1、I65.020.30 B 44 道童3中华人民共和国国家标准GB/ T 14926.18 14926. 32- 2001 GB/ T 14926. 5614926. 64- 2001 实验动物微生物学检测方法(4)Laboratory animal- Microbiological examination methods 2001- 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局GB /T 14926. 56- 2001 46 前本标准规定了狂犬病病毒的检测方法。狂犬病病毒属人兽共患病原。是普通级犬和SPF犬的必检项目，因此增加该病毒的检测方法。本标准
2、由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:田克恭。1 范围中华人民共和国国家标准实验动物狂犬病病毒检测方法Laboratory animal- Method for examination of rabies virus (RV ) 本标准规定了狂犬病病毒(RV)的检测方法、试剂等。本标准适用于犬RV的检测。2 引用标准GB/T 14926. 56-2001 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T 14926.
3、50一2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T 14926. 54-2001 实验动物血凝抑制试验3 原理根据免疫学原理，采用RV抗原检测犬血清中RV抗体;或根据RV在一定的条件下，能凝集鹅红细胞，这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理，检测犬血清中RV抗体。4 主要试剂和器材4. 1 试剂4.1.1 ELISA抗原4. 1. ,. 1 特异性抗原在生物安全柜内，用RV感染BHK21细胞，接种6d后，当病变达+时收获。冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。4.1 . 1.2 正常抗原BHK21细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获
4、得的上清液。4. 1. 2 血凝素RV接种BHK21细胞，培养45d，当病变达十十+时收获。冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液分装后低温保存。4.1.3 阳性血清RV弱毒株抗原免疫的犬血清。4.1 . 4 阴性血清无RV感染、未经免疫的犬血清。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准2002 - 05 -01实施47 GB/ T 14926. 56- 2001 4. 1. 5 酶结合物辣根过氧化物酶标记羊或兔抗犬IgG抗体。4.1. 6 鹅红细胞。4.2 器材4. 2.1 酶标仪。4. 2. 2 37C培养箱或水浴箱。5 检测方法5. 1 采用ELISA
5、方法(见GB/T14926. 50-2001)进行血清学检测。5.2 采用HAI方法(见GB/T14926. 54-2001)进行血清学检测。6 结果判定6. 1 普通级犬，接种疫苗后，经ELISA检测抗体效价注1: 160，或HAI检测抗体效价注1: 80判为合格。6. 2 SPF级犬，不应进行疫苗接种，对阳性检测结果，选用同一种方法或另一种方法重试。如仍为阳性则判为阳性。7 结果报告根据判定结果，作出报告。48 CON-3.N叮lg.Nm叮CON-s.N叮Fj.N叮H阁。H国。华人民共国家标准实验动物微生物学检测方法(4)GB/ T 14926. 18- 14926. 3-2001 GBj T 14926.56- 14926.64- 2001 国和中 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售4峰印张4字数102千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/ 16 2002年2月第一版印数1-2000定价35.00元* 书号:155066 .1-18099 网址版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533* 595- 548 科目 GB/ T 14926.18-2001
