1、中华人民共和国国家标准水质五日生化需氧量的测定稀释与接种法发布实施国家环境保护局发布中华人民共和国国家标准水质五日生化需氧量的测定稀释与接种法国家环境保护局批准实施本标准参照采用国际标准本国家标准规定采用稀释与接种法作为测定水中生化需氧量的标准方法这是一种经验性的常规方法适用范围本方法适用于大于或等于并且不超过的水样大于的水样仍可用本方法但由于稀释会造成误差有必要要求对测定结果做慎重的说明本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果它们不象单一的有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性但是它能提供用于评价各种水样质量的指标本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰那些对微生物有毒的
2、物质如杀菌剂有毒金属或游离氯等会抑制生化作用水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果定义生物化学需氧量在规定条件下水中有机物和无机物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧以质量浓度表示原理将水样注满培养瓶塞好后应不透气将瓶置于恒温条件下培养天培养前后分别测定溶解氧浓度由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量即值由于多数水样中含有较多的需氧物质其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧量因此在培养前需对水样进行稀释使培养后剩余的溶解氧符合规定一般水质检验所测只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量常用的区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培养瓶中投加硝化抑制
3、剂加入适量硝化抑制剂后所测出的耗氧量即为含碳物质的耗氧量在于培养时间内硝化作用的耗氧量取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足不能氧化显著量的还原性氮而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中往往含有大量硝化微生物因此测定这种水样时应抑制其硝化反应在测定的同时需用葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证试验试剂分析时只采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水水中含铜不应高于并不应有氯氯胺苛性碱有机物和酸类接种水如试验样品本身不含有足够的合适性微生物应采用下述方法之一以获得接种水城市废水取自污水管或取自没有明显工业污
4、染的住宅区污水管这种水在使用前应倾出上清液备用在水中加入花园土壤混合并静置取上清液用水稀释至含有城市污水的河水或湖水污水处理厂出水当待分析水样为含难降解物质的工业废水时取自待分析水排放口下游约的水或所含微生物适宜于待分析水并经实验室培养过的水盐溶液下述溶液至少可稳定一个月应贮存在玻璃瓶内置于暗处一旦发现有生物滋长迹象则应弃去不用磷酸盐缓冲溶液将磷酸二氢钾磷酸氢二钾七水磷酸氢二钠和氯化铵溶于约水中稀释至并混合均匀此缓冲溶液的应为七水硫酸镁溶液将的七水硫酸镁溶于水中稀释至并混合均匀氯化钙溶液将的无水氯化钙若用水合氯化钙要取相当的量溶于水稀释至并混合均匀六水氯化铁溶液将六水氯化铁溶解于水中稀释至并混
5、合均匀稀释水取每种盐溶液和各加入约水中然后稀释至并混合均匀将此溶液置于下恒温曝气以上采取各种措施使其不受污染特别是不被有机物质氧化或还原性物质或金属污染确保溶解氧浓度不低于此溶液的日生化需氧量不得超过此溶液应在内使用接种的稀释水根据需要和接种水的来源向每升稀释水中加接种水将已接种的稀释水在约下保存后尽早应用已接种的稀释水的天耗氧量应在每升之间盐酸溶液氢氧化钠溶液亚硫酸钠溶液此溶液不稳定需每天配制葡萄糖谷氨酸标准溶液将一些无水葡萄糖和一些谷氨酸在下干燥每种称量溶于蒸馏水中稀释至并混合均匀此溶液于临用前配制仪器使用的玻璃器皿要认真清洗不能吸有毒的或生物可降解的化合物并防止沾污建议采用压缩空气瓶或采
6、用空气不与任何润滑油接触的压缩机隔膜泵压缩机空气在用前应过滤和洗涤常用的实验室设备如下培养瓶细口瓶的容量在之间带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口最好是直肩的培养箱能控制在测定溶解氧仪器用于样品运输和贮藏的冷藏手段稀释容器带塞玻璃瓶刻度精确到毫升其容积大小取决于使用稀释样品的体积样品的贮存样品需充满并密封于瓶中置于保存到进行分析时一般应在采样后之内进行检验若需远距离转运在任何情况下贮存皆不得超过样品也可以深度冷冻贮存操作步骤样品预处理样品的中和如果样品的不在之间先做单独试验确定需要用的盐酸溶液或氢氧化钠溶液的体积再中和样品不管有无沉淀形成含游离氯或结合氯的样品加入所需体积的亚硫酸钠溶液使样品中
7、自由氯和结合氯失效注意避免加过量试验水样的准备将试验样品温度升至约然后在半充满的容器内摇动样品以便消除可能存在的过饱和氧将已知体积样品置于稀释容器中用稀释水或接种稀释水稀释轻轻地混合避免夹杂空气泡稀释倍数可参考下表测定时建议稀释的倍数预期值稀释比结果取整到适用的水样之间表中河水生物净化过的污水澄清过的污水或轻度污染的工业废水溶解氧的测定可采用碘量法原污水严重污染的工业废水若采用的稀释比大于将分两步或几步进行稀释若需要抑制硝化作用则加入或试剂若只需要测定有机物降解的耗氧必需抑制硝化微生物以避免氮的硝化过程为此目的在每升稀释样品中加入浓度为的烯丙基硫脲溶液或一定量的固定在氯化钠上的氯代三氯甲基吡啶
8、使在稀释样品中浓度大约为恰当的稀释比应使培养后剩余溶解氧至少有和消耗的溶解氧至少当难于确定恰当的稀释比时可先测定水样的总有机碳或重铬酸盐法化学需氧量根据或估计可能值再围绕预期的值做几种不同的稀释比最后从所得测定结果中选取合乎要求条件者空白试验用接种稀释水进行平行空白实验测定测定按采用的稀释比见用虹吸管充满两个培养瓶至稍溢出将所有附着在瓶壁上的空气泡赶掉盖上瓶盖小心避免夹空气泡将瓶子分为二组每组都含有一瓶选定稀释比的稀释水样和一瓶空白溶液见放一组瓶于培养箱中并在暗中放置天在计时起点时测量另一组瓶的稀释水样和空白溶液中的溶解氧浓度达到需要培养的天时间时测定放在培养箱中那组稀释水样和空白溶液的溶解氧
9、浓度验证试验为了检验接种稀释水接种水和分析人员的技术需进行验证试验将葡萄糖谷氨酸标准溶液用接种稀释水稀释至并且按照的步骤进行测定得到的应在之间否则应检查接种水如果必要还应检查分析人员的技术本试验同试验样品同时进行结果的表示被测定溶液若满足以下条件则能获得可靠的测定结果培养天后剩余消耗若不能满足以上条件一般应舍掉该组结果五日生化需氧量以每升消耗氧的毫克数表示由下式算出式中在初始计时时一种试验水样的溶解氧浓度培养天时同一种水样的溶解氧浓度在初始计时时空白溶液的溶解氧浓度培养天时空白溶液的溶解氧浓度制备该试验水样用去的样品体积该试验水样的总体积若有几种稀释比所得数据皆符合所要求的条件则几种稀释比所得结果皆有效以其平均值表示检测结果试验报告试验报告包括下列内容参考了本国家标准取样的日期和时间样品的贮存方法开始测定的日期和时间所用接种水的类型如果需要指出已抑制氮的硝化作用的细节结果及所用计算方法测定期间可能观察到的特殊细节本国家标准中没有规定的或考虑可任选的操作细节附加说明本标准由国家环境保护局规划标准处提出本标准由北京市建筑工程学院负责起草本标准主要起草人李献文本标准由中国环境监测总站负责解释
