1、ICS 67. 180. 10 X 31 f占2一.I . G/T 18932.6 2002 Method for the determination of glycerol contents in honey一UV spectrophotometric method 2002-12-30发布中华人民共和回国家质量监督检验检疫总局2003-06-01实发布一、中华人民共和国家标准蜂蜜中甘油含量的测定方法紫外分光光度法GH ,T 18932. (1 -2002 4险牛目标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码，100045电话，6852394668517548 叶1因标准出版社事皇岛印
2、刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售峰开丰880x 1230 ,16 印!*1/2 字数9千字2003年3月第版2003年3月第一次印刷印数1-400 书号:15506日.1-19298网址版权专有侵权必究举报电话:(0 1 0) 68533533 二一一二一G/T 18932.6-2002 前古同GB/T 18932-2002分为12个部分，本部分为第6部分.GB/T 18932的本部分等同采用德国罗氏公司食品中甘泊含量的测定方法一一紫外分光光度法机考虑到我国标准本身的特点及汉语的表达习惯，为使该标准既与国际标准接轨，又适合我国的国惰，为此，直机食品中甘汹含量的测定方法紫外分光光度
3、法的个别内容作了编辑性修改.本部分遵循GB/T1. 1-2000(标准化工作导则第1部分标准的结构和编写规则和GB/T2000 1. 4-2001(标准编写规则第4部分z化学分析方法的编写规则。本部分的附录A为资料性附录.本部分由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出.本部分由中华全国供销合作总社归口.本部分起草单位2中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局.本部分参加起草单位=国家蜂产品质量监督检验中心.本部分主要起草人g庞国芳、李学民、曹彦忠、范春林、张进杰、林忠、李子健.本部分系首次发布的国家标准.I 止一一一一-一一一2 范回蜂蜜中甘油含量的测定方法紫外分光光度法GB/T 18932的
4、本部分规定了蜂蜜中甘泊含量紫外分光光度测定方法.本部分适用于蜂蜜中甘泊含量的测定.本部分甘泊的方法检出限为20mg/kg. 规范性引用文件一一一一一一G/T 18932.6-2002 下列文件中的条款通过GB/T18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分.GB/T 6379-1986 (neq ISO 5725: 198 1) 测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性GB/
5、T 6682一1992分析实验室用水规格和试验方法(neqISO 3696: 1987) 3 原理甘泊在甘油激酶催化作用下，与腺背5-三磷股盐反应生成L甘泊3磷酸盐和腺背-5-二磷酸盐。而生成的腺背5二磷酸盐在丙回酸盐激韵的存在下，又与磷酸始m丙阴酸盐反应.再转化成腺1J-5-三磷酸盐和丙阴酸盐。丙阴股盐在L乳酸盐脱氢酶的作用下，被烟耽胶腺瞟岭二核背酸还原为L乳酸盐.通过在340nm测定烟Itt胶腮睬岭二核背酸消耗量，计算出甘泊含量.4 试剂和材料4. 1 活液-I:2.0g辅E导和甘氨酸缓冲溶液的混合物，pH=7.4.其中缓冲洛液中含有烟殷殷腺睬怜二核背酸，7mg;腺昔-5-三磷酸盐，22m
6、g;磷酸烯m丙酬酸盐，11mg;硫股枝s稳定剂。贮存在4C冰箱里.使用前在室温下放fL1 h，加入11mL水，使之完全溶解，摇匀.4.2 溶液-1I: O. 4 mL的悬浊液.含有丙阴酸盐激酶，240U;L乳胶盐脱氢酶，220U.贮存在4C冰箱里。使用前在室温下放置1h. 4.3 湾液-III :甘泊激酶悬浊液，34U。贮存在4C冰箱里。使用前在室温下放置1h. 4.4 甘泊标准溶液:394mg/L。贮存在4C冰箱里。使用前在室温下放置1h.仅作为测定质量监控用，测定值与给定值允许差为5%。4.5 水为GB/T6682-1992规定的二级水。5 5. 1 5.2 仪器紫外分光光度计。比色皿zl
7、 cm光路E一-GIl!T 18932.6-2002 5.3 天平:!Bftl:0.1 mgo 5. 4 i的时注目t?&:100L 6 试样串1备与保存6. 1 试样的串1备对元约JJl的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结品的样品，在密闭衍况下，置于不超过60C的水浴中J414.振荡，仿样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。分出0.5kg作为试样.制备好的试样置于样dhmt中.?f;衬.并标明标记。6.2 试样的保存将试样于常jltl.下保存。7 分析步骤7. 1 试样测定液的串1备利、以1g试样.柏确到1mg，fi:于100mL三角瓶中，加水(4.5)使试样完全溶解.定容至20mL。7. 2
8、il!定7. 2. 1 号外分光光度计il!定条件a) 波长:340nm, b) 温度$20C25C;c) 参比物z空气$d)光i1!:1灯.7.2.2 紫外分光光度法测定取三个比色皿，分别用于空臼溶液、试样测定液和标准溶液的测定.a) 对盛空白溶液、试样测定液和标准溶液的比色皿中分别加入1mL 溶液-1(4.1)，b) 对i空白溶液的比色皿中加入2mL水p对应试样测定液的比色皿中加入2mL试样测定液(7.1)，对盛标准溶液的比色皿中加入0.10mL标准溶液(4.4)和1.9 mL水pc) 对盛空白活;在、试样测定液和标准溶液的比色皿中分别加入0.010mL溶液-11(4.2)，d) 将比色皿
9、内溶液充分混合，待反应10min后，用紫外分光光度计在340nm的波长处连续测定空白i古液、试样测定液和标准EFi夜的吸光度各10次，分IJ计算各自吸光度的平均值A，, e) 对i空白溶液、试样测定液和标准溶液的比色皿中分别加人0.010mL溶液-III(4.3)，f) 仅H丁步骤同d).分别计算各自吸光度的平均值A川日)才二方法的添加回收率数据参见附录A.7.3 平行试验按七述步骤.对同一试样进行平行试验测定。8 结果计算拟扑;上面的测定.分别求出空白溶液和试样测定液两次测定吸光度的差值(A，-A2).用试样测定ifE 眼光度的差的减去空白i在液吸光度的差值，求出M.即:.:lA = (A，
10、-A.)仰品一(A，-A，)空白( 1 ) 野蛮小廿泊的台是按式(2)计算C = 440 X .:14. ( 2 ) 主trt C 试H中甘i由含EL.单位为毫克每千克(mg/kg)，且IlJ式(1)计算术liiz ，、G/T 18932.6-2002 440一由甘泊相关的物理常数计算得出。9 精密度GI3/T 18932的本部分精密度数据是按照GI3/T6379-1986的规定，通过15个实验室对四个添加水平的试样所做的试验中确定的。获得重复性和再现性的值是以95%的可信度来计算。9. 1 重复性在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(吵，本部分的重复性限按方程式(3
11、)计算2蜂蜜中甘泊的含量在20mg/kg-394 mg/kg范围219r = 1. 140 1 19m一1.594 9 式中3m一一两次测定值的平均值，单位为毫克每千克(mg/kg) 如果两次测定值的差值超过重复性限，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定-9.2 再现性.( 3 ) 在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R)，本部分再现性限按方程式(4)计算2蜂蜜中甘泊的含量在20mg/kg-394 mg/kg范固zIgR = 1. 052 9 19m一1.213 8 ( 4 ) 式中2m一一两次测定值的平均值，单位为毫克每千克(mg/kg)。NOON-N的白-附录(资料性附录)回收率A GII!T 18932.6-2002 H筒。侵权必究书号，155066H9298 版权专有本方法中甘i由添加浓度及回收率的试验数据在添加最为20mg怅日时，平均回收率为97.2%;在iF力uil为100mg/kg时，平均回收率为97.8%; 在添加量为200mg/kg时，平均回收率为97，9 % ; 在添加量为394mg/kg时.平均回收率为98.3%。飞.
