1、中华人民共和国卫生行业标准尿中有机(甲基)京、无机柔和总柔的分别测定方法选择性还原-冷原子吸收光谱法Urine-Separate determination of organic, inorganic and total mercury-Selective reduction cold atomic absorption spectrometric method 1 主题内容与适用范围WS /T 2 7 - 1 9 96 本标准规定了尿中有机(甲基)隶、无机柔和总隶的分别测定方法一选择性还原-冷原子吸收光谱法。本法最低检测浓度为有机隶O.2g/L，无机柔O.3月/L，总乘O.5g/L。本标准适
2、用于正常人和接触柔蒸气及无机柔和有机柔的工人尿中有机(甲基)隶、无机柔和总柔的分别测定。2 原理尿中总隶(有机乘和无机乖)在铺离子存在下，于强碱性(pH=14)下，用高浓度的氯化亚锡还原成元素菜，柔蒸气由空气送入测隶仪的检测管内，测量吸光度定量。在不加铺离子和氯化亚锡浓度较低的条件下只有无机柔被还原成元素隶，而有机菜不被还原，从而测定无机柔的含量。从总柔中减去无机柔即为有机隶含量。3仪器3. 1 测隶仪。3. 2 乘蒸气发生瓶或大型气泡吸收管。3. 3 具塞试管，10mL。3. 4 聚乙烯塑料瓶，采尿样用。3.5 尿比重计。3. 6 玻璃仪器和塑料器皿均用1+1硝酸(HN03)浸抱过夜，冲恍干
3、净，晾干后备用。4 试剂本方法所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。4. 1 实验用水:为去离子水或用全玻璃蒸锢器重蒸的水。4.2 盐酸，P20 = 1. 19 g /L ，优级纯。4.3 硝酸，在0=1.42g/L，优级纯。4.4 氢氧化锅，优级纯。4.5 磷酸三丁醋(抗泡剂)。中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施WS/T 27-1996 4.6 氢氧化纳溶液，500g/L。4.7 DL半脱氨酸溶液，10g/L:称取1g DL半脱氨酸，加5mL水，1mL盐酸(4.2)，溶解后用水稀释至100mL。4.8 氯化亚锡-硫酸铺试剂4. 8. 1 甲液:榕解50g氧
4、化亚锡(SnC12 2H20)于15mL盐酸(4.2)中(加热助梅)，用水稀释至50mL.加入数粒锡粒，4C冰箱中保存。4.8.2 乙、液:溶解5g硫酸铺于50mL水中。4. 8. 3 临用前将甲、乙两液等体积1昆合。4.9 氯化亚锡溶液，50g/L:溶解5g氯化亚锡(SnC12 2H20)于8.3mL盐酸(4.2)中，用水稀释至100mL，加数粒锡粒，4C冰箱中保存。4.10 重错酸饵悔?夜，0.5g/L:溶解0.5g重铅酸伺于50mL硝酸(4.3)中，用水稀释至1000 mL(柔保存液)。4.11 氯化隶标准梅、液:称取0.1354 g氯化隶(HgC12)，溶于重恪酸拥溶液(4.10)中，
5、在容量瓶中稀释至1000 mL，此榕液1mL=100g Hg2。临用前用重错酸饵溶液(4.10)稀释成1mL=O. 5g Hg2+的标准应用液。4.12 氧化甲基隶标准溶液:称取O.125 2 g氯化甲基乖(CH3HgCl)，用煮沸后放冷的去离子水榕解，在容量瓶中稀释至100mL，此溶液1mL=100g Hg2+ 0临用前用煮沸后放冷的去离子水稀释成1mL= O. 5g Hg2+的标准应用液。4.13 基体尿掖:用两个正常人尿样(浓、稀)调节成比重为1.015土0.002。4. 14 质控样:用标准尿样、加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。5 采样、运输和保存用聚乙烯塑料瓶
6、收集一次尿样，尽快测定比重后，加入氢氧化饷，使其浓度达40g/L尿样。在40C下可保存两周。6 分析步骤6. 1 仪器操作条件检查测隶仪电源并检查其与隶蒸气发生瓶衔接部位是否漏气，按仪器说明书要求调整好测乘仪。6.2 样品处理分别吸取5.0mL尿样于A、B两支具塞试管中，加入5mL水(4.1).2 mL氢氧化纳溶液(4.的，0.5 mL DL半肮氨酸溶液，棍匀。A管测定总隶，B管测定无机柔。6. 3 标准曲线的制备6. 3. 1 总乖标准曲线的制备6.3.1.1 取7支具塞试管，按表1配制标准管。表1总*标准管的配制管号。2 3 4 5 6 氯化乘标准应用液.mL。0.05 0.10 0.15
7、 0.20 0.25 氯化甲基隶标准应用液.mL。o. 05 0.10 0.15 0.20 o. 25 基体尿液.mL。5.0 5.0 5. 0 5. 0 5.0 5. 0 水.mL10 5.0 4.9 4.8 4.7 4.6 4.5 氢氧化纳溶液.mL2 2 2 2 2 2 2 DL半脱氨酸溶液.mLo. 5 o. 5 0.5 O. 5 0.5 O. 5 0.5 求含量，用。0.05 0.10 O. 15 0.20 0.25 WS/T 27-1996 6.3.1.2 将配制好的标准管顺次倒入隶蒸气发生瓶内，加1滴磷酸三丁醋，1mL氯化亚锡-硫酸铺试剂(4.8.3)，立刻盖紧发生瓶瓶盖，接通抽
8、气路，读取最大吸光度值。待指针回零后再测定下一个样品。6. 3. 1. 3 从26号管吸光度值中减去1号管吸光度值，以录含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6. 3. 2 无机乖标准曲线的制备6.3.2.1 取7支具塞试管，按表2配制标准管。6. 3. 2. 2 将配制好的标准管顺次倒入隶蒸气发生瓶中，加1滴磷酸三丁醋.1mL氯化亚锡溶被(4.的，立刻盖紧发生瓶瓶盖，接通抽气路，读取最大吸光度值。待指针回零后再测定下一个样品。表2无机柔标准管的配制管号。1 2 3 4 5 6 氯化采标准应用液，mL。0.10 0.20 O. 30 0.40 O. 50 基体尿液.mL。5.0 5.0
9、5. 0 5.0 5.0 5. 0 水.mL10 5. 0 4.9 4.8 4.7 4. 6 4.5 氢氧化纳溶液.mL2 2 2 2 2 2 2 DL-半脱氨酸溶液.mL0.5 0.5 O. 5 0.5 0.5 0.5 O. 5 求含量，闯。0.05 0.10 0.15 O. 20 O. 25 6. 3. 2. 3 按6.3.1.3条，绘制标准曲线。6.4 样品测定按6.2条处理后的A样品管按6.3.1.2条操作.B样品管按6.3.2.2条操作，分别测量吸光度。从所得的吸光度中减去各自的0号管的吸光度值，由各自的标准曲线上查得样品中总柔和无机柔的含量。在测定前后以及每测定10个样品后，测定一
10、次质控样。7 计算7. 1 按式。)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数是。1.020 - 1. 000 是=(1 ) 实测比重1. 000 7. 2 按式(2)、式(3)和式(4)分别计算尿中总隶、无机柔和有机柔的放度。1X 1 000 X121 V1 h ( 2 ) x气1000 2 = L -T X是(3 ) X 3 = X1 -X 2 ( 4 ) 式中:Xj、X2、X3一一分别为尿中总隶、无机柔和有机柔的浓度，g/L;mj 、m2一一分别为从标准曲线上查得的尿样中总柔和无机柔的含量，用;VV2 分析时所取尿样体积.mL。8 说明8. 1 本法的最低检测浓度:总隶为0.5
11、g/L.无机隶为O.3g/L.有机菜为O.2g/L。线性范围均为OO. 25月。精密度:测定总柔的r= 3. 37% 6.12%(尿乖浓度为O.52. O. 75 , 2. 12 , WS/T 2 7 -1 996 5.20吨/L，n=6)。无机柔的CV=l.80%7. 20%(尿隶浓度为0.25，0.28，1.06，2.55g/L，n=6)。有机柔的CV=4.17%9. 30% (尿秉哝度为0.26，0.50，1.06，2.65月/L，n=6)。准确度:总柔的尿样加标回收率为80.0%1l1. 3%(总乘加入量为0.10，0.20，0.40吨，n=肘，无机乘为88.4%1l2. 0% (无机
12、柔加入量为0.05，0.10，0.20吨，n=肘，有机乖为70.0%-120.0%(有机隶加入量为0.05，0.10，O. 20g，n=6)。8.2 接触者尿样采集时间不限。采尿样时需脱离现场环境，换下工作服，洗手，以防污染。8. 3 尿中大量的有机物质与在反应时形成的氢氧化物形成共沉淀，使反应溶液变稠，影响了隶蒸气的析出速度。因此，必须用基体尿液(4.13)代替水来配制标准管。8.4 温度对冷原子吸收光谱法测隶有明显的影响，当被测溶攘的温度由150C升高至40C时，测定结果增加一倍。所以，标准与样品必须控制在同一温度下进行测定。8.5 样品处理时加入半脱氨酸，主要起稳定剂的作用:一是稳定无机求不致因吸附或挥发而损失;二是稳定有机录不致分解而降低。8.6 质控样如使用标准尿样或加标的模拟尿时可考察准确度或精密度。如使用接触者尿或加标正常尿时可考察精密度。但人尿不易久存。模拟尿只含人尿中的大量成分。附加说明:本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由广东省职业病防治院负责起草。本标准主要起草人刘其中、黄春英。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。
