1、中华人民共和国国家标准肉与肉制品羟脯氨酸含量测定国家技术监督局 批准 实施本标准等效采用国际标准 肉和肉制品中 羟脯氨酸含量的测定主题内容与适用范围本标准规定了肉与肉制品中 羟脯氨酸含量的测定方法本标准适用于肉与肉制品中 羟脯氨酸含量的测定引用标准肉与肉制品取样方法原理试样在氯化亚锡的盐酸溶液中水解释放出羟脯氨酸 经氯胺 氧化生成含有吡咯环的氧化物用高氯酸破坏过量的氯胺 羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物 在波长处进行比色测定试剂所用试剂均为分析纯 水为蒸馏水或同等纯度的水氯化亚锡 溶液将氯化亚锡 溶于 水中再加入 浓盐酸盐酸 溶液氢氧化钠 溶液缓冲液 将 柠檬酸 氢氧化钠和
2、结晶乙酸钠 溶于水 稀至 此溶液与 水和 正丙醇混合氯胺 溶液将 氯胺 溶于 水中依次加入 正丙醇和缓冲溶液用时现配显色剂称取 对二甲氨基苯甲醛 用 高氯酸 溶解缓慢加入 异丙醇羟脯氨酸 标准溶液标准储备液 称取 羟脯氨酸用少量水溶解加一滴 盐酸定容至 容量瓶中标准工作液 吸取标准储备液 于 容量瓶中定容仪器和设备实验室常规设备绞肉机 孔径不超过配有冷凝管的三角瓶恒温水浴试管加热器或水浴可控温于分光光度计试样按 取样试样准备生肉与生肉制品用快刀把完整的肉切成约 的小丁 装入密封样品盒中或者用耐热塑料袋真空包装在 以上保温 以下按 步骤进行熟肉制品 取有代表性的试样 于绞肉机中绞两次 使其混匀贮
3、于容器中备用制备好的试样要尽快分析 若不立即分析要密封冷藏保存防止变质和成分变化贮存的试样在启用时必须重新匀质分析步骤试样前处理称取试样 精确至 放入 磨口三角瓶中注意不要使样品粘在壁上 加几粒沸石 加入氯化亚锡溶液 置于水浴上加热回流趁热将水解溶液过滤于 容量瓶中用 热盐酸 反复三次冲洗三角瓶和滤纸冷却 用水定容到刻度混匀 吸取 水解液于 烧杯中 用 氢氧化钠溶液调节 为 过滤于 容量瓶中用 水冲洗烧杯和滤纸上的氢氧化亚锡沉淀 反复三次把洗液并入滤液中以水洗至刻度摇匀备用测定标准曲线的绘制吸取 羟脯氨酸标准工作液 分别置于 容量瓶中定容摇匀 浓度分别为 取不同浓度的上述溶液 分别加入具塞试管
4、中加氯胺 溶液 摇匀后于室温放置 加入显色剂 摇匀塞上塞子于 试管加热器或恒温水浴 中保温 后取出迅速冷却在波长 处测定吸光值绘制标准曲线试样测定从 容量瓶中吸取已制备好的样液 于 具塞试管中以下按 步骤进行 同时作空白试验分析结果的计算计算公式式中 样品中 羟脯氨酸的含量从标准曲线上查得相应的 羟脯氨酸量称取试样的质量从 容量瓶中吸取滤液的体积当符合允许差所规定的要求时取两次测定结果的算术平均值作为结果结果精确到允许差同一分析者同时或相继进行的两次测定结果之差不得超过平均值的附加说明本标准由中华人民共和国商业部提出本标准由中国肉类食品综合研究中心归口本标准由中国肉类食品综合研究中心起草本标准主要起草人张燕婉焦烨
