1、中华人民共和国国家标准粪便无害化卫生标准Sanitary standard for the non-hazardous treatment of night soil UDC 628.44/ .49 GB 7959 87 为f!J:彻“fri!防为！”的J_ljcJ作为针，切实搞好粪便ll管理和无害化处理，加强除害病的技术指导，仪羔城乡五千、境lI：由貌，保障人民身体健康，特制定本标准。牛i丰F叶i适用I气与国城乡土11坡、粪便4；害化处用效果的l生评价和为建设垃圾、粪便处理构筑物提供L11.l先讨参数。1 定义1 . 1 粪便是指人体Ji扎进物。1 . 2 堆肥是指以t坡、粪便为原料的好氧哇
2、！均温堆肥（包抬不加粪便的纯垃圾堆肥和农村的粪便、柏丰！堆肥）。1 . 3 沼气也；静是Jfj以粪便为原料，在密件、厌氧条件下的厌氧性消化（包括常温、tjl温和lr日oJillli消化）。2 标准值约A；二号化处用后的堆肥和粪便应符合表1、表2的卫生标准。表11与温堆肥的卫生标准!l;i J I血11 各1、准堆肥温度最高堆温达5055c以L捋约57大2 制且i卵纯1 .丰95 100% Ji;大肠菌的I 0 I IO 在蝇J放地控制毡蝇草叶，堆堆剧！制没Jr占的川、制Ji;新；J化的成蝇中华人民共和国卫生部198706 08批准1988 04-01实施,; H GB 7959-87 表2沼气
3、发酵的II:初、准组f Jw I I t卜叫l样，11r: r产期30天以2 ,:; i/Jdi气发脾温度53士2措！j；、2:k:i 衍，虫。1iiic降和95 以4 1111瞅1卵和弘J虫卵在使）jj粪液I 1又得粉IB川的国l吸虫卵t11r虫卵 先；肠闹的常温州气发酵l() ,: :j温di气发醉l0 10 6 蚁j、苍蝇有效地控制蚁蝇草叶，粪掖q,JC-f i二，池的Iii IN1,f;的姐、如l或ffli牛i化的1点蝇7 iii气地盖价言旨纯1；害化处Ill后方口I用件农月巴扎）也）Illj工格化荒地和密闷贮存j去处fl!Jl;便放呆的I 11. J + 11 1 + 11 I +
4、I 0 5 + + 6 + + 5. :i + + 4 6 + 4 l + + + :L 6 + + + 1 . 1 十+ I II 卡+ + 0.6 + + II. 4 + + + 。l+ + + 0.11.1 + + + + 0.04 表A23毛大Jl&前群前1在i，.数表f和I: , I , 乓（mL)阐f1 i 0 I 0.01 11.001 I 11 + I I I + I I I + I. 0古+ + 。.56 + + () 53 + + 0 16 + 0.-13 + + + 0 36 + + 0 . 11 . + 0.111 + + + 。.06 + + 。.04 令+ + 。.
5、0 I + + + 0.001 L + + + 0.(1111 GB 7 95 9 8 7 表A3粪大肠陶群菌值ti数表；在种址，在（mLJ 前f自0. I 0 01 0.001 0 0001 0. l l l + 0. l l l + 。ll l + 0. I 05 + + 0 056 + + 0. 053 + + 0. 046 + 0 043 + + + 0.036 + + 0.011 + + 。.010 + + + 0.006 + + 0 004 + + + 0 001 + + + 0 0004 + + + + 0.0004 表A4粪大肠菌群菌值计数表i种ltl:,g (mLJ 商值。l
6、0 001 0.0001 0. 00001 0.0111 + 0.0111 + O.Olll + 0 0105 + + 0.0056 + + 0.0053 + + 0.0046 + 0.0043 + + + 0.0036 + + 0.0011 + + 0.0010 + + + 0.0006 + 4护0.0004 + + + 0.0001 + + + 。.00004 + + ,+ + 。.000472 GB 7959 87 表A5粪大炀商群菌值计数表接种匾，g(mL) 菌值。.001 0.0001 0 00001 0.000001 0.00111 + 0.00111 4 0 00111 + 0.
7、00105 + + o. 00056 + + 0.00053 + + 0. 0川46+ 0.00043 + + + 0.00036 + + 0.00011 + + 0.00010 + + + o. 00006 + + 0.00004 4卡+ + 0.00001 + 4护+ 0.000004 + + + + 0.000111 + 0.000111 + 0.000111 + 0.000105 + + 0.000056 + + 0.000053 + + 0.000046 + 0.000043 + + + 0.000036 + + 0.000011 + + 0.000010 4卡+ + 0.00000
8、6 + + 0.000004 + + + 0.000001 + + + 0.0000004 + + + + ,o. 0000004 73 GB 7 95 9 8 7 ft;大肠l梢群怆导；.）f 1 I ;-: 样品| 乳储量”句营养基44 5，. 2 h 不产气产气| 品红亚硫艘饷平皿报告37，IB24 h 革兰民!I!色乳幡盘”管444 5，24 2 h 革兰氏阳性擎兰民阴性产气不产气龚大局菌掌阴性无停抱住量大届菌酵阳性报告报告样.1占稀料和拔种斗、意附I mL I mL 9 mL 9 mL I I I 水水水mL mL mL I : I 0 I 100 I 1000 1JO 000 样品
9、JOg 灭蕾水JOOmL？能黠羹大局筒醉阴性捆依次要推樨得I mL 告B .1 样品处理GB 7959-87 附录B堆肥蝠虫卵检查法（补充件从现场采回的许多堆肥样品，其中粪便和垃圾量的配比，各有不同，夏季因瓜果皮核烂菜等较多，有机物含量大，湿度也较高，冬季含妒灰渣等较多，无机物含量高，湿度较低，有的已经腐烂，颜色较黑，布的尚未发酵，质地较粗，无论如何，样品到达实验室后，都须先!Ju处理。其步骤为28 .1 . 1 各层样品经混匀后，分别倒f摘瓷盘内，用饭f挑去冥中的夹杂物如炉渣、碎砖块、废制、烂铁和布条等。8 .1 .2 经搅匀后，称出500g，作为供检验用的样品。8.1 .3 为能查到j具有
10、代表性的堆肥姻虫卵样品，应将此500g样品巾较大的土颗粒予以压碎，用于L径2mm的铜筛过筛，收集下面筛出的较细样品，不少于lOOg，为避免因湿度大，筛出物少，不410饨，可颇先将孔役3mm的铜筛叠在2mm的上面，用力振蝠，这样，必要时可取留在孔径2mm筛k样品的一部分，凑成IOOg,沌s有时从现场采得的堆肥样品，多国未腐烂的蔬菜帮f、瓜果皮核和草梗尊，难以筛ll:t和状物。在此悄况卡，uj把.Ji二：l的i!tl7均匀样品，用剪f稍警剪小后，请；）（il泡，纳将洗被静置沉淀，而后收集沉淀物f持枪。8 .1 .4 将经过处f唱的样品装f适当大小的广口瓶巾，贴k标辛辛。ll，纯迹视台均匀而且旬ff
11、t.性的作多份堆肥样品，如一时未能怎i用i检验亢毕，则需滴hu些防腐例如3，台oi尔J吉林榕液，戎3盐酸榕枝，加，）；后，放置冰箱中，H的在1防11：原1!04J物和市菌的繁馅，影响观察，响l避免圳的刷虫卵i丘4步发育，难以了解采样当时的发育情况。B.2 堆肥样品显微镜检查中（挂验堆肥刷虫卵的！京J，是先用碱性溶液和已经处理过的堆肥样品充分混合，分离蚓虫卵，继用比重较刷虫卵比重大的溶液为漂浮液，使姻虫卵漂浮在溶液的表面，从而收集中也验之，或加入清水，因刷：.Ii.卵的比重大于水的比重，使制虫卵j正在水底，从中吸取酬虫卵检验之。B .2 .1 漂浮法z所用的为饱和硝酸纳溶液离心漂浮法，操作步骤类
12、似土壤刷出卵检进法zB.2.1.1 分离2称取510再经过处理的堆肥样品寸容；J50mL清沾铜离心径：或骂塑料离心管ljI。注入5u . ，氢氧化纳溶液2530ml,!rJIJll玻璃珠约10靴，剧适当大小的橡皮塞f紧塞ft（口，黄电动振荡相Ll:，振荡1015min，每分钟200300次，静li.153-0min后，再振荡，如此重复34次，使堆肥样品为碱性溶液所M透，Jll上玻璃珠的撞击和摩擦，!J!lj挂t液中的刷虫卵，不再被粘着在起。B.2.1.2 漂il：从振荡机上取F离心伐，揭去橡皮革f，剧j商怡收取t高水，将附着在皮塞i二和信口内暗的M状物，州人仅rjI，以免小部分.ll卵的漏检。
13、而后再征离心机上离心35min，每分钟2例。2500转。倒去多余的氢氧化纳溶液，水洗次，即加清；J将iJi:iJ正物搅J斗后，离心，倒去t面的航水。随后加入少过饱和硝酸饷溶液（比重1.381.40），剧玻璃棒搅成糊状后，徐徐iiiIJU饱和硝酸纳溶液，随IJII随慌，iIJll到离）iu约lcm为止，此时将附在破除t的iM合液也用一两滴饱和硝酸纳熔液，I人衍II ，离心35min，每分钟200025川转，由于刷.ll卵的比重小1饱和硝酸纳i容浓的比重，l对此纶离心后，j(1j1的则.ll卵，就会漂J罩在硝酸纳溶液的表面。 B . 2.1 .3 移i立液膜：fjj(f圭略小j!cm的金属丝阎（状
14、如细菌，、yt:?Jr刑的放种坏不断将必！二被膜移j盛手fj.材、iii水的小烧料、巾，约30次后，而次倒拌和尚心，适当增川l些i包租的回去纳浴仪，如此反复照作34次，1（剑液膜注：J, .牛；向！，！，虫卵沟iI：。75 GB 7章噩噩干事78.2.1.4 抽滤g将烧杯中含卵混悬液，通过高尔特曼氏漏斗，抽滤于直径35mm，无裂纹和孔眠的微孔火棉胶滤膜t（孔径。.65 O. 80m），混合悬液中的刷虫卵，全部阻留在微孔滤膜上。有时由于样品中蚓虫卵数量主过多，浑浊度大，不易为一张滤膜所掠过时，则可另添一或二张滤膜。B.2.1.5 镜梭z抽滤完毕，立即用跟科弯头小镇子，将滤膜从漏斗的滤台上小心取下
15、，平铺于47.5c血的大型裁物玻瑰片上，趁湿tEfl民倍显微摄下直接检袭，最好滴加两三滴50%台主主溶液，这样，躯虫卵在比较透阴雨无气泡的模野中，傻子观察和计数。8.2.2 沉淀讼，1K洗离心沉淀法，操作步骤如下28.2.2.1 水洗s称取lOOg经过处臻的堆肥样品或一定量经过剪小的蔬菜帮子等有机堆肥的浸出沉淀物，放在500mL三角烧瓶中，加入5%氢氧化纳溶液100叫150mL和三、四十校玻璃珠，塞以橡皮塞。浸泡半小时后，振摇34min，将上面的液体，倒入大烧杯中，再加等量满1.k子三角烧瓶中，浸洗三、四次，察到浅出液透明为止。8.2.2.2 过滤并水洗沉淀2将言tra收集的法液，用12是主纱
16、布过滤于lOOOmL锥彩量杯中，静琶半小时至一小时后，但i去上层液体，如此，约半小时换水一次，直至上层水澄清为止。8.2.2.3 测定体积g用虹吸管慢慢吸去沉淀上面的液体，将沉淀物倒入刻度最筒中，测量沉淀物的容积。B .2 .2 .4 镜枪s将沉淀物搅浑，愤匀，迅速用1mL玻璃吸管吸取0.05和O.tmL子载玻片，盖以盖玻片（依盖玻片的大小，分别对2或3、4片不等在低俗镜下检查并计数。B.3 堆昌E虫昆虫害F数量测定法堆H程中含有的剿虫卵数，往往较多，用饱和硝酸锅溶液离心漂浮法时，51E样品中的翻虫卵，高度集中在滤膜上，在显微镜下计数时容易混乱，因此，最好能在显微镜的自镜筒内，装上一枚吕镜计数
17、网，利用移动尺有规律的移动，逐渐数完整个滤膜上的余部姻虫卵数。例如500自有代表性的原始堆肥样品，经挑去夹杂物并过筛后，得184g，其中的tog用饱和硝酸纳溶液离心漂浮后，在滤膜上数得知虫卵数为350个，则Xl84口6440个。实际上，峭的含有数，亦!i!Pft* soog翩翩所含有的岖虫卵数。在用水洗沉淀法时，需要准确测定沉淀物的容积，在F哥玻璃吸管吸取沉淀以供镜检肘，必须撞拌均匀而后取样，而且需要连续观察若干次，而后取其乎均数，从而计算tmL沉淀物的虫卵数，最后乘以沉淀总容积数，便是lOOg原始堆肥样品的虫卵数。8.4 堆肥蝠虫卵生活力测定法吕言吉测定虫在ijJ蓝蓝虫卵生活力所用的方法，除
18、了采用德单易行的室接被检法外，辈辈革虽采用培养法，而染色法则因操作较为复杂，不如直接镜拎法简便，效果不郊培养法的可靠，因为来苦苦法采用。B .4 .1 点接镜检法z是根据腼虫卵在发育过程中所出现的各种形态，以鉴别奖Jet击。苔先是鉴别受精卵和未受精卵，莫次是鉴别有产业i活力和失去哇活力（变性卵）的受精卵和含有幼虫卵的形态。采用直接镜枪法时，有关形态鉴别黎点如下2B.4.1.1 未受精烟虫卵的形态z多为长椭圆形，有时量：盖在形或不规则形，大小半均为80984060m，一般为黄褐色，有时蛋白质尧发育不全，有时完全失去蛋白质壳，卵内经常充满大大小小浊吉普状的卵羹细胞。B.4.1.2 受精蜘虫卵的形态
19、z活的受精制虫卵的形态E蛋白照究为黄褐色，脱去蛋白质壳的为无色透碗，在乎均大小为5070x 40 50m I外g卵壳厚，内层壳薄，有屈光性，最外层的蛋白质壳也很厚，呈乳然或花纹状突起，内有一个球形的卵细胞，卵壳两端和卵细胞之间，有半月形的隙，卵内的卵黄颗粒清晰而致密。死受精剿虫（变性卵）的形态：76 GB 7959-87 卵细胞移向一端，致使卵壳两端呈现有大小不等的半月形空隙。卵内脂肪变性，形成空泡，很像未受精卵，高温堆肥样品中卵内的空泡尤为显著。卵细胞颗粒减少或消失。卵细胞质浑浊，呈黑色或棕黑色。卵细胞向不定部位呈球状收缩。卵壳的一侧或两侧，一端或两端向内凹陷或破裂。只有蛋白质壳，而缺内容物
20、。B.4.1.3 含有活幼虫卵的形态z虫体的前后部没有颗粒，中部颗粒清晰而有金属光泽，有立体感，镜俭时，注视或轻压，可见有径微蠕动，强压后，有时可挤出幼虫。B.4.1.4 含有死幼虫卵的形态s幼虫体内几乎充满颗粒，且模糊不清，无金属光泽，缺乏立体感，镜检时注视之，久久不见蠕动，稍稍加热或轻压，不会蠕动，强压时，虽能挤出幼虫，但也不改变其原来的卷曲状态。以上所列是死活剿虫卵的一般形态，在镜检中有时会遇到外形发生变化的畸形活卵和各种形态的未受精卵，以及容易误认为寄生虫卵的异物。B .4 .2 滤膜培养法z把上述通过饱和硝酸纳溶液离心漂浮后收集在滤膜上的姻虫卵，经过计数后，直接用来培养，称为滤膜培养
21、法。滤膜培养法测定姻虫卵生活力的操作步骤如下gB.4.2.1 在直径1012cm的玻璃平皿的底部乎铺一层厚约lcm的脱脂棉（或微孔塑料），脱脂棉上铺一张直径与乎皿等大的普通滤纸。B.4.2.2 为防止霉菌和原生动物的繁殖，可加入23%甲醒溶液或甲醒生理盐水，以湿透滤纸和脱脂棉。8.4.2.3 把含卵滤膜平铺在皿中滤纸上，加盖，并在皿盖上编号。一个乎皿可同时放上几张滤膜，互不接触。8 .4 .2 .4 把乎皿放在2426的恒温箱中培养一个月，培养过程中经常滴加滴水戎2- 3 的甲酶溶液，使滤膜保持潮湿状态。注2堆肥样品中的嗣虫卵，因受温度的影响，死卵的形态变化比较显著，往往培养不到一个月，p能明
22、确判定为死卵，无需继续培养。8.4.2.5 培养一个月后自皿中取出滤膜置于载玻片上，滴加50%甘油溶液，使其透明后，在低倍镜下查找翩虫卵，然后在高倍镜下，根据形态，鉴定卵的死活，并加以计数。镜检时有时会感到视野的亮度和滤膜的透明度不够理想，则可在一张载物片上，滴一滴清水，另用一张盖玻片从滤膜上刮下少许含卵滤渣，与水混合搅匀，盖上同一盖玻片进行镜检，或是在载玻片上滴l2小滴30%安替福尼被代替清水，烟虫卵外面的蛋白质壳很快被溶解掉，内部构造便于观察。凡含有幼虫的，都认为是指卵，其他阶段的或单细胞的，都判为是死卵。77 c .1 样品处理GB 7959-87 附录C粪稀蝠虫卵检查法（补充件）自密闭
23、化粪池或沼气发酵池等不同类型的粪池中采集的粪稀样品，因为是分别采自迸出料口以及上下不同的层次，所以样品有稀有稠，稀者状如水样，稠者形若污泥和新鲜粪便。样品送到实验室后，不论稀稠，均应尽快倒于适当大小的玻璃容器内，加以搅拌均匀，而且在搅拌的同时，用银子挑去浮在上面的或混在其中肉眼所能看到的夹杂物。C.2 粪稀样品显微镜检查粪稀样品经过如t的处理后，进一步进行蚓虫卵的检验工作，包括定量检验剿虫卵的数量测定和定性检验（蚓虫卵牛活力的测定）。c .2 .1 粪稀嗣虫卵数量测定法市i气池等进料口的样品，因为稠度较大，适于采用稀释法。丽出料口的样品，由于较稀，则以采用浓缩法为佳。C.2.1.1 稀释法g采
24、用的有两种方法，即滤膜法和司徒氏法。c.2.1.1.1 滤膜抽滤稀释计数法操作步骤如下gc.2.1.1.1.1 取混匀的进料口粪稀lOOmL，加水稀释至300soomL。c.2.1.1.1.2 用60孔的金属筛子过滤于soomL锥形量杯中，静置30mino c .2 .1 .1 . 1 .3 倒去沉淀上部的液体，将沉渣移入50mL离心管中，离心3min，每分钟2000转C.2.1.1.1.4 倒去k清液，JU人20mL5 /o氢氧化纳溶液或30/o安替幅尼溶液。C.2.1.1.1.5 4jj隔lOmin用玻璃棒搅拌均匀，以促进姻虫卵和杂质的分离。C.2.1.1.1.6 1 h后，加水近满，经搅
25、拌后，离心3min后，弃去上部碱性溶液。C.2.1.1.1.7 加入饱和硝酸纳溶液戎饱和食盐水，搅拌后，离心35min，每分钟20002500转。c.2.1.1.1.a 用玻璃吸管吸取漂浮液，放置于盛有清水的小烧杯中。C.2.1.1.1.9 将此含卵混悬液抽滤于1张滤膜上（滤膜规格同堆肥嗣虫卵检查法）。c.2.1.1.1.10 在显微镜下计算全滤膜上的蚓虫卵数，该数即代表原lOOmL进料口粪稀中的翩虫卵数。c.2.1.1.2 4徙Stoll）氏虫卵稀释计数法z其原理系将定量重量或容积均可）的稠粪样品，柿释为；4：过的稀释液，经混合均匀后，从中再吸出一定量的稀释液，在显微镜下，计数其中含有的阳虫
26、卵。然后按稀释的倍数，计算出该稀释液巾的卵数，最后换算成单位重量或容积原样品中含有的刺虫卵数。具体操作为zc.2.1.1.2.1 用一支IOOmL硬质玻璃试管，在容水45mL处作一标志或刻度。c.2.1.1.2.2 称取3g搅匀的粪稀样品，装入试仔巾，注入lI 10当量的氢氧化纳溶液歪45mL标志或刻反处，另加卜数和玻璃珠。C.2.1.1.2.3 用橡皮塞f紧塞iu后，饭力振摇，使成均匀的混合液为止。如样品中含布粪块，最忏放tU夜，使有一足够的消化时间。C.2.1.1.2.4 展在计数前再把它撼匀。摇后边用ImL刻！主吸管，吸取混合液。.15mL于大型载物JI 37 75mm) ：，盖以221
27、0mm的革玻片（如缺大裁物片，则将吸出的o.15mL混合被分滴于23张4般大小的载物片t，盖以IO18mm的益成片亦口J）。78 GB 7章59-87C.2.l.1.2.5 然后在低倍显微镜下数充O.!SmL I屁悬液中所有的蚓虫卵数，将所数千导的卵数乘以100，即为每克粪稀中所含有的姻虫卵数。如样品稍稀，不用玻璃试管，改用lOOmL三角烧瓶亦可，在辛辛积60mL处，刻一刻度，取混匀的粪稀样品4mL于此刻废：烧瓶中，注入l/ 1。当量的氢氧化纳溶液，至60mL刻度处，再放入十tv:玻璃漾，F吉橡皮塞紧塞瓶口，极力辑是摇，直至混合液皇均匀状态为止。然后吸取队15mL混合液于载玻片豆，盖以盖玻片，
28、并在低倍镜下进行强虫卵tt数，将所得的卵数盖在100，在ll是每毫升粪稀It烧含有的辈革虫卵数。c.2.1.2 浓缩法$由于姻虫卵的比重大f水的比重，在水中等易下沉。泊气池出料口粪稀含水多，粪便较少（水与粪便之比，约为20:I ），因此，含翩虫卵量相应也少，上层粪稀含卵敢当更少。枪手些时，可采用自然沉淀法和滤膜抽滤法两种方法。分别如下z.2.l .2.l 自然沉淀法gc.2.1.2.1.1 lli!l:li料口主层粪草草30004告。OmL，下层粪穗l创2份由自L，分别Jft6告自锅掠过婆子I-2个2000mL雏形溢杯中，it其自然沉淀。c.2.1.2.1.2 祭1h后，倒去沉撞上层的液体，另
29、换清水，搅浑后，静置，让其自然沉淀。c .2 .1 .2. 1 .3 反复；j(洗沉淀，至沉溺k丽的水接近无色和澄清后，弃去上清液。c.2.1.2.1.4 将沉渣倒入lOOmL量筒中，测量沉渣的容积。C.2.l .2.l .5 经充分搅拌后，用1mL玻璃吸营，迅速吸取沉溺O.lmL于载玻片上，盖以盖玻片。C.2.l.2.l.6 1低能显微镜下，作盖章E峭壁计数参C.2.1.2.l.7 反复检查几次后，取英、F均数，从而推算原lOOmL粪稀所含有的蓝蓝.$.数。c.2.1.2.2 滤膜拙滤法：.c.2.1.2.2.1 将创料口不同层次采得的撞粪稀样品，用60日制筛过滤。C.2.1.2.2.2 除
30、比较混浊需要反复水洗问淀外，可直接抽滤于滤膜上。C.2.1.2.2.3 将滤膜平铺在大型载玻片上，加透明剂后，在.!Ji!.微镜下，作剿虫卵计数，从丽计算出每100血L粪稀中翩SJ.含有数ac.2.2 粪稀量进茧i卵哼oi主力援lj）立法c .2 .2 .1 滤膜楼养法：将上面进行戴虫卵i十数所用过的掠膜，放在培养应中，于2426( F培养一个月，然后从滤自费k刮下沉渣，镜检100200个蚓虫卵，其中发育到幼虫期者，认为是活卵，足他各期均视之为死卵。c.2.2.2清水培养法操作如F:C .2 .2 .2. I 将通过水洗沉淀所得的含卵沉渣，倒入lOmL离心锐内。c.2.2.2.2 离心3min
31、 ，每分镑2000转。C.2.2.2.喜倒去仨滔液，注入饱和食盐水，搅拌后，离心重要浮3m烛，转速F曰：疏。C,2.2.2.4 用毛细收管吸取被面漂浮物f另一离心管内，）Jlli瓷水，经搅拌后，以如上的传述，离心l2min。.C.2.2.2.5 吸去tii肖波，再加清水24mL馆1平管底的沉淀，JJus 01o恼力；1古林溶液12滴。C.2.2.2.6 F军2426c温箱中培养一个月，在培养过归中每日换水。c.2.2.2.1 培养完毕，用玻璃吸管吸取低淀物，做成涂片，在显微镜下观察并计放l00200个强45且卵，将发窍为幼虫草吕灼，认为是11：常的；f;苦，菜地形态者，都认为是不发fl雪J或死
32、卵。79 GB 795 87 附录D粪稀钩虫卵检查法（补充件在粪稀中检查钩虫卵，可以直接从粪稀样品中检查虫卵，或通过培养，间接检获钩虫幼虫。其步骤可分为gD.1 样品处理s参照粪稀蜘虫卵检查法。D.2粪稀样品显微镜检查z步骤大致同粪稀姻虫卵检查法。稠的样品用稀释法，稀的用浓缩法。D.2 .1 钩虫虫卵的检查D.2.1.1 稀释法z除可采用滤膜法和司徒氏法参见粪稀刷虫卵检查法外，也可采用水洗沉淀法。是因为钩虫卵的比重（1.06）大于水的比重，在水中会逐渐下沉。操作如下gD.2.1.1.1 依粪稀样品稀稠度的不同，称取样品35g，放在烧杯中，先加少量清水，充分搅拌均匀，然后陆续加水，使成混悬液。0
33、.2.1.1.2 用12层纱布过滤于500mL锥形量杯中，加水到近杯口。D.2.1.1.3 经lh后，倒去上液，另换清水，搅浑后，静置之，使其自然沉淀。D.2.1.1.4 半小时后，再奔去上清液，反复进行到上面的水接近无色和澄清。D.2.1.1.5 弃去上清液，将沉渣倒入量筒中，测定沉渣的容积。D.2.1.1.6 充分搅拌后，迅速用1mL玻璃吸管吸取沉渣O.lmL，放在载玻片上，加盖玻片（必要时可分成2片。D.2.1.1.7 在低倍镜下检查，并作虫卵计数。0.2.1.1.8 反复检查10片后，算出每O.lmL沉渣中虫卵平均数。最后再计算单位容积粪稀中的钩虫卵数。0.2.1.2 浓缩法z亦可采用
34、自然沉淀法和店、膜抽滤法。详见粪稀翩虫卵检查法。D.2 .2 钩虫幼虫的检查D.2.2.1小试管培养泣，操作如下2D.2.2.1.1 用剪刀把滤纸裁成9l.5cm、边缘光滑的长纸条。D.2.2.1.2 于10lcm的小试管中加入清水12mL。D.2.2.1.3 沿纸条长径，将滤纸左右对折，再摊主手。D.2.2.1.4 用嗷管吸取粪稀或其沉淀物，涂抹于纸条的中上段（面积约为41.3cm）。D.2.2.1.5 滤纸F面垫以吸11性强的粗草纸，以便吸去多余的水分。D.2.2.1.6 将涂旬粪稀的纸条插入小试管中，下端浸入水里，而11又不接触粪稀。D.2.2.1.7 位口外面贴上样品号，并用纸包严，以
35、防污染。D.2.2.1.8 把试管放置25-30恒温箱中培养。D.2.2.1.9 每天加水，防止于燥。D.2 .2. I . 10 培养5天后取出，在光线下用肉眼或放大镜，观察管底水中有否乳白色，呈蛇形状活动的钩蝴。或将管内1.ki到人平皿中。D.2.2.1.11 将45-48温水倒满试管中，静置20min，钳弃纸条，再静置沉淀半小时，倒去上层液体，把沉淀物倒人另一平皿内。D .2 .2. 1 . 12 用俱液杀死两个平皿巾的钩蝴并使之染色。也可加人10%盐水，稍掌沉淀，以杀死粪池中自由生活线虫。D.2.2.1.13 在显微镜下作钩黝计数。D.2.2.2 双重、皿滤纸培养讼，操作如下：80 G
36、B 7959-87 D.2.2.2.1 Jli!大小的个、l且，小的直径约6cm，大的直径约！Ocrn，将小、严皿的底放陆ll有用il!l纸包裂后，Jill底朝1，u朝F，豆放在大、卡皿的中央。D.2.2.2.2 称取3l%稀约3饵，经过水洗沉淀后，把含卵粪渣放在小、卡皿底的滤纸t，放在28恒温箱II I地养。D.2.2.2.3 1JBJll水，防1I . ；熔纸燥。D.2.2.2.4 三fl后，在大中皿内加水。以后每天检商并加水，保持水深34mm o D.2.2.2.5 5 7 j.；后取出，大平皿Ij I滴Ju腆液，在解剖镜下，作钩黝检查并计数。钩虫、粪类圆线虫、东方毛困线虫丝状蝴鉴别要1
37、1:安 、钩虫1是类困线虫东方毛剧线虫黝i-lcl:J主(). 5 0. 7mm 0. 5mm 0. 75mm 食i且氏度11i休长l5 占体长l/2 11 ii本长l4 i Wt即（,!; j,): f蝇体I 部iil t蝴休后用1h. ；面尖自11分叉饨剧，有小球状物81 GB 795 87 附录E粪稀中血吸虫卵检查法补充件粪稀血吸虫卵的检验，可以用沉淀法在显微镜下找虫卵，用孵化法找毛幼。E.1沉淀法操作方拉如下E .1 .1 取粪稀样品约3饨，放于烧怀或撼瓷杯中，IJU水调成糊状。E .1 .2 通过40-60日铜丝筛，滤人500mL馀形最杯中，加水近满。E .1 .3 静窒20-30m
38、in后，待沉渣沉淀，倒去上层粪水，保留沉渣约3告mL，换IJU清水至原刻度处。以后每i版2030min，换水一次。l1t到一1-.i手波澄清为止。因为血吸虫卵必须入水才能孵化。丽且在清;j(tjl较易孵化，所以粪稀必须冲洗至k浮液澄清为止。E .1 .4 绞34次换；j(后，用玻璃吸管吸取沉渣，作2成涂片，镜检有无血吸虫卵。窗片的面积约占泼片淤积的23，宾厚度以能透过徐片辛苦清报纸上的印刷字体为标准，过摩对可加清水I2滴稀释之。E .1 .5 一般黎求每份粪稀，至少观察3张涂片，每张图片观察时要有规律，镜检时间应不少于2min,仔细分漓血吸虫卵和摸他蠕虫卵，并与粪稀中常见的异物，主吉德物细胞等
39、丰吕区别。E .1 .6 虫在连续镜将沉滋涂片三茬，未发现有血吸虫卵肘，将全部i!L渣fjJ人25mL三角烧瓶作为孵化瓶）巾，!Ju水近淌，进行孵化。E.2 孵化法孵化法是依据血吸虫卵内的毛黝在适宜条件下很快孵出，并游动于水表面下的特性。方法如下2E .2 .1 取约30g粪稀样品，先绞沉淀法浓集处理，继将处理的粪稀沉渣倒入250mL三角烧瓶内，加入清水至瓶口。城市中常用去氯水，或把自来水放置过夜，足英自然脱氯，或在水中加入少量硫代硫酸锅每40kg水中，加入1岳飞硫代硫酸纳溶液lmL）以除去余氯。在；自来水的地区，F哥河水或井水作为孵化用水时，将水JU温到7080c j夺冷后再用，以免与水中原
40、生动物相混淆，影响观察。E .2 .2 景是2030（下进行孵化。毛刷孵化最适宜的温度为2530c，如在！OC以下成37以上，则已拗不能孵出。孵化所需的时间，30c以立，13h I 2530，46 h I 25 C以下，需过夜，气挂盖在1sc、以下时，“h!i右。放在4、12幸福24革后，鸡肉跟或放大镜观察一次。观察树，跟齐孵化瓶口，对着光，瓶后衬以黑包纸作背景，检查近瓶口13cm处，如见水面下有白色点状物，作直线来往游动，遇到阻辩时，立即转变方向者，即是毛拗，但需与水中些康生动物如革履虫等相区别。革履虫的运动，生：螺旋样摇摆或滚动，必要时可用吸辛苦将毛踏破出，在显微镜下鉴别。注意z气温高岗毛
41、麟迅速孵出，在自然气强25以上的季节，毛章给有在沉淀过程中孵出布磁换水被倒去的ilJ舵，因此应严格掌握换水的时间，以免因换水倒去毛蝴。在这种情况下，可用11.2i-o 食处水代替消水作沉淀，暂时抑制毛蝴孵出，而在更后一次iii:淀时，再换清水进行孵化。水的酸碱度会影响毛麟孵化，孵化用水以苦苦碱抖，为1室，pH在7.27.6范E窗内。82 GB 7959- 8 7 J二巨1蜕虫卵和1卡如j虫卵物质的IX别才L。H同一切虫卡口I1 F卜是必侧盖不瞥卉本规且lj白色戎黄色k JC L主绿写作：量机除价ll样ft、）r立晶L且忆：黄色（除自坦且l卵、膜光练血iri外忏jiJJ出戎肌细胞表E2血吸虫毛蝴与原生动物的rx：别1111吸虫巳黝尿i一动物形状：l.J:1k阪色透IVJ:,Q壳，有忻光，气，jJ形式2横游e1:斜醉，血纯白iJi挂1,f; 1J1也111, 殷在1k面F1 3cm 扁形或圆形灰白或灰黄色，x折光螺旋式或摇摆状戎跳跃式t-_ F游1J1范i刊不附加说明：牛；中1、准1IJ1I华人民共和国lIt部提出。丰i初、准i!Jtjl过颇防医学科学院环境卫生与卫生和创究所负责起草。乍斩、准k安起草人播顺片、严秀宜、潘长庆。丰标准经全l国I仨标准技术委/Jl会环境卫生标准分委会l丰审通过。-t:t,J、准由rjllij侦防i失学科学院环境l生监视u所负责解释。8:l
