1、附录五中华人民共和国国家标准食品添加剂中碑的测定方法Method for determination of arsenic in food additives UDC 614.3 543. 06 ,546.19 GB!T 8450-1987 本标准适用于食品添加剂中碑的限量试验和定量试验。本标准参照采用1983年联合国粮农组织和世界卫生组织CFAO/WHOl食品添加剂联合专家委员会发布的有关碑的测定方法。1 二乙氨基二硫代甲酸银比色法1. 1 原理在破化饵和氯化亚锡存在下，将样液中的高价碑还原为三价碑，三价碑与钵粒和酸产生的新生态氢作用，生成碑化氢气体，经乙酸铅棉花除去硫化氢于扰后，将溶于三乙
2、醇胶三氯甲烧中或毗院中的二乙氨基二硫代甲酸银溶液吸收并作用，生成紫红色络合物，与标准比较定量。1- 2 试剂除特别注明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馆水或去离子水。1. 2. 1 硝酸(GB626-78)。12.2硫酸CGB625-77)。中华人民共和国卫生部1987- 09-26批准1988 - 07 -01实施169 GB/T 8450 -1987 1.2.2.1 硫酸(1十1)溶液:将1体积浓硫酸慢慢加入1体积水中，冷后使用。1.2.2.2 硫酸(1mol/L)溶液z量取28mL浓硫酸.慢慢加入水中，用水稀释到500mLo 1- 2.3 盐酸(GB622一77)。1. 2. 4 氢
3、氧化纳(GB629- 77) , 20 %溶液。1. 2. 5 氧化候(HG3-1294-80)。1.2.6 硝酸筷HG3-1077-77) ，15%溶液。1.2. 7 砚化御(GB1272-77)，15%溶液。贮于棕色瓶内(临用前配制)。1- 2.8 氯化亚锡(GB638-78)，40%溶液。称取20g氯化亚锡SnCI , 2H20).溶于50mL盐酸中。1. 2. 9 乙酸铅棉花:将脱脂棉浸于10%乙酸铅HG3-974-76)溶液中，2h后取出晾干。1.2.10 无碑金属铸(GB2304-80)。1- 2.11 二、氯甲烧(GB682-78)。1. 2. 12 毗睫GB689-78)。1.
4、2.13 吸收液A，称取0.25g二乙氨基二硫代甲酸银，研碎后用适量三氯甲炕溶解，加入1.0 mL三乙醇胶，再用三氯甲烧稀释至100 mLo静置后过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内备用。1- 2.14 吸收液Bz称取0.50g二乙氨基二硫代甲酸银，研碎后用毗院溶解，并用毗驼稀释至100mL。静置后过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内备用。1.2.15 酌歌HGB303959)，1%乙醇洛液。1.2.16 碑标准溶液:称取O.132 0 g于硫酸干燥器中干燥至恒重的三氧化二碑CAs，O，)GB 1256一77)，溶于5mL 20%氢氧化纳溶液中。溶解后，加入25mL 1 mol/L硫酸.移入1000 mL容量
5、瓶中，加新煮沸玲却的水稀释至J度。此溶液1.00 mL相当于0.100mg 碑。l民用前取1.0 mL , jJU 1 mL 1 mol/L硫酸于100mL容量瓶中，170 GB/T 8450 - 1987 加新煮沸冷却的水稀释至刻度。此溶液1.0mL相当于1.0用碑。1. 3 仪器1. 3- 1 分光光度计。1. 3.2 测伸装置(见图1)。S N A , 1也mL或150 mL 95 B 外径IO出气口C 5mL刻虚图11. 3- 2. 1 100 150 mL锥形瓶(A)(19号标准口1. 3- 2.2 导气管他)，管口为19号标准口，与锥形瓶A密合时不应漏气，管尖直径。.51. 0 m
6、m，与吸收管C接合部为14号标准口，插入后，管尖距管C底为12mm。1.3.2.3 吸收管(C)，管口为14号标准口，5mL刻度，高度不低于8cm。吸收管的质料应一致。171 GB/T 8450- 1987 1.4 样品处理1. 4. 1 元机样品的样品处理可按各标准文本中规定的方法进行。1.4.2 有机样品的样品处理除按各标准文本中规定的外，一般按F述程序进行。1.4.2.1 湿法消解:称取5.0g样品，置于250mL凯氏烧瓶或三角烧瓶中，加10mL硝酸浸润样品，放置片刻(或过夜)后，缓缓加热，待作用缓和后，稍冷，沿瓶壁加入5mL硫酸，再缓缓加热.至瓶中溶液开始变成棕色，不断滴加硝酸(如有必
7、要可滴加些高氨酸，但须注意防止爆炸)，至有机质分解完全，继续加热，生成大量的二氧化硫臼色烟雾，最后溶液应无色或微带黄色。冷却后加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生臼烟为止，如此处理两次.放冷，将溶液移入50时，容量瓶中，用少量水洗涤凯氏烧瓶或三角烧瓶23次，将洗液并人容量瓶中，加水至2制度，混匀，每10mL样品液相当于l.Og样品。取相同量的硝酸，硫酸，按上述方法做试剂空白试验。1.4.2.2 子灰化法z本法用于不适合于湿法消解的样品。取5.0g样品于经增锅中，加10mL 15%硝酸续溶液，再于上面覆盖1g氧化娱粉末，混匀，浸泡4h，于低温或置水浴t蒸干，用小火加热至炭化完全，将l:!t锅移
8、至高温炉中，在550C以下灼烧至灰化完全，冷却后取出，加适量水湿润灰分，再缓缓加入盐酸(l十1)溶液至盼歌红色褪去，然后将溶液移入50mL容量瓶中(必要时过滤), 用少量水洗涤地揭3次，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀。每10 mL样品液相当于l.0 g样品。取相同量的氧化缕，硝酸续.按上述方法做试剂空白试验。.5 测定1. 5. 1 吸收液的选择z吸收液A(l.2. 13)或吸收液(l.2. 14)的选择.可根据分析的需要来判断。但是在测定过程中.样品、空白及标准都应用同一吸收液。,. 5. 2 限量试验172 、GB/T 8450-1987 1.5.2.1 吸取一定量的样品液和碑的限量标
9、准液(含碑量不低于5严g).分别置于呻发生瓶A中，补加硫酸至总量为5mL，加水至50 mL。1.5.2.2 于上述各瓶中加入3mL 15%模化御溶液，混匀，放置5 mino分别加入1mL 40%氯化亚锡溶液，混匀，再放置15mino各加入5日元耐金属镑，立即塞上装有乙酸铅棉花的导气管B.并使管B的尖端插人盛有5.0mL吸收液A或吸收液B的吸收管C中，室温反应1h.取下吸收管C.用三氯甲统(吸收液A)或收键(吸收液即将吸收液体积补充到5.0mLo 1.5.2.3 经日视比色或用1cm比色杯，于515nm波长(吸收液A)或540nm波长(吸收液B)处，测吸收液的吸光度，样品液的色度或吸光度不得超过
10、碑的限量标准吸收液的色度或吸光度。若样品经处理.!illj碑的限量标准也须同法处理。,. 5. 3 定量测定.5. 3. 1 吸取25时_(或适量)样品液及同量的试剂空白液，分别置于碑发生瓶A中，补加硫酸至总量为5mL.:lm水至50mL.混匀。.5.3.2 吸取0.0.2.0.4.0，6.0，8.0，10.0mL碑标准溶液。omL相当于1.0g碑)，分别置于碑发生瓶A中，加水至40mL，再加10mL硫酸。+1)溶液，混匀。1.5. 3. 3 向样品液、试剂空白液及碑标准液中各加入3mL 15%腆化饵溶液，混匀，放置5mi口，再分别加入1mL 40%氯化亚锡溶液，混匀，放置15mm后，各加入5
11、g无碑金属镑，立即塞上装有乙酸铅棉花的导气管B，并使管B的尖端插入盛有5.0mL吸收液A或吸收液B的吸收管C中，室温反应1h.取下吸收管C.用三氯甲烧吸收液A)或毗院(吸收液B)将吸收液体积补充到5.0mL用1cm比色杯，于515nm波长(吸收液A)或540nm波长(吸收液B)处，用零管调节仪器零点，测吸光度，绘制标准曲线比较。若样品经处理，碑的标准系列也须同法处理，以对标准曲线进行校正。173 1.5.3.4 计算G8/T 8450-1987 CAl - A,) X 1 000 V. m X V: X 1 000 式中，C样品中碑的含量，mg/kg或mg/L;Al 样品液中碑的含量，p儿试剂
12、空白液中碑的含量，g;m 样品质量(体积)，以mL);V1 样品处理后定容体积，mL;V2 测定时所取样品液体积，mLo2碑斑法2. 1 原理在映化铮和氯化亚锡存在下，将样品液中的高价碑还原为三价碑，三价碑与钵粒和酸产生的新生态氢生成碑化氢气体.通过乙酸铅棉花除去硫化氢干扰，再与漠化录试纸生成黄色至橙色的色斑，与标准呻斑比较作限量试验。2.2 试剂2.2. 1 同二乙氨基二硫代甲酸银比色法中1.2. 1 1. 2. 10及1. 2. 15、1.2.16，2.2.2 5%澳化乘乙醇溶液。2.2.3 澳化乘试纸z将剪成直径2cm的圆形滤纸片，在5%澳化宗乙醇溶液中浸溃1h以上，保存于冰箱申，临用前
13、取出置暗处阴干备用。2.3 仪器2. 3. 1 测碑装置z见图2，同GB5009.11-85食品中总碑的测定方法规定。2.3.1.1100mL锥形瓶。2. 3. 1.2 橡皮塞z中间有一孔。174 GB!T 8450 1987 2.3.1.3 挟璃il1伸管z全长18cm.上租下细，自管口向下至14cm 一段的内径约为6.5mm，自此以下逐渐狭细，末端内径约为13 mm，近末端1cm处有一孔，直径2mm，狭细部分紧密插入橡皮塞中，使下部伸出至小孔恰在橡皮塞下面。上部较粗部分装入乙酸铅棉花，长5-6cm，上端至管口处至少3cm，测呻管顶端为圆形扁平的管口.1:面磨平.下面两侧各有一钩.为固定玻璃
14、帽用。1 锥形瓶，2橡皮塞，3测碑管s4管口，5玻璃帽图25 2. 3. 1.4 玻璃帽:下面磨平，上面有弯月形凹槽，中央有困孔，直径6.5 mmo使用时将玻璃帽盖在测碑管的管口，使圆孔互相吻合，中间夹一澳化录试纸，用橡皮圈或其他适宜的方法将玻璃帽与测呻管固定。2.4 测定吸取一定量的样品液和碑的限量标准液(含碑1.0或2.0g).分别置于锥形瓶中.加5时，盐酸样品液中如含硫酸或盐酸，则要减去样品液中所含酸的毫升数).加水至30mL.再加5mL 15%殃175 GB/T 8450 -1987 化梆溶液.5滴40%氯化亚锡溶液，混匀，室温放置10min。向上述锥形瓶中，各加入3g元碑金属镑，并立即塞上预先装有乙酸铅棉花及漠化柔试纸的测碑管，于25C放置1h.取出碑斑进行比较，样品的碑斑不得深于碑的限量标准的碑斑。若样品经处理，贝tl碑的限量标准也须向法处理。附加说明:本标准由全国食品添加剂标准化技术委员会提出。本标准由江苏省扬州市卫生防疫站负责起草。本标准主要起草人姜友付、蒋庆安、杨一超、张刘平。本标准出卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫叶飞监督检验所负责解释。176
