。之后迅速将滴定管中D葡萄糖标准溶液(53)滴人烧瓶，滴量为每次05 mL，直至指示剂蓝色消失，读取D一葡萄糖标准溶液的毫升数。整个过程溶液始终保持沸腾。注：从滴定烧瓶溶液上表面观察亚甲基蓝的蓝色消失是最好的方法，它可避免红色氧化铜(I)的干扰。在烧瓶背后放置白色屏障将更有利于观察。716重复711和71_2。717从滴定管中将03 mL的D葡萄糖标准溶液(53)注入烧瓶中。718重复714
10、。719瓶中溶液沸腾并持续120 S，以秒表定时，快速加入1 mL亚甲基蓝指示剂(54)。之后迅速将滴定管中D一葡萄糖标准溶液(53)滴人烧瓶，滴量每次为02 mL，直至指示剂蓝色消失，读取D一葡萄2GBT 224281-2008ISO 5377二198糖标准溶液的毫升数。整个过程溶液始终保持沸腾。反应即将结束时，D一葡萄糖溶液的滴加间歇时间应在10 s15 s之间，整个滴定过程应在60 s内完成，以使整个沸腾时间不超过180 5。第三次滴定时，为达到时间上的要求，可适当调整D一葡萄糖标准溶液的初加量。7110观察D一葡萄糖标准溶液的毫升数。7111 D葡萄糖标准溶液的毫升数基本上在19 mL
11、21 mL之间。若超出此范围，可适当调整费林储液A(511)的浓度并重复整个标定过程。7112重复7167110，计算两次滴定平均消耗的体积V，单位为毫升(mL)。7113对于经常标定的混合费林溶液，体积V、是一个准确值，所以仅需作一次滴定即可。D一葡萄糖标准溶液的初加量可为V。一05 mL。注：由于涉及到人的冈素，所以每个测定者有自己的y。，在计算时也应使用自己的V值。72测定72 1样品预处理样品应混合均匀后装入一个密封容器内。样品为粉状或晶体时，应粉碎后混合装入；样品足二E晶体的f司体时，应将其放人一个密闭容器内，浸在6070水浴锅内熔化，随后冷却至室温，带盖摇动几次，以使容器内所有的冷
12、凝水与样品充分混合；样品是液体时，就在容器内搅动，若表面有凝结，除去表皮。722若不知样品中还原糖含量，则可通过修正后的711715测出它的大约值。a)加10ml。样品液代替713的D葡萄糖标准溶液。b)在714后：1)溶液迅速沸腾，加入1 mL亚甲基蓝指示剂(54)，每次滴量为1o mL，问歇时问为10 s，直至指示剂蓝色消失。如果样品液在未加到1 mL增量之前，蓝色已消失，则降低样品液的浓度，并重新滴定。2)读取样品液的体积v，单位为毫升(mL)。V应不大于50 mL。若超过，则增加样品液的浓度。3)样品的预测还原力(ARP)(31)可按式(1)计算：脚一产一谔等式中：ARP 样品的预测还
13、原力，单位为克每百克(glOO g)；F!警一o006)4V。；v、 消耗D葡萄糖标准溶液的体积，单位为毫升(mL)；v 7样品液的体积，单位为毫升(mL)；m。 500 mL样品液中样品的质量，单位为克(g)。样品的质量可按式(2)计算：300”o一百西 (2)723称样称样，精确至0001 g，使样品中还原糖的含量在285 g31 5 g(以无水D一葡萄糖计)之问。724样品液预处理将样品(723)溶于水中，然后将溶液定量地转移至500 mL的容量瓶(64)中，加水至刻度并充分摇匀。725滴定7251以样品液(724)代替D葡萄糖标准溶液(53)，重复711719。GBT 224281-2
14、008IS0 5377：19817252读取样品液消耗的体积v。，单位为毫升(mL)。7253样品液消耗的体积基本上应在1 9 mL21 mL之间。若超过，则增加或降低样品液的浓度并重复7251和7252。7254应进行平行实验。73干物质含量测定按下列方法测定样晶中的于物质含量(DMC)，：a)对已干燥的葡萄糖浆，按GBT 224284规定的真空干燥法。b)对无水葡萄糖或水葡萄糖，按GBT 224283规定的方法。c)对葡萄糖浆，按ISO 1743规定的折光率法。8结果计算81计算方法811还原力(31)可按式(3)计算： RP一百0600XVl可500i100一詈等812葡萄糖当量(32)
15、可按式(4)计算：DE一RP面X面r100(3)(4)式中：v。 混合费林试剂在标定时所消耗的D葡萄糖标准溶液的体积，单位为毫升(mL)；v。 在测定时所消耗的样品液的体积，单位为毫升(mL)；m 配制500 mL样品液时样品的质量，单位为克(g)；DMC 样的干物质含量，。取平行实验的算术平均值为结果。9精密度91重复性平行实验结果的绝对差值应不超过算术平均值的075。92再现性在不同的实验室由不同实验者采用不同仪器、相同材料、相同方法进行的两个独立实验得到的结果的绝对差值不能超过算术平均值的15。10实验报告实验报告应列H；：实验方法；实验得到的结果；进行重复性实验而得到的两种实验结果。还
16、应列出所有未列出的操作环节以及任何偶然可能影响实验结果的环节。实验报告应包括完全测试试样必需的所有信息。附录A(资料性附录)无水D一葡萄糖测定方法GBT 224281-20081SO 5377：1981A1原理使用纸层析法从已知分子质量的无水D葡萄糖样品中分离更大分子量的麦芽糖和其他糖类。通过浸入含有加热的显色试剂的展开色谱形成的有颜色的斑点来判别被分离的糖。通过与葡萄糖和标准麦芽糖形成的斑点亮度，保证麦芽糖(无水)含量的质量分数不超过o1，用肉眼判别不同于D一葡萄糖和麦芽糖的蔗糖形成的斑点。注：麦芽糖和异麦芽糖不用特别的方法区分。A 2试剂应使用分析纯试剂和蒸馏水或相当纯度的水。A21三色谱
17、用纸纯棉纤维：185 gm2。a一纤维干重的质量分数超过97，在溶剂传播方向分化的尺度不小于140 ram(宽)420 mm(长)。注：使用沃特满3号色谱用纸。A22显色剂丙醇二酸7个体积比乙酸乙酯1个体积比水 2个体积比A23染色溶剂二苯胺1 g苯胺 1 ml，丙酮 100 m1亚磷酸(H。PO。)(质量分数为88)6 mL将二苯胺、苯胺溶解在丙酮中，加入亚磷酸混合。应在使用当天配制新鲜溶液。A24水合麦芽糖lo pI。溶液中无水麦芽糖浓度为20 gL，显示的斑点应在Ad4、A45、A46中。除麦芽糖之外的糖类质量不超过质量分数10(无水麦芽糖)。A25麦芽糖标准溶液(c=5 g无水麦芽糖l
18、。)称重，精确到1 mg，0526 g的水合麦芽糖，相当于0 500 g的无水麦芽糖，溶解在水中。转移至100 mL容量瓶，稀释至刻度。l ml，标准溶液含05 ing的无水麦芽糖。A26麦芽糖标准溶液(c=05 g无水麦芽糖L)用移液管移取10 mL标准麦芽糖溶液至100 mL容量瓶稀释至刻度，混匀。l mL此标准溶液含05 mg无水麦芽糖。A3仪器A31 容量瓶：100 mI，参见IS0 1042：1998的B等级要求。5GBT 224281-2008ISO 5377：1981A32移液管：10 mL，参见1SO 648：1977的B等级要求。A33移液枪：lO pL。A34 国产吹风机或
19、者合适的不超过40的热风源。A35色谱槽。A36将色谱纸浸在盛有染色剂(A23)的槽中。A37热风循环箱：适合加热色谱纸(A463)的规格，温度可以控制在801。A4步骤A 4 1实验样品应充分混合。A42使用当天配制的新鲜溶液作为实验溶液，包括250 gI。实验样品。A43色谱纸的预备A43 1 用石墨铅笔在平行140 13aITl的色谱纸边缘画一条80 mm的坐标线。注：80 mm的长度要根据使用色谱槽而变化。A432在这条线上用铅笔确5个坐标原点，A、B、c、D、E。每个相距20 film，从30 mm开始I画到420 IRaITI边缘。A44试验和麦芽糖标准溶液的使用A441 在每个坐
20、标原点B和D用移液枪(A、33)移取两个10 ILL实验溶液(A42)的增量(包括5 000 pg无水D葡萄糖)，移取后立即用热风机(见A34)吹干这些点。A 442在每个坐标点A、c和E用移液枪(A33)移取10 pL(包括5 pg无水麦芽糖)，移取后立即吹干。A45色谱展开A451 把上面的纸(A44)放在装有展开液的色谱槽中。注：色谱槽要避光。不通风或者密闭空间。保持在一个恒定的温度。A452让色谱展开8 h，在20时这个时问适用，但是如果温度升高，时问就要减少，保证中间D一葡萄糖的点(A46)从原点跑出至少50 mm但不被冲洗掉。A45 3将纸从色谱槽中拿出，吹干。注：纸要在合适的干燥
21、炉中，温度不超过40。A46检查糖点A4 61将干燥的色谱纸(A453)以均匀的速度通过有染色溶液(A23)的槽(A36)。A462将色谱排干水，在热风机(A34)或适合的干燥炉中干燥。A463将干燥的色谱(A462)放在循环的热风循环箱中(A37)。A464过5 rain后反复检查色谱。当色谱上的点已经染得很清楚但色谱没有上色时把它从干燥箱中拿出。A47分析色谱图A4 71从点B和D(A441)和点A、C、E(A442标准麦芽糖)中，从视觉上评定有颜色的麦芽糖点。A472分析除了B、D的D葡萄糖和麦芽糖的色谱上可见糖点。A5结果分析A51如果有麦芽糖点即B、D点(A441)没有点A、C、E(
22、A442)，则无水D葡萄糖样品中麦芽糖(尤水麦芽糖)的含量不超过01(质量分数)。6GBT 224281-20081SO 5377：19引A52如果只有D葡萄糖和麦芽糖的B、D两点着色，剩余的点都没有颜色，那么无水D一葡萄糖样品满足对麦芽糖和更大分子质量的糖的要求。A6方法的灵敏度可以使点着色的无水麦芽糖的质量小于2 pg。GBT 224281-2008IS0 5377：1981参考文献Eli ISO 1042：1998 Laboratory glasswar One mark volumetric flasks(实验室玻璃器皿一刻度容量瓶)2ISO 648：1977 Laboratory glassware Onemark pipettes(实验室玻璃器皿单列刻度移液管)
