1、GB/T 5009.451996 中华人民共和国国家标准 水产品卫生标准的分析方法 Method for analysis of hygienic standard of fish and other aquatic products GB/T 5009.451996 1 主题内容与适用范围 本标准规定了鲳鱼、 鳓鱼、 鳗鱼、 鲚鱼 、 鱼 、 黄 姑 鱼 、 鲐 鱼 、 蓝圆鲹 （ 池鱼） 、铁甲鱼、 鲅鱼、 鲱鱼等海水鱼类和青鱼、 草鱼、 鲢鱼、 鲤鱼、 鳙鱼、 鳊鱼、 鲫鱼、鲶鱼、湟鱼等淡水鱼类，墨鱼（乌贼） 、蛸、鱿鱼等头足类海产品及其他水产品的卫生指标的分析方法。 本标准适用于海水鱼
2、类、 淡水鱼类、 头足类海产和其他水产品的各项卫生指标的分析。 2 引用标准 GB 2733 海水鱼卫生标准 GB 2735 头足类海产品卫生标准 GB 2736 淡水鱼卫生标准 GB 2739 湟鱼卫生标准 GB 2740 河虾卫生标准 GB 2741 海虾卫生标准 GB 2742 牡蛎卫生标准 GB 2743 海蟹卫生标准 GB 2744 花蛤卫生标准 GB 2745 缢蛏卫生标准 GB/T 5009.11 食品中总砷的测定方法 GB/T 5009.15 食品中镉的测定方法 GB/T 5009.17 食品中总汞的测定方法 GB/T 5009.19 食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法 GB
3、/T 5009.44 肉与肉制品卫生标准的分析方法 第一篇 鲜鱼类 第二篇 本篇适用于黄鱼、带鱼、鲐鱼、鲳鱼、鲚鱼、墨鱼（乌贼） 、青鱼、草鱼、鲢鱼、鲤鱼、鳙鱼、蓝圆鲹（池鱼） 、鲱鱼、湟鱼各项卫生指标的测定。 3 感官检查 31 黄鱼（黄花鱼） 按 GB 2733 操作。 32 带鱼 按 GB 2733 操作。 33 墨鱼（乌贼） 按 GB 2735 操作。 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 中华人民共和国卫生部GB/T 5009.451996 34 青鱼、草鱼、鲢鱼、鲤鱼、鳙鱼 按 GB 2736 操作。 35 蓝圆鲹（池鱼） 按 GB 2733 操作
4、。 36 鲱鱼 按 GB 2733 操作。 37 湟鱼 按 GB 2739 操作。 4 理化检验 41 挥发性盐基氮 按 GB/T 5009.44 中 4.1 操作。 42 汞 按 GB/T 5009.17 操作。 43 六六六、滴滴涕 按 GB/T 5009.19 操作。 44 组胺 适用于蓝圆鲹（池鱼）、鲐鱼。 441 原理 鱼体中组织胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙 色，与标准系列比较定量。最低检出浓度为 5 mg/100g。 4 4 2 试剂 4 4 2 1 正戊醇。 4 4 2 2 三氯乙酸溶液（100 g/L ）。 4 4 2 3 碳酸钠溶液（50 g/L ）。 4 4 2 4 氢氧
5、化钠溶液（250 g/L ）。 4 4 2 5 盐酸（1+11）。 4 4 2 6 组织胺标准溶液：准确称取 0.276 7 g 于 100 5干燥 2 h 的磷酸组织胺，溶于水，移入 100 mL 容量瓶中，再加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于 1.0 mg 组织胺。 4 4 2 7 磷酸组织胺标准使用液：吸取 1.0 mL 组织胺标准溶液，置于 50 mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于 20 g 组织胺。 4 4 2 8 偶氮试剂。 4 4 2 8 1 甲液：称取 0.5 g 对硝基苯胺，加 5 mL 盐酸溶液溶解后，再加水稀释至 200 mL，置冰箱中。 4 4 2 8 2
6、 乙液：亚硝酸钠溶液（5 g/L ） ，临用现配。 甲液 5 mL、乙液 40 mL 混合后立即使用。 4 4 3 分析步骤 4 4 3 1 样品处理 称取 5.00 10.00 g 切碎样品，置于具塞锥形瓶中，加入 15 20 mL 三氯乙酸溶液（ 100 g/L） ，浸泡 2 3 h，过滤。吸取 2.0 mL 滤液，置于分液漏斗中，加氢氧化钠溶液（ 250 g/L）使呈碱性，每次加入 3 mL 正戊醇，振遥 5 min，提取三次，合并正戊醇并稀释至 10.0 mL。吸取 2.0 mL 正戊醇提取液于分液漏斗中， 每次加 3 mL 盐酸（ 1+11） 振摇提取三次， 合并盐酸提取液并稀释至
7、10.0 mL。备用。 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 GB/T 5009.451996 4 4 3 2 测定 吸取 2.0 mL 盐酸提取液于 10 mL 比色管中。另吸取 0、 0.20、 0.40、 0.60、0.80、 1.0 mL 组织胺标准使用液（相当于 0、 4、 8、 12、 16、 20 g 组织胺） ，分别置于 10 mL 比色管中，加水至 1 mL，再各加 1 mL 盐酸（1+11 ） ，样品与标准管各加 3 mL 碳酸钠溶液（ 50 g/L）， 3 mL 偶氮试剂，加水至刻度，混匀，放置 10 min 后用 1 cm 比色杯以零管
8、调节零点，于 480 nm 波长处测吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准系列目测比较。 4 4 4 计算 100100010210221211=VmmX （1） 式中：X1样品中组织胺的含量，mg/100g； V1加入三氯乙酸溶液（100 g/L ）的体积，mL ； m1测定时样品中组织胺的质量，g； m2样品质量，g。 结果的表述：报告算术平均值精确至小数点后一位。 4 4 5 允许差 相对相差10% 。 4 5 无机砷 4 5 1 减压蒸馏法 4 5 1 1 原理 样品中五价砷经碘化钾还原为三价砷， 与盐酸作用生成三氯化砷，经减压蒸馏，三氯化砷随氯化氢蒸气逸出，冷凝 并吸收于水中，用银盐法测
9、定其砷含量。 4 5 1 2 试剂 4 5 1 2 1 盐酸及盐酸（7+5） 4 5 1 2 2 碘化钾溶液（500 g/L ）。 其他试剂同 GB/T 5009.11 中 3.7 3.17。 4 5 1 3 仪器 4 5 1 3 1 减压蒸馏装置：见下图。 4 5 1 3 2 测砷装置：同 GB/T 5009.11 中 4.2。 4 5 1 4 分析步骤 4 5 1 4 1 样品处理 鲜样取可食部分，捣成匀浆，干样 则取可食部分，除去附着泥沙，粉碎，全部过 20 目筛。称取 20.0 g 鲜样或 4.00 g 干样，置于 250 mL 短颈球形瓶中，加 1 mL 碘化钾溶液（ 500 g/L
10、） 。鲜样加 20 mL 盐酸及水至 25 mL，干 样 加 24 mL 盐酸（7+5） 。轻轻摇匀浸泡，室温下放置 4 h（或在 70水浴中浸泡 1 h）。 4 5 1 4 2 分离 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 GB/T 5009.451996 1通气管； 2单管蒸馏头； 3短颈球瓶； 4直形冷凝器； 5真空蒸馏接受管； 6梨形烧瓶；7 水银压力计；8 直形两路活塞；9 安全瓶；10干燥塔；11 真空泵 将盛有样品溶液的短颈球形瓶，置于 70水浴中，连接好减压蒸馏装置，接收瓶（梨形烧瓶）中预先装有 20 mL 水作吸收液。约 10 min 后开动真
11、空泵，用二路活塞调节抽气流量，由通气管向样品溶液中 通入少量空气，以防暴沸，使水银压力计液面缓缓下降，直至瓶内压力恒定在 133 Pa，在减压蒸馏全过程中，接收瓶中应维持有连续不断的小气泡，蒸馏近干， 关闭二路活塞，逐步启开通气管，防止蒸馏液倒吸，关掉真空泵，用少量水冲洗冷凝管，蒸馏液移入 50 mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。 同时做试剂空白试验。 4 5 1 4 3 测定 吸取 25 mL 蒸馏液与试剂空白液， 分别置于 100 mL 锥形瓶中， 各加 6.5 mL水、 2 mL 碘化钾溶液 （ 150 g/L）、 2.5 mL 酸性氯化亚锡溶液， 混匀，放置 15 min，以下按 GB/
12、T 5009.11 中 5.2.1.1 自“各加入 3 g 锌粒”起依法操作。 4 5 1 5 计算 10001000)(235432=VVmmmX （2） 式中：X2样品中无机砷的含量，mg/kg ； m3测定用样品蒸馏液中砷的质量，g； m4试剂空白液中砷的质量，g； m5样品质量，g； V2样品蒸馏液的体积，mL ； V3测定用样品蒸馏液的体积，mL 。 结果的表述：报告算术平均值小数后一位。 4 5 1 6 允许差 同 GB/T 5009.11 中第 8 章。 4 5 2 萃取法 4 5 2 1 原理 样品中五价砷经碘化钾还原为三价砷，在 8 mol/L 以上酸性介质中补乙酸丁酯、或苯
13、等有机溶剂所萃取，将有机溶 剂中三价砷反萃取于水中，用银盐法测定中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 GB/T 5009.451996 其砷含量。 4 5 2 2 试剂 4 5 2 2 1 乙酸丁酯或苯。 4 5 2 2 2 盐酸（7+5）。 4 5 2 2 3 盐酸（3+1）。 其余同 4.5.1.2。 4 5 2 3 仪器 4 5 2 3 1 离心机：4000 r/min ，使用 50 mL 离心管。 4 5 2 3 2 抽滤装置：真空泵（或水泵） ，抽滤瓶，垂融漏斗或布氏漏斗，上加 2 号滤纸。 4 5 2 3 3 测砷装置：同 GB/T 5009.11
14、 中 4.2 条。 4 5 2 4 分析步骤 4 5 2 4 1 样品溶液处理 按 4.5.1.4.1 制备的样品溶液经垂融漏斗或布氏漏斗抽滤， 用 5 mL 盐酸（ 7+5）洗涤锥形瓶和滤器（或将样品溶液离心后吸取上清液，用 5 mL 盐酸（ 7+5）洗涤锥形瓶和离心管内残渣，离心，合并二次上清液） ，于样品溶液中加 2 mL 硫酸，提高酸度至近 9 mol/L。 4 5 2 4 2 分离 将上述样品溶液移入 250 mL 分液漏斗中，加 30 mL 乙酸丁酯，轻轻振摇120 次， 静置分层， 分出盐酸于另一分液漏斗中， 加 30 mL 乙酸丁酯第二次萃取，合并乙酸丁酯萃取液，加 15 mL
15、 盐酸（ 3+1） ，振摇洗涤乙酸丁酯，静置分层，分出盐酸。在乙酸丁酯提取液中加 10 mL 水，振摇 120 次，静置分层，分出水溶液中加到 100 mL 锥形瓶中，再用 10 mL、 5 mL 水重复萃取，合并三次水溶液。备用。 同时做试剂空白试验。 4 5 2 4 3 测定 吸取 25 mL 提取水溶液及试剂空白水溶液中，分别加 6.5 mL 盐酸、 2 mL碘化钾溶液（ 150 g/L）、 2.5 mL 酸性氯化亚锡溶液，混匀。放置 15 min，以下按 GB/T 5009.11 中 5.2.1.1 自“各加入 3 g 锌粒”起依法操作。 4 5 2 5 计算 10001000)(76
16、53=mmmX （3） 式中：X3样品中无机砷的含量，mg/kg ； m5测定用样品溶液中砷的质量，g； m6试剂空白液中砷的质量，g； m7样品质量，g。 结果的表述：同 4.5.1.5。 4 5 2 6 允许差 同 GB 5009.11 中的 5.2.1.3。 4 6 甲基汞 4 6 1 气相色谱法（酸提取巯基棉法） 。 4 6 1 1 原理 样品中的甲基汞，用氯化钠研磨后加入含有 Cu2+的盐酸（1+11），（ Cu2+与中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 GB/T 5009.451996 组织中结合的 CH3Hg+交换）完全萃取后，经离心或过滤，将上
17、清液调试至一定的酸度，用巯基棉吸附，再用盐酸（ 1+5）洗脱，最后以苯萃取甲基汞，用带电子捕获鉴定器的气相色谱仪分析。 4 6 1 2 试剂 4 6 1 2 1 氯化钠。 4 6 1 2 2 苯：色谱上无杂峰，否则应重蒸馏纯化。 4 6 1 2 3 无水硫酸钠：用苯提取，浓缩液在色谱上无杂峰。 4 6 1 2 4 盐酸（ 1+5） ：取优级纯盐酸，加等体积水，恒沸蒸馏，蒸出盐酸为（1+1） ，稀释配制。 4 6 1 2 5 氯化铜溶液（42.5 g/L ）。 4 6 1 2 6 氢氧化钠溶液 （ 40 g/L）： 称取 40 g 氢氧化钠加水稀释至 1 000 mL。 4 6 1 2 7 盐酸
18、（ 1+11） ：取 83.3 mL 盐酸（优级纯）加水稀释至 1 000 mL。 4 6 1 2 8 淋洗液（ pH33.5） ：用盐酸（ 1+11）调节水的 pH 为 3 3.5。 4 6 1 2 9 巯基棉： 在 250 mL 具塞锥形瓶中依次加入 35 mL 乙酸酐、 16 mL冰乙酸、 50 mL 硫代乙醇酸、 0.15 mL 硫酸、 5 mL 水，混匀，冷却后，加入 14 g脱脂棉，不断翻压，使棉花完全浸透，将塞盖好，置于恒温培养箱中，在 370.5保温 4 天（注意切勿超过 40） ，取出后用水洗至近中性，除去水分后摊于瓷盘中，再在 37 0.5恒温箱中烘干，成品放入棕色瓶中，放
19、置冰箱保存备用（使用前，应先测定巯基棉对甲基汞的吸附效率为 95%以上方可使用） 。 注：所有试剂用苯萃取，萃取液不应在气相色谱上出现甲基汞的峰。 4 6 1 2 10 甲基汞标准溶液：准确称取 0.125 2 g 氯化甲基汞，用苯溶解于 100 mL 容量瓶中，加苯稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 1.0 mg 甲基汞。放置冰箱保存。 4 6 1 2 11 甲基汞标准使用液：吸取 1.0 mL 甲基汞标准溶液，置于 100 mL容量瓶中，用苯稀释至刻度。此溶液每毫升相当于 10 g 甲基汞。取此溶液 1.0 mL，置于 100 mL 容量瓶中，用盐酸（ 1+5）稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0
20、.1 g 甲基汞，临用时现配。 4 6 1 2 12 甲基橙指示液（1 g/L ）。 4 6 1 3 仪器 4 6 1 3 1 气相色谱仪：附63Ni 电子捕获鉴定器或氚源电子捕获检定器。 4 6 1 3 2 酸度计。 4 6 1 3 3 离心机：带 50 80 mL 离心管。 4 6 1 3 4 巯基棉管：用内径 6 mm、长度 20 cm，一端拉细（内径 2 mm）的玻璃滴管内装 0.1 0.15 g 巯基棉，均匀填塞，临用现装。 4 6 1 3 5 玻璃仪器：均用硝酸（1+20 ）浸泡一昼夜，用水冲洗干净。 4 6 1 4 分析步骤 4 6 1 4 1 气相色谱参考条件 4 6 1 4
21、1 1 Ni63电子捕获鉴定器：柱温 185，鉴定器温度为 260，汽化室温度 215。 4 6 1 4 1 2 氚源电子捕获鉴定器：柱温 185，鉴定器温度为 190，汽化室温度 185。 4 6 1 4 1 3 载气：高纯氮，流量为 60 mL/min（选择仪器的最佳条件） 。 4 6 1 4 1 4 色谱柱：内径 3 mm，长 1.5 m 的玻璃柱，内装涂有 7%（ m/m）丁二酸乙二醇聚酯 （ PEGS）或涂 1.5%（ m/m） OV-17 和 1.95%QF-1 或 5%（ m/m）中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 GB/T 5009.4519
22、96 丁二乙酸二乙二醇酯（ DEGS）固定液的 60 80 目 Chromosorb W AW DMCS。 4 6 1 4 2 测定 称取 1.00 2.00 g 去皮去刺剁碎混匀的鱼肉（称取 5 g 虾仁，研碎） ，加 入 等量氯化钠，在乳钵中研成糊状，加入 0.5 mL 氯化铜溶液（ 42.5 g/L） ，轻轻研匀，用 30 mL 盐酸（ 1+11）分次完全转入 100 mL 带塞锥形瓶中，剧烈振摇 5 min，放置 30 min（也可用振荡器振摇 30 min） ，样液全部转入 50 mL 离心管中，用 5 mL 盐酸（ 1+11）淋洗锥形瓶， 洗液与样液合并， 离心 10 min（转速
23、为 2000 r/min），将上清液全部转入 100 mL 分液漏斗中，于沉渣中再加 10 mL 盐酸（ 1+11），用玻璃搅拌均匀后再离心，合并二份离心溶液。 加入与盐酸（ 1+11）等量的氢氧化钠溶液（ 40 g/L）中和，加 1 2 滴甲基橙指示液，再调至溶液变黄色，然后滴加盐酸（ 1+11）至溶液从黄色变橙色，此溶液的 pH 在 3 3.5 范围内（可用 pH 计校正） 。 将塞有巯基棉的玻璃滴管接在分液漏斗下面，控制流速约为 4 5 mL/min，然后用 pH3 3.5 的淋洗液冲洗漏斗和玻璃管，取下玻璃管 ，用玻璃棒压紧巯基棉，用洗耳球将水量吹尽，然后加入 1 mL 盐酸（ 1+5
24、）分别洗脱一次，用洗耳球将洗脱液吹尽，收集于 10 mL 具塞比色管中。 另取二支 10 mL 具塞比色管，各加入 2.0 mL 甲基汞标准使用液（0.1 g/mL）。 向含有样品及甲基汞标准使用液的具塞比色管中各加入 1.0 mL 苯，提取振摇 2 min，分层后吸出苯液，加少许无水硫酸钠 ，摇匀，静置，吸取一定量进行气相色谱测定，记录峰高，与标准峰高比较定量。 4 6 1 5 计算 100010009254184=mhVVhmX （4） 式中：X4样品中甲基汞的含量，mg/kg ； m8甲基汞标准量，g； h1样品峰高，mm； V4样品苯萃取溶剂的总体积，L ； V5测定用样品的体积，L
25、； h2甲基汞标准峰高，mm； m9样品质量，g。 结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 4 6 1 6 允许差 相对相差20% 。 4 6 2 冷原子吸收法（酸提取巯基棉法） 4 6 2 1 原理 同 4.6.1.1。但在碱性介质中用测汞仪测定，与标准系列比较定量。 4 6 2 2 试剂 4 6 2 2 1 氯化亚锡溶液（300 g/L ） ：称取 60 g 氯化亚锡（SnCl 2H2O），加少量水，再加 10 mL 硫酸，加水稀释至 200 mL 放置冰箱保存。 4 6 2 2 2 铜离子稀溶液：称取 50 g 氯化钠，加水溶解，加 5 mL 氯化铜溶液（42.5 g/L ） ，加 5
26、0 mL 盐酸（1+1） ，加水稀释至 500 mL。 4 6 2 2 3 氢氧化钠溶液（400 g/L ）。 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 GB/T 5009.451996 4 6 2 2 4 甲基汞标准溶液：准确称取 0.125 2 g 氯化甲基汞，置于 100 mL容量瓶中，用少量乙醇溶解，用水稀释 至刻度，此溶液每毫升相当于 1.0 mg 甲基汞，放置冰箱保存。 4 6 2 2 5 甲基汞标准使用液：吸取 1.0 mL 甲基汞标准溶液，置于 100 mL容量瓶中，加少量乙醇，用水稀释至刻 度，此溶液每毫升相当于 10 g 甲基汞，再吸取此溶液
27、1.0 mL，置于 100 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于 0.1 g 甲基汞，临用时现配。 其余试剂同 4.6.1.2。 4 6 2 3 仪器 4 6 2 3 1 测汞仪。 4 6 2 3 2 pH 计。 4 6 2 3 3 离心机：带 50 80 mL 离心管。 4 6 2 3 4 巯基棉管：同 4.6.1.3.4。 4 6 2 3 5 玻璃仪器：处理同 4.6.1.3.5。 4 6 2 4 分析步骤 按 4.6.1.4.2 第一、二、三段操作。 洗脱液收集在 10 mL 具塞比色管内，补加铜离子稀溶液至 10 mL。再吸取2.0 mL 此溶液，加铜离子稀溶液至 10
28、mL。 另取 12 支 10 mL 具塞比色管，分别加入 5 mL 铜离子稀溶液，然后加入0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00 mL 甲基汞标准使用液各两管，各补加铜离子稀溶液至10 mL（相当于 0,0.02,0.04,0.06,0.08.0.10 g 甲基汞） 。 将样品及汞标准溶液分别依次倒入汞蒸气发生器中，加 2 mL 氢氧化钠溶液（ 400 g/L）， 15 mL 氯化亚锡溶液（ 300 g/L） ，通气后，记录峰高或记录最大读数，绘制标准曲线比较。 4 6 2 5 计算 1000102100011105=mmX （5） 式中：X5样品中甲基汞的含量，mg/kg ；
29、m10测定用样品中甲基汞的质量，g； m11样品质量，g。 结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 4 6 2 6 允许差 同 4.6.1.6。 4 7 镉 按 GB/T 5009.15 操作。 第二篇 其他水产品 本篇适用于河虾和对虾、 海白虾、 虾蛄、 鹰爪虾等海虾及牡蛎 （蚝、 海蛎子） 、海蟹、花蛤、缢蛏各项卫生指标的测定。 5 感官检查 5 1 河虾按 GB 2740 操作。 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 GB/T 5009.451996 5 2 对虾、海白虾、虾蛄、鹰爪虾等海虾按 GB 2741 操作。 5 3 牡蛎（蚝、海蛎子）按 GB
30、 2742 操作。 5 4 花蛤按 GB 2744 操作。 5 6 缢蛏按 GB 2745 操作。 6 理化检验 6 1 挥发性盐基氯 按 GB/T 5009.44 中 4.1 操作。 6 2 pH 值酸度计法 适用于牡蛎（蚝、海蛎子） 。 6 2 1 原理 用酸度计直接测定样品水溶液 pH 值。 6 2 2 仪器 酸度计（精度在 0.05 以上） 。 6 2 3 分析步骤 称取 10.00 g 切碎样品， 加新煮沸后冷却的水至 100 mL， 摇匀， 浸渍 30 min后过滤或离心，取约 50 ml 滤液于 100 mL 烧杯中用酸度计测定 pH 值。 结果的表述：报告算术平均值的二位有效数
31、。 6 2 4 允许差 平行测定允许差 0.1pH。 6 3 汞 按 GB/T 5009.17 操作。 6 4 六六六、滴滴涕 按 GB/T 5009.19 操作。 6 5 无机砷 按 4.5 操作。 6 6 甲基汞 按 4.6 操作。 6 7 镉 按 GB/T 5009.15 操作。 附加说明： 本标准由卫生部卫生监督司提出。 本标准由上海市食品卫生监督检验所、 江苏 省卫生防疫站、 杭州市卫生防疫站、 卫生部食品卫生监督检验所、 青海省卫生防疫站、 福建省卫生学校负责起草。 本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 1996 0901 实施 中华人民共和国卫生部
