1、YC/T 34-1996 前主口本标准等效采用国际IS02881:1992 , 依据IS02881: 1992制定本标准时，我们未给出水蒸气蒸馆装置的建议样式，以便于各种装置的使用单位。另外，由于试样制备已另有标准规定，所以在本标准中引用了这个标准。进行水蒸气蒸馆装置的回收率测定需要使用纯烟碱和烟碱盐。纯烟碱或烟碱盐的纯度测定需要有相应的方法，因此，将CORESTA39号推荐方法(1994年发布)等效采用为附录A(标准的附录)，以便于水蒸气蒸馆装置回收率的测定和其他需要纯烟碱制作标准曲线的分析方法的使用。在制定本标准的附录A部分时，我们选择了烧结玻璃增蝙过滤沉淀的方法，取消了滤纸过滤法，这样就
2、消除了由于方法不一致可能造成的测定误差。本标准从1997年7月1日起实施。本标准的附录A是标准的附录。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会归口。本标准起草单位:国家烟草质量监督检验中心。本标准主要起草人.刘惠民、王芳、杨进、陈燕、赵明月。445 YC/T 34-1996 ISO前言国际标准化组织(lSO)是一个全球性的国家标准团体(国际标准化组织会员国)联合会国际标准的制修订一般是通过国际标准化组织的各个技术委员会进行的。对某个已经建立技术委员会的学科感兴趣的会员国均可参加该技术委员会。与国际标准化组织协作的各国际组织、政府和非政府机构也参与国际标准化组织的工作。国际标
3、准化组织与国际电工委员会(lEC)在电工标准化的所有业务土进行密切合作。已被技术委员会采纳的国际标准草案要发至各会员国投票，应至少有75%的会员国投赞成票，方可成为国际标准。国际标准ISO2881是由国际标准化组织第126技术委员会(lSO/TCI26)，即烟草及烟草制品技术委员会制定的。此次第三版对第二版(lSO2881，1997)进行了技术修订，废止并代替第二版。446 中华人民共和国烟草行业标准烟草及烟草制品总植物碱的测定光度法1 范围Tobacco and tobacco products-Determination of alkaloids Spectrometric method
4、YC/T 34 1996 eqv ,so 2881 ,1992 本标准规定了光度法测定烟草及烟草制品中总植物碱的方法，以烟碱表示。本标准适用于烟草及烟草制品。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T 5606.1-1996卷烟抽样YC/T 5-1992 烟草成批取样的一般原则YC/T 31-1996烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法3 原理试料在强碱性条件下进行水蒸气蒸锢，光度法测定馆出液的吸光值，计算出总植物碱的含量，以烟碱表示。4 试剂使用
5、分析纯级试剂，水应为蒸锢水或同等纯度的水。4. 1 氢氧化锅，片状。4.2 氯化俐。4.3 烟碱，最低纯度98%，见附录A(标准的附录)。4.4 硫酸溶液，c(H2S，)= 1mol/L。4.5 硫酸浴液，以H2S，)=0.025mol/Lo5 仪器设备常用实验室仪器及下述各项。5. 1 水蒸气蒸馆装置。以预计在试料中检到的最高烟碱量的纯烟碱按7.4试验水蒸气蒸馆系统，回收率应达到98%以L否则，应调整蒸饱速度加以改善。果用说明zuISO 2881，1992提出了三种建议样式回国家烟草专卖局1996-10-07批准1997-07-01实施447 YC/T 34-1996 5.2 光谱仪，具有2
6、30290nm的波长范围。5.3 匹配的石英比色皿，光径长lcffio5.4 容量瓶，50mL、250m!_5. 5 单刻度移液管，5mL、10mL.5.6 玻璃漏斗，直径约55mm。5. 7 定性滤纸，快速。6 抽样6. 1 烟叶按YC/T5抽取烟叶作为实验室样品。6.2 卷烟按GB/T5606.1抽取卷烟作为实验室样品。7 分析步骤7. 1 试样的制备按YC/T31制备试样。7.2 测定次数每个试样应平行测定两次。7.3 水分含量的测定按YC/T31测定试样的水分含量。7. 4 总植物碱的测定7.4. 1 蒸锢称取Ig试料于50臼nL蒸馆瓶中，加人20g氯化销和2g氢氧化饷口，用30mL水
7、将试料冲下，立即将蒸馆瓶连接于水蒸气蒸馆装置(5.1) ，进行蒸馈，用内含10mL硫酸榕液(4)的250mL容量瓶作接收器，冷凝管末端应浸人硫酸液中。蒸馈过程中蒸馆瓶内的液体体权应保持恒定，必要时可适当加热。收集220230mL馆出液，取下容量瓶，同时用水冲洗冷凝管末端。确认容量瓶处于室泪，用水定容至刻度，摇匀。若馆出液不澄清，则将其过滤。注s若需要过滤，要么将前150mL滤液弃去，要么滤纸在使用自自用足量水冲洗并干燥.7.4.2 馆出液中总植物碱的测定移取一定体积通常为10mL)的馆出液于50mL，容量瓶中，用硫酸榕液(4.5)定容至刻度。以硫酸溶液(4.5)为参比，用光谱仪测定溶液在236
8、nm、259nm和282nm处的吸光度。着259nm处的吸光度超过O.7，应取较小体积的馆出液重新稀释测定。8 结果的计算与襄述8. 1 计算总植物碱的质量百分含量，按式(1)进行计算1. 059X (A,-O. 5 X (A,+A,)J X 250XF N= 100. .( 1 ) mX34. 3X (1-W) Xl 000 式中，N 总植物碱的质量百分含量，.%; F 稀释倍数;果用说明.lJ ISO 2881，1992规定加入20-40g氯化销和5mL，8mol/L氢氧化销溶液。448 YC/T 34-1996 A236、AZ59、AZ82在236nm、259nm和282nm处吸光度的实
9、测值$1. 059X CA,-O. 5X (A，+A，)J-259nm处的校正吸光度;m 试料的质量，gI W一一试样的水分含量，%。8. 2 结果的表述以两次平行测定的平均值作为测定结果，精确至0.01%。9精密度两次平行测定结果之差不应大于0.05%。449 YC/T 34-1996 附录A(标准的附录烟耐和烟破盐纯度的测定硅鸽酸噩噩法本附录等效采用CORESTA推荐方法39。AQ CORESTA引言自从1920年以来，已经提出了几种制作标准曲线用烟碱的纯度测定方法。当时，苦味酸重量法被认为是最专一性的方法，硅鸽酸法最为灵敏，但实际上这两种方法都不是完全专一的。60年代以来，使用最为广泛的
10、方法是紫外光度法和硅鸽酸法。80年代后期，英国的研究工作表明，谱带宽度大于2nm的光谱仪不适合烟碱纯度的测定。他们还发现，使用Will山校正系数(见注1)时，谱带宽度小于2nm的光谱仪测得的烟碱含量小于实际值。而且，在进行实验室认证的国家，认证审查人员通常规定基准物质应是可追溯的。这样，只有重量法可以符合认证要求。下述方法报告了英国对美国公职分析化学家协会(AOAC)方法(第十四版.1984年)中硅鸽酸重量法测定烟碱的方法改进结果。注1:Willits.c.o等.Anal.Chem. .22. 430( 950) CORESTA19921993年在19个实验室对这个改进方法进行了研究。结果表明
11、，改进方法对烟碱、酒石酸氢烟碱和水杨酸烟碱的测定结果非常致。即使如此，对这个方法的专一性仍存有疑问，特别是有资料认为其他植物碱和烟碱的降解产物干扰测定。1993年.CORESTA研究了各种贮存条件对烟碱(色谱质量纯高于99%)降解的影响，以及降解产物对硅鸽酸法、气相色谱法和紫外光度法测定烟碱的影响。研究结果表明z高纯度烟碱降解缓慢。例如，将烟碱(色谱质量纯高于99%)暴露于冰箱的空气中贮存18个月，纯度降为97%，在室温下暴露于光和空气中三个月纯度的降低程度与此相同。水是贮存过程中的主要污染物，其含量大约为1%。从理论上讲，测定这种污染物是比较容易的。-一气相色谱/质谱测定表明纯烟碱贮存过程中
12、的主要降解产物是可提因和麦斯明，实验中测到的最大值为1%。上述两种降解产物都不同程度地影响除气相色谱/质谱法以外的所有三种纯度测定方法的测定结果，对硅鸽酸法和紫外光度法来讲，这种影响相同，且比较小。一一实际上，在校正了水分之后，硅鸽酸法与气相色谱/质谱法的测定结果相同，也就是说，对纯度高于96%的烟碱，可得到最佳测定值。另一方面，紫外光度法的测定结果与最佳测定值相同或稍低，这个研究结果支持了英国的研究发现。CORESTA关于硅酸法的研究表明，最切实可行和妥当的测定纯度高于96%烟碱的方法是硅鸽酸法，在这个纯度下，降解产物的干扰可以忽略不计。CORESTA1992年进行的初步研究显示，虽然用硅鸽
13、酸法测定烟碱的精度高，但些样品的实现l纯度超过100%，用气相色谱法和紫外光度法所作的进一步分析证实，这些样品的烟碱确实超过100%纯度的化合物所含的烟碱。CORESTA的资料表明这些盐是被未反应的烟碱所污染。因此，对于烟碱盐，硅鸽酸法测定的是烟碱含量而非烟碱盐的纯度。由于烟碱盐化学性质稳定，贮存对于未反应成盐的烟碱的影响与纯烟碱相比就显得微不足道.因此，硅鸽酸法适用于烟碱盐中烟碱的测定。450 YC/T 34-1996 A1 原理烟碱与十二鸽硅酸(硅销酸)络合形成不溶性的烟碱硅鸽酸盐，将沉淀过滤于烧结玻璃增塌中测定出沉淀的质量。A2 试料A2.1 十二鸽硅酸溶液CSiO， 12W03 26H
14、,O) 将12g十二鸽硅酸溶于100mL蒸馆水中。注2，应避免使用其他形式的硅鸽酸，如4HzO S02 . lOW03 3HzO或4HzO Si02 12W03 ZOH20.因:fJ们与烟碱不形成晶形沉淀。A2.2 盐酸溶液，20%CV /V) 将20mL盐酸密度1.18)用蒸馆水稀释至100mL，A2.3 盐酸溶液.0.1%CV!V)将5mL20%盐酸CA2.2)用蒸偏水稀释至lL。A2.4 烟碱溶液CC10H14N，)将烟碱用蒸馆水稀释，制备25mLO.lmg烟碱/mL溶液。A3 仪器设备A3. 1 实验室常用设备。A3. 2 烘箱，可保持(120土5)C温度。A3.3 烧结玻璃地桶.G2
15、型。A4 分析步骤白A4.1 于5个250mL烧杯中各称取约。.lg烟碱(或相当烟碱量的烟碱盐).精确至O.OOOlg.每个烧杯各配一根玻棒。A4.2 向每个烧杯中各加入100mL蒸馆水.2mL20%盐酸CA2.幻，搅拌均匀。不要拿掉玻棒。A4.3 缓慢加入15mL硅鸽酸榕液CA2.1).边加边持续搅拌。不要拿掉玻棒，盖上表面皿，放置过夜。过滤之前，用玻棒搅拌以确认沉淀能迅速沉降且呈晶形。加几滴硅鸽酸溶液CA2.1)检查，应沉淀完全。A4. 4 沉淀过滤A4. 4. 1 在120C烘箱(A3.2)中烘干烧结玻璃捕揭直至恒重(土1mg)，取出放人硅胶干燥器中.冷却至室温。A4. 4. 2 称取烧
16、结玻璃站捐质量，精确至O.000 19。将烧结玻璃增蝙置于抽滤装置上，抽滤沉淀，用。.2%盐酸榕液CA2.3)洗涤烧杯3次，每次15mL.将烧杯中和玻捧上的沉淀全部洗人烧结玻璃甜锅中，弃去滤液。A4. 4. 3 继续用0.1%盐酸冲洗沉淀(约需400mL)。收集滤液，加入几滴烟碱榕液CA2.4)检查，应无乳白色混浊产生，即鸽硅酸已被洗涤干净。A4. 4. 4 将烧结玻璃地桐放入烘箱(A3.2)中，烘干拙，取出放入硅胶干燥器中冷却至室温，称重，精确至O.OOOlg，将烧结玻璃:lIt揭重新放人烘箱，烘于lh.取出，放人硅跤于燥器中冷却至室温，重新称重。重复操作直至恒重(士1mg)。果用说明:IJ本章中所有滤纸操作的仪器设备均被删除。2J本章中滤纸过滤沉淀的操作均被删除.451 A5 计算由式(A1)计算烟碱纯度2式中:P一一沉淀的质量，mg;m 试料质量，mgoYC/T 34-1996 O.1012P 纯度(%)=一一一X100. . . . . . . (A1 ) m 结果为5次测定的平均值，精确至0.1%。452
