1、; 中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN 0333-94 出口食品中大肠杆菌(葡萄糖苦酶荧光)检验方法Method for inspection of Escherichia coli in food for export -Fluorescence measurement of glucosidase 1994-12-26发布1995-05-01实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发布中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中大肠杆菌(葡萄糖苦酶荧光)检验方法岛Ifethodfor inspection of Escherichia coli in food for export
2、-Fluorescence measurement of glucosidase 1 主题内容与适用范围本标准规定了食品中大肠杆菌的定量检验方法。SN 0333-94 本标准适用于出口食品(不包括贝类)卫生质量的监视和出口前的筛选检验。2 引用标准SN 0169 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法3 设备和材料3.1 吸管:1mL和10mL,带刻度。3. 2 试管:16mmX 160 mm。3. 3 稀释瓶:500mL三角瓶或广口瓶。3.4 玻璃珠。3. 5 均质器。3. 6 水浴箱或培养箱:36士lC。3. 7 长波紫外光灯:366nm,功率6W。4 培养基和试剂4.1 LST
3、-MUG肉汤:见A1。4.2 Columbia-MUG琼脂培养基:见A2。4.3 生理盐水:见A3。5 样品制备按照SN0169 第4章进行。6 测定6.1 每个样品选三个连续稀释倍数的稀释液,每个稀释倍数的稀释液接种三管LST-MUG肉汤,每管1 mL。6.2 将接种管于30min内放入36士1C水浴或培养箱内,培养24土拙。6.3 将各管培养物拿至暗室,在长波紫外光灯照射下观察。凡显蓝色荧光的为大肠杆菌阳性。在阳性管上做好标记并记录。中华人民共和国国家进出口商品检验局1994-12-26批准1995-05-01实施1 SN 0333-94 6.4 从产气而不显荧光的各管取培养物,划线接种C
4、olumbia-MUG琼脂平板,36士lC培养24士2ho6.5 将培养后的Columbia-MUG平板拿至暗室,打开皿盖,在长波紫外光灯照射下观察有无蓝色荧光。凡显蓝色荧光的,无论其面积大小,均记为原LST-MUG管培养物为大肠杆菌阳性。7 结果的报告按LST-MUG管和Culumbia-MUG琼脂平板的大肠杆菌阳性数,查MPN表,报告每克(毫升)样品中大肠杆菌的MPN值。2 A1 LST-MUG肉汤膜蛋白酥或膜酷陈氧化纳乳糖磷酸氢二饵磷酸二氢饵月桂基硫酸铀MUG 蒸锢水SN 0333-94 附录A培弊基和试剂(补充件)20.0 g 5.0 g 5.0 g 2.75 g 2.75 g 0.1
5、 g 0.1 g 1 000 mL 将各成分溶于蒸锢水中,分装试管(内装倒立小发酵管),每管10mLo 121 C高压灭菌15min。最终pH6.8土0.2。A2 Columbia-MUG琼脂培养基膜酷陈13.0 g 水解蛋白6.0 g 酵母浸膏3.0 g 牛肉浸膏3.0 g 可溶性淀粉1. 0g 氯化铀5.0 g 琼脂13.0 g 蒸馆水1 000 mL 将各成分溶于水中,无须调pH值。1210C高压灭菌15min。冷却至55600C,倾注平板。A3 生理盐水氯化铀蒸锢水8.5 g 1 000 mL 分装于三角瓶或广口瓶,每瓶225mLo 1210C高压灭菌15mino 3 4 SN 0333-94 附加说明:本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。本标准由中华人民共和国内蒙古进出口商品检验局负责起草。本标准主要起草人颤宏太、刘中学、周云霞、苏庆。叮-22(京)新登字023号z m 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷1995年4月第一版书号,155066 2-9907 1995年4月第一次印刷中国标准出版社出版