1、ICS 65.100 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 1156.1一2006农药室内生物测定试验准则杀菌剂第1部分:抑制病原真菌抱子萌发试验凹玻片法Pesticides guidelines for laboratory bioactivity tests Part 1: Determining fungicide inhibition of pathogen spore germination 。nconcave slides 06:030000125 2006一07-10发布2006斗。一01实施中华人民共和国农业部发布前言农药室内生物测定试验准则杀菌剂为系列标准。本部
2、分是农药室内生物测定试验准则杀菌剂的第1部分。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位:农业部农药检定所。本标准主要起草人:徐文平、朱春雨、吴新平、张弘、邱涧平。本标准由农业部农药检定所负责解释。NY /T 1156. 1-2006 I NY /T 1156.1-2006 农药室内生物测定试验准则杀菌剂第1部分:抑制病原真菌抱子萌发试验田玻片法1 范围本部分规定了杀菌剂抑制病原真菌抱子萌发试验的基本要求和方法。本部分适用于杀菌剂对病原真菌于包子萌发抑制作用测定的农药登记室内试验，其他试验参照本部分执行。2 试验条件2.1 试验靶标试验靶标应选择容易产生于包子且子包子容易萌发、遗传
3、和成熟度一致、便于镜检的病原真菌，如稻瘟病菌(Pyriculariaoryzae)、梨黑星病菌(Venturiairina)等。记录菌种来源。2.2 仪器设备2.2.1 离心机;2.2.2 电子天平(感量0.1mg); 2.2.3 显微镜;2.2.4 培养箱;2.2.5 培养皿;2.2.6 计数器;2.2.7 载玻片;2.2.8 凹玻片;2.2.9 移液管或移液器等。3 试验设计3.1 试材准备将试验用病原真菌在适宜的培养基上培养，或将病组织保湿培养，待产生袍子后备用。3.2 药剂3.2.1 试验药剂试验药剂采用原药(母药)，并注明通用名、商品名或代号、含量和生产厂家。3.2.2 对照药剂对照
4、药剂采用已登记注册且生产上常用的抑制袍子萌发的杀菌剂原药。3.3 试验步骤3.3.1 抱子悬浮液配制将培养好的病原真菌于包子用去离子水从培养基或病组织上洗脱、过滤，离心(1000r/min)5 min，倒去上清液，加人去离子水，再离心。最后用去离子水将子包子重悬浮至每毫升1X 105个1X 107个抱子，并加入0.5%葡萄糖溶液。3.3.2 药剂配制1 NY/T 1156.1-2006 水榕性药剂直接用水榕解稀释。其他药剂选用合适的溶剂(如甲醇、丙酣、二甲基甲酷胶或二甲基亚枫等)溶解，用0.1%的吐温80水溶液稀释。根据药剂活性，设置5个-7个系列质量浓度，有机溶剂最终含量不超过2%。3.3.
5、3 药剂处理用移液管或移液器从低浓度到高浓度，依次吸取药液0.5mL分别加人小试管中，然后吸取制备好的抱子悬浮液0.5mL，使药液与子包子悬浮液等量混合均匀。用微量加样器吸取上述混合液滴到凹玻片上，然后架放于带有浅层水的培养皿中，加盖保湿培养于适宜温度的培养箱中。每处理不少于3次重复，并设不含药剂的处理作空白对照。4 调查当空白对照抱子萌发率达到90%以上时，检查各处理抱子萌发情况。每处理各重复随机观察3个以上视野，调查抱子总数不少于200个，分别记录萌发数和抱子总数。抱子芽管长度大于抱子的短半径视为萌发。本试验还应观察记录芽管生长异常情况、附着胞形成数等。5 数据统计与分析5.1 计算方法根
6、据调查数据，计算各处理的抱子萌发相对抑制率，单位为百分率(%)。按公式(1)、(2)计算，计算结果保留小数点后两位:式中:R-一一于包子萌发率;Ng一一抱子萌发数;风一一调查的抱子总数。式中:Re一一处理校正抱子萌发率;Rt一一处理抱子萌发率;R。一一空白对照抱子萌发率。式中:I一一抱子萌发相对抑制率;Ro一一空白对照抱子萌发率;Re一一处理校正的子包子萌发率。5.2 统计分析R=母x100 . (1) Re去x100 Ro -; I=一豆厂x100 (3) 根据各药剂浓度对数值及对应的抱子萌发相对抑制率的几率值作回归分析，计算各药剂的ECso、EG.Jo等值及其95%置信限。进行药剂联合毒力
7、测定时，根据Wedly法或孙云沛法计算混剂的增效系数(SR)或共毒系数(CTC) ，评价混剂的联合作用类型。NY/T 1156.1-2006 Wadley法:根据增效系数(SR)来评价药剂混用的增效作用，即SR1.5为增效作用。计算增效系数(SR)按公式(4)、(5)t十算:PA十Px = :. n /Tl. (4) 式中:X一一棍剂的ECso理论值，单位为毫克每升(mglL); PA一一混剂中A的百分含量;PS一一混剂中B的百分含量;A一-1.昆剂中A的ECso值，单位为毫克每升(mglL); B一-11昆剂中B的ECso值，单位为毫克每升(mglL)。SR=主式中:SR一-t昆剂的增效系数
8、;X一一混剂ECso的理论值，单位为毫克每升(mglL); X1一一混剂ECso的实测值，单位为毫克每升(mglL)。孙云沛法:根据共毒系数(CTC值)来评价药剂混用的增效作用，即CTC80为拮抗作用，80CTC120为相加作用，口C二三120为增效作用。计算共毒系数(CTC值)按公式(6)、(7)、(8)计算:A过x100 . (6) 式中:ATI一-tl昆剂实测毒力指数;S一一标准药剂的ECso，单位为毫克每升(mg只L);M一一供试混剂的ECso，单位为毫克每升(mglL)。TTI = TIA X PA + TIB X PB. (7) 式中:TTI一-tl昆剂理论毒力指数;TIA-A药剂
9、毒力指数;PA一-A药剂在混剂中的百分含量，单位为百分率(%);TIB一-B药剂毒力指数:PB一-B药剂在1昆剂中的百分含量;单位为百分率(%)。T17ATlea =一一XlUUU) TTI . 式中:CTC一一共毒系数;ATI一-1昆剂实测毒力指数;TTI一-1.昆剂理论毒力指数。6 结果根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告，并列出原始数据。3 CON-F.C的FFHFZ中华人民共和国农业行业标准农药室内生物测定试验准则杀菌剂第1部分:抑制病原真菌抱子萌发试验凹玻片法NY/T 1156.1-2006 中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码:100026 网址:) 中国农业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销是关9号印张0.5字数5子字2006年9月北京第1次印刷印数:1-500册定价:8.00元* * * 开本880mmx 1230mm 1116 2006年9月第1版书号:16109.948 版权专有僵权必究举报电话:(010) 65005894
