1、ICS 65.120 B 20 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 1030一2006饲料中沙丁肢醇的测定气相色谱/质谱法Determination of salbutamol in feeds -Gas chromatography/mass spectrometry method 2006-01-26发布060727000186 2006-04一01实施中华人民共和国农业部发布前言本标准由中华人民共和国农业部兽医局提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:国家饲料质量监督检验中心(北京)。本标准主要起草人:范理、王彤、郑君杰、田静、高生、苏晓鸥。NY/T 103
2、0-2006 I 范围饲料中沙丁股醇的测定气相色谱/质谱法本标准规定了用气相色谱/质谱法(GCIMS)测定饲料中沙丁胶醇的含量。NY/T 1030-2006 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混合饲料中沙丁胶醇的测定，最低检测浓度为0.02mglkg。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/f 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/f 14699.
3、 1饲料采样3 原理用乙酸纳缓冲溶液提取饲料中的沙丁胶醇，提取液过固相提取柱(SPE)净化，吹干，经衍生后，直接在GCIMS仪上测定。4 试剂和材料以下试剂除特别注明者外均为分析纯，水应符合GB/f6682一级水要求，甲醇、甲苯、乙酸乙脂为色谱纯。4.1 氨水。4.2 冰乙酸。4.3 三水合乙酸纳。4.4 衍生剂:N，O-双三甲基硅基三氟乙眈胶(BSTFA)04.5 甲苯。4.6 提取溶液:称取31.63g三水合乙酸纳(4.3)洛于水，加入冰乙酸(4.2)约12.0mL调pH约4.5，用水稀释至1L的乙酸铀缓冲溶液。4.7 固相提取小柱(SPE)所用试剂。4.7.1 Oasis MCX固相提取
4、小柱3cc/60 mg( SPE)。4.7.2 淋洗液1:乙酸恪液C(CH3COOH)= 1 moLIL:取5.72mL冰乙酸(4.2)于100mL容量瓶，用水定容至刻度，摇匀。4.7.3 淋洗液2:甲醇。4.7.4 洗脱液:取3.5mL氨水(4.1)于100mL容量瓶中，用乙酸乙脂稀释至刻度，摇匀。( Oasis MCX固相萃取小柱是由Waters提供的产品的商品名称，给出这一信息是为了给本行业标准的使用者提供方便，而不是标准主管部门对这-产品的认可。1 NY/T 1030 2006 4.7.5 氮气。4.8 氯气(99.999%) 4.9 沙丁股醇标准溶液4.9.1 沙丁胶醇标准贮备液:称
5、取20.00mg(精确0.00001g)沙丁胶醇标准品(纯度99.5%)，溶于甲醇并定容至100mL，该贮备液每毫升含沙丁胶醇为200阅。4.9.2 沙丁胶醇标准工作液:移取lOmL沙丁胶醇贮备液(4.9.1)于100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，该溶液每毫升含沙丁胶醇为20阅。4.9.3 沙丁胶醇标准系列:取适量标准工作液(4.9.2)于50mL容量瓶中，分别用甲醇稀释至刻度，配制成0.01g/mL，0.05g/mL，0.10g/mL，0.50g/mL，1.00g/mL，5.00g/mL，10.0周/mL标准系列。5 仪器和设备实验室常用仪器、设备及5.1 分析天平:感量0.0001g和感
6、量O.OOOOlg。5.2 氯气吹干仪。5.3 振荡机:水平或往复转动，频率每分钟250次300次。5.4 涡旋混合器。5.5 固相提取样品净化处理装置。5.6 气相色谱/质谱联用仪。具有非极性毛细管柱和电子轰击源(EI)的检测器。6 试样的制备按GBf14699. 1采取实验室样品(用四分法缩减分取200g)粉碎使之全部通过0.45mm孔径筛，充分混匀，装人磨口瓶中备用。7 分析步骤7.1 提取称取试样(配合饲料3g5g，浓缩饲料、添加剂预混合饲料约1g)精确至O.OOOlg，置于150mL具塞三角瓶中，准确加入提取榕液25mL(4.6)，振摇使全部润湿，盖紧塞子，放在振荡机(5.3)上，振
7、荡20min，取r，溶液通过定性滤纸过滤，收集滤液备用。7.2 净化精确吸取5mL试样榕液(7.1)置于固相萃取小柱上(4.7.1)，打开真空泵，使其过柱速度不超过2mL/min，再分别取2mL乙酸(4.7.2)和2mL甲醇(4.7.3)淋洗固相萃取小柱，丢弃所有的流出液，最后取5mL洗脱液(4.7.4)洗脱，用具塞试管收集，将洗脱液置于氮气吹干仪(5.2)70C的条件r，用氮气吹干。7.3衍生具塞试管加入100L衍生剂(4.4)，涡旋混合器(5.4)上充分溶解，置(70:t5)C烘箱中，衍生反应30 min。用氮气吹干，加入200L甲苯(4.5)溶解，气质联用仪上分析。同时用沙丁胶醇标准系列
8、做同步衍生。7.4 测定步骤7.4.1 色谱条件NY /T 1030-2006 色谱柱:DB-5MS，长30m，内径。.25mm，膜厚0.25mo载气:氮气(纯度99.999%);柱头压:100 kPao 进样口温度:260t。进样量:1.0L，不分流方式。柱温程序:70t保持1min，以25t/min速度升至200t，于200t保持6min，再l以:丛2刃5C/min的速度升至28创ot并保持2minE凹I游源、电子轰击能:7切OeVo检测器温度:2却oot。接口温度:250t。质量扫描范围:70AMU400 AMU。溶剂延迟:1口2m旧m检测用艺抄沙!扣、丁胶醇三甲基硅皖衍生物的特征质谱峰
9、:质核比m/尼Z=8创6，29归4，350，369。7.4.2 定性定量方法7.4.2.1 定性方法样品与保留时间的相对偏差不大于0.5%。特征离子基峰百分数与标准品相差不大于20%。7.4.2.2 定量方法选择离子监测法(SIM)计算峰面积，标准工作液和试样溶液中沙丁胶醇响应值均应在仪器线性范围内，如果浓度过高，需适当稀释。对标准工作溶液和样品液等体积参插进样测定。外标法定量。8 结果的计算饲料中沙丁肢醇的含量X，以质量分数(g/g)表示，用公式(1)计算As， Vo V 1 X=EtC石冗Xn.(1) 式中:As一一试样溶液峰面积响应值;Ast一一标准溶液峰面积响应值;C一一标准溶液浓度，
10、单位为微克每毫升(g/mL); Vo-一提取洛液的总体积，单位为毫升(mL);m一一试样质量，单位为克(g); V1-一一定容体积，单位为毫升(mL);Vz一一从试样溶液(7.2)中分取体积，单位为毫升(mL)。n一一稀释倍数。计算结果保留三位有效数字。9 允许差两个平行测定结果的相对偏差不大于20%。3 88|ogF HMZ 中华人民共和国农业行业标准饲料中沙丁肢醇的测定气相色i普/质谱法NY /T 1030-2006 中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)争夺争等争夺(邮政编码:100026 网址:) 中国农业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销争e印张0.5字数5千字2006年4月北京第1次印刷争等开本880mmx 1230mm 1/16 争夺印数:1-1 000册定价:8.00元版权专有僵权必究举报电话:(010) 65005894 2006年4月第1版书号:16109 741
