1、ICS 11.220 B 50 l&1: 中华人民共和国水产行业标准SC/T 1106-2010 渔用药物代谢动力学和残留试验技术规范Test technical specification of pharmacokinetics and re哩iduesfor fishery drugs 2010-05-20发布2010-09-01实施中华人民共和国农业部发布前言本标准附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出。本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所。本标准主要起草人:李健、王群、刘滨、陈萍。SC/T 110
2、6-2010 I SC/T 1106-2010 渔用药物代谢动力学和残留试验技术规范1 范围本标准规定了渔用药物代谢动力学和残留试验的实验设计的基本要求、样品分析方法的选择、确证技术要求、药物代谢动力学曲线的拟合、模型的确定及参数估算等。本标准适用于渔用药物在鱼虾体内的代谢动力学和残留试验，其他水产动物的药物代谢动力学和残留试验可参考使用。2 试验设计的基本要求2. 1 实验渔用药物应给出渔用药物通用名称、含量、剂型、生产厂家、批号及保存条件、配制方法等。实验所用的渔用药物应与药效学和毒理学研究使用的药物相一致。2.2 实验动物2.2. 1 基本要求应给出实验动物中文名称、拉丁文名称和数量、规
3、格(体重、体长)、来源等;个体大小应根据试验目的确定，如试验目的是制定休药期，则应采用接近上市规格的动物进行试验。同时，实验动物要注明健康状况。2.2.2 数量每个采样时间点的平行样不少于8尾，已有性别分化的动物雌雄比例应为1: 1。2.2.3 饲养管理采用接近自然或养殖环境，水温应保持基本稳定，饲料、养殖环境(包括水温、盐度、溶氧、无机氮、水体大小等)等应满足实验动物正常生理需要。2.3 给药剂量渔用药物代谢动力学研究所采用的剂量为药效学研究中所用的有效剂量，也可设置高、中、低三个剂量组，高剂量接近最小中毒剂量，中剂量相当于有效剂量，低剂量为中剂量的1/202.4 给药途径可采用口灌、温饲、
4、药浴、肌肉注射及静脉注射等方式，给药前应停食12h以上。2.5 给药次数可采用单次给药或多次给药的形式，多次给药要满足个治疗周期。2. 6 采样2.6. 1 采样时间点的确定采样时间点的设计应包括药物的吸收相、平衡相(峰浓度附近)和消除相。-般在吸收相至少需要2个3个采样点，对于吸收快的血管外给药的药物，应避免第一个点为峰浓度CCmax);在Cmax附近至少需要3个采样点;消除相需要4个6个采样点，整个采样时间至少应持续到3个5个半衰期，或持续到血药峰浓度Cmax的1/l01/20;药物残留研究的采样时间点至少包括10个，整个采样时间至少持续到8个10个半衰期，或持续到最高残留限量MRL以下。
5、2.6.2 采样组织的确定药物代谢动力学和残留研究的采样组织包括血液、肌肉、肝脏、肾脏、皮肤和鲸等;肌肉组织可采肌肉和皮肤的自然比例。2.6.3 采样方法SC/T 1106-2010 采集血液样本时，鱼血可采取断尾取血或尾静脉抽血的方法;虾血可采取心脏和血窦抽血的方法。鱼肉可取背部肌肉，虾肉可取第一至第七腹节肌肉。所有采样个体要保持取样部位的一致性，肌肉注射给药要避开注射部位取样。鱼虾个体较小时，肝脏、肾脏及鲤、可采全部组织。2.64 样晶保存条件所取的组织样品封装后冷冻保存，血液样品保存前应制备成血清或血浆，保存温度一20C以下，存放时间6个月以内。3 样品分析方法的选择生物样品的药物分析方
6、法包括色谱法、放射性核素标记法、免疫学和微生物学方法，应根据实验动物的性质，选择特异性好、灵敏度高的测定方法。优先选用国家标准和行业标准规定的方法。分析方法必须具有足够的灵敏度、特异性、精确性和可靠性，并对方法进行确证，以确保生物样品测定结果的准确性和可靠性。对于前体药物或有活性(药效学或毒理学活性)代谢产物的药物，建立方法时应考虑采用能同时测定原型药和代谢物的方法。药物分析方法参考标准参考附录A，4 样品分析方法确证技术要求4. 1 特异性对于色谱法，至少要考察6个不同个体来源的空白生物样品色谱图、空白生物样品外加对照物质色谱图(注明浓度)及用药后的生物样品色谱图，反映分析方法的特异性。对于
7、质谱法，则应着重考察分析过程中的介质效应。4.2 标准曲线和定量范围根据所测定物质的浓度与响应的相关性，用回归分析方法获得标准曲线，提供标准曲线的线性方程和相关系数。标准曲线高低浓度范围为定量范围，必须用至少6个浓度建立标准曲线，应使用与待测样品相同的生物介质制备标准曲线，定量范围要能覆盖全部待测样品浓度。建立标准曲线时，应随行空白生物样品，但计算时不包括该点。4.3 精密度与准确度一般要求选择3个5个浓度样品同时进行方法的精密度和准确度考察。低浓度选择在定量限附近，其浓度在定量限的3倍以内;高浓度接近于标准曲线的上限;中间选一个浓度。每一浓度每批至少测定5个样品，为获得批间精密度应至少连续测
8、定3个分析批。精密度用质控样品的批内和批间相对标准差(RSD)表示，RSD一般应小于15%，在最低检测限附近RSD应小于20%。准确度一般应在85%115%范围内，在最低检测限附近应在80%120%范围内。4. 4最低检测限一般要求残留分析方法的最低检测限(LOD)满足:MRLO.5 mg/kg时，最低检测限为0.1mg/kg;当L饭L在O.5 mg/ kgO. 05 mg/ kg时，最低检测限为O.1 mg/ kgO. 02 mg/ kg;当5但LO.05 mg/ kg时，最低检测限为0.5MRL。4.5 回收率一般要求考查高、中、低3个浓度的提取回收率，其结果可重现。4.6 方法学质控对于
9、未知浓度样品的测定应在生物样品分析方法确证完成以后开始。每个未知浓度样品一般测定一次，必要时可进行复测。每个分析批生物样品测定时应建立新的标准曲线，并随行测定高、中、低三个浓度的质控样品。质控样品测定结果的偏差一般小于20%，每个浓度质控样品至少双样本，并应均匀分布在未知样品测试顺序中。当一个分析批中未知浓度样品数目较多时，应增加各浓度质控样品数，使质控样品数大于未知浓度样品总数的5%，质控样品测定的偏差一般应小于15%，低浓度点偏差一般应2 SC/T 1106-2010 小于20%，最多允许1/3不在同浓度的质控样品结果超限。如质控样品测定结果不符合上述要求，则该分析批样品测试结果作废。浓度
10、高于定量上限的样品，应采用相应的空白介质稀释后重新测定。整个分析过程应当遵从预先制定的试验室标准操作程序以及良好实验室操作原则。4. 7 微生物学和免疫学分析方法确证技术要求上述分析方法确证的很多指标和原则也适用于微生物学或免疫学分析，但在方法确证中应考虑到它们的些特殊之处。微生物学或免疫学分析的标准曲线本质上是非线性的，所以应采用比化学分析更多的浓度点来建立标准曲线。5 药物代谢动力学曲线的拟合、模型的确定及参数估算5. 1 药时曲线的拟合及模型确定根据药物性质和动物特点选择合适的数据处理软件，可采用WinNonlin、Kinetca、3p87C3p97)、PKBPN1，BAPP、MCPKP
11、、DNS等;注明软件名称、版本和来源。根据不同时间点所对应的血液等组织样品药物浓度，作药时曲线图，采用最小二乘法拟合出药物代谢动力学方程，根据血药浓度与时间的函数关系确定所属的模型。5.2 药物代谢动力学参数的估算根据试验中测得的受试动物的血药浓度一时间数据，求得受试药物的主要代谢动力学参数。对于静脉注射给药的药物，应提供消除半衰期t川、表观分布容积Vd、血药浓度时间曲线下面积AUC、清除率CL等参数值;对于血管外给药的药物，除提供上述参数外，还应提供峰浓度Cmax、达峰时间Tmax等参数值。3 SC/T 1106-2010 附录A(资料性附录)药物分析方法参考标准药物药物分析方法标准孔雀石绿
12、与结晶紫GB/T 20361 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定向效液相色谱荧光检测法农业部783号公告1-2006水产品中硝基映喃类代谢物残留量的测定液相色谱硝基吱喃类代谢物串联质谱法农业部1077号公告一2-28水产品中硝基映喃类代谢物残留量的测定高效液相色谱法诺氟沙星、盐酸环丙沙星、恩l诺沙农业部783号公告2- 2006 水产品中诺氟沙尾、盐酸环丙沙星、恩诺沙星残留量的测星定液相色谱法敌百虫农业部783号公告3- 2006 水产品中敌百虫残留量的祖定气相色谱法雌醇农业部958号公告10-2007水产品中雌二醇残留量的测定气相色谱质谱法毗哇酣农业部958号公告11-2007 水产品中毗
13、哇酿残留量的测定液相色谱法农业部958号公告12-27水产品中璜胶类药物残留量的测定液相色谱法磺胶类、哇诺酣药物农业部1077号公告1-2008 水产品中17种磺胶类及15种唾诺酣类药物残留量的视定液相色谱串联质谱法农业部958号公告13-2007水产品中氯霉素、甲枫霉素、氟甲枫霉素残留量的测定氯霉素、甲陨霉素、氟甲硕霉素气相色谱法农业部958号公告14- 2007 水产品中氯毒素、甲矶霉素、氟甲枫霉素残留量的测定气相色谱质谱法链霉素农业部1077号公告3- 2008 水产品中链霉素残留量的测定品效液相色谱法哇烯囡农业部1077号公告-4 -28水产品中哇烯酬残留量的测定高效液相色谱法哇乙醇代i耻物农业部1077号公占5- 2008 水产品中喳乙醇代谢物残留量的测定高效液相色谱法U哇酸SC/T 3028水产品中略瞠酸残留量的测定液相色谱法甲基辜酣SC/T 3029水产品中甲基辜酣残留量的测定液柏色谱法五氯苯酣及其纳盐叹:;T3030水产品中五氯苯盼及其纳盐残留量的泪定气相色谱法J 硫丹SC/T 3039水产品中硫丹残留量的测定气相色谱法三氯杀蜻醇SC/T 3040水产品中三氯杀蹒醇残留量的测定气相色谱法4
