1、ICS 65160X 87 a圄中华人民共和国国家标准GBT 23228-2008卷烟 主流烟气总粒相物中烟草特有-亚硝胺的测定气相色谱一热能分析联用法Cigarette-Determination of tobacco specific N-Nitrosaminesin total particulate matter of mainstream cigarette smokeGCTEA method200812-31发布 2009060 1实施宰瞀黜鬻瓣警糌赞星发布中国国家标准化管理委员会捉1”刮 菁本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术
2、委员会(SACTC 144)归口。本标准起草单位：中国烟草总公司郑州烟草研究院、上海烟草(集团)公司。本标准主要起草人：谢复炜、金永明、赵明月、王异、刘克建、吴鸣。GBT 23228-2008卷烟 主流烟气总粒相物中烟草特有N_亚硝胺的测定气相色谱一热能分析联用法1范围本标准规定了卷烟主流烟气总粒相物中N一亚硝基降烟碱(NNN)、N一亚硝基新烟碱(NAT)、N-,亚硝基假木贼碱(NAB)和4-(甲基亚硝胺基)一1一(3一吡啶基)一卜丁酮(NNK)四种烟草特有亚硝胺的测定方法。本标准适用于卷烟烟气总粒相物中以上四种烟草特有亚硝胺的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准
3、的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最瓤版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 56061卷烟第1部分：抽样GBT 19609卷烟用常规分析用吸烟机测定总粒相物和焦油(GBT 19609-2004，ISO 4387：2000MOD)3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。31烟草特有亚硝胺tobacco specific nitrosamines(1sNAs)仅在烟草及烟草铷品中存在的N一亚硝胺。4原理用玻璃纤维滤片捕集卷烟主流烟气中的总粒相物，用二氯甲烷萃
4、取粒相物中的TSNAs，浓缩萃取物并采用碱性氧化铝层析柱进行纯化。通过气相色谱一热能分析联用仪(GC TEA)检测萃取物中亚硝胺的浓度，对主流烟气总粒相物中TSNAs进行定量分析。5试剂与材料除特别要求以外，均应使用分析纯级试剂。水应为蒸馏水或同等纯度的水。51二氯甲烷，色谱纯(或分析纯经重蒸后使用)。52 甲醇，色谱纯(或分析纯经重蒸后使用)。53无水硫酸钠。54碱性氧化铝，200目300目。55_戊基一(3一甲基吡啶基)亚硝胺、NNN、NAT、NAB、NNK，纯度应大于97。56内标溶液561内标储备液准确称量10 mg N一戊基一(3一甲基吡啶基)亚硝胺，加入约50 mL二氯甲烷(51)
5、完全溶解后，转移1GBT 23228-2008至100 mL的棕色容量瓶中，用二氯甲烷(51)定容至刻度。该内标储备液在一20冰箱内存放，有效期为6个月。562一级内标溶液准确移取2 mL内标储备液(561)至50 mL棕色容量瓶中，用二氯甲烷(51)定容至刻度。该一级内标溶液在-20冰箱内存放，有效期为6个月。563二级内标溶液准确移取i0 mL一级内标溶液(562)至100 mL棕色容量瓶中，用二氯甲烷(51)定容至刻度。该二级内标溶液在一20冰箱内存放，有效期为3个月。57 TSNAs标准溶液571标准储备液分别准确称量10 mg NNN、NAT、NAB和NNK，加入约5 mL二氯甲烷(
6、51)完全溶解后，转移至10 mL的棕色容量瓶中，用二氯甲烷(51)定容至刻度。该标准储备液在一20冰箱内存放，有效期为6个月。572一级标准溶液准确移取1mL标准储备液(571)至100 mL棕色容量瓶中，用二氯甲烷(51)定容至刻度。该一级标准溶液在一20冰箱内存放，有效期为6个月。573二级标准溶液准确移取1 mL一级标准溶液(572)至10 mL棕色容量瓶中，用二氯甲烷(51)定容至刻度。该二级标准溶液在20冰箱内存放，有效期为3个月。58 TSNAs校准溶液：分别准确移取05mL、1mL、2mL、5mL二级标准溶液(573)和1mL、2mL一级标准溶液(572)至10mL棕色容量瓶中
7、，准确加入1mL一级内标溶液(562)，最后用二氯甲烷(51)定容至刻度，此六个标准溶液为系列标准校准溶液。该TSNAs校准溶液应在使用前配制。注：烟草特有亚硝胺是强烈致癌物质。所有前处理操作应在通风橱内进行，实验人员应佩带防护手套、面具以保证安全。实验废液收集后应统一处理。6仪器设备常用实验仪器以及下述各项。61分析天平，精确至01 mg。62气相色谱一热能分析联用仪。63超声波发生器。64旋转蒸发仪。65色谱柱，弹性毛细管柱30 nl053 mm1 pm，建议固定液：HP一50+。66保护柱，弹性石英毛细管柱1 mX053 mm，应经脱活处理。67玻璃层析柱，具塞，内径为20 mm，长度为
8、300 mm。7抽样按照GBT 56061的规定抽取实验室样品。8分析步骤81卷烟的抽吸按照GBT 19609的规定收集20支卷烟的粒相物。82测定次数每个样品应平行测定两次。2GBT 23228-200883样品分析831样品萃取将捕集有主流烟气粒相物的滤片放人250 mL锥形瓶中，置于超声波发生器(63)内，用二氯甲烷(51)分三次超声波萃取，每次10 rain，第一次使用100 mL二氯甲烷，其余两次各使用80 mL二氯甲烷。将所有萃取液经无水硫酸钠(53)过滤，转移至500 mL磨口圆底烧瓶中。832萃取液浓缩将盛有萃取液的圆底烧瓶连接旋转蒸发仪(64)，通高纯氮气旋转蒸发(40水浴)
9、，浓缩至5 mL。833样品净化8331层析柱的准备碱性氧化铝(54)在1lo下活化2 h。玻璃层析柱(67)应保持洁净干燥，先加入30mL二氯甲烷(51)，再用湿法将15 g碱性氧化铝(54)tl到层析柱中，充分搅拌并赶走所有气泡。用50 mL二氯甲烷淋洗层析柱。乳3，32层析将浓缩后样品(832)一次性加入按照8331准备的层析柱中，并用二氯甲烷(51)分三次洗涤烧瓶壁，每次5 mL。用30 mL二氯甲烷淋洗层析柱，流速应控制在约2 mLmin，不收集洗脱液。用100 mL 8甲醇一二氯甲烷(体积分数)溶渡淋洗层析柱，收集此部分洗脱液。834洗脱液浓缩在洗脱液中加入1 mL二级内标溶液(5
10、63)后，通高纯氮气浓缩至30 mL，转移至50 mL梨形烧瓶中，浓缩至约1 mL后，移至2 mL色谱分析瓶中待分析。84分析按照制造商操作手册运行气相色谱一热能分析联用仪。以下分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性。程序升温：初始温度150，保持2 min；以3min速率升至230，20rain速率升至260，保持20 rain；进样口温度：230；载气：氦气，恒流10 mLmin；进样量2 pL，不分流，不分流时间1 rain，吹扫流量50 mLmin；一热裂解温度：550；一一接口温度：250。典型卷烟样品色谱图参见图A1。85测定用气相色谱一热能分析联用仪测定一系列TSNAs校准
11、溶液(58)，用TSNAs与内标峰面积的比值作为纵坐标，TSNAs的浓度作为横坐标，分别建立四种TSNAs成分的校正曲线。对校正数据进行线性回归，R2应不小于099。测定样品，根据样品中的峰面积计算每一个卷烟烟气样品中四种TSNAs的浓度(ngmL)。9结果的计算与表述由式(1)计算出样品主流烟气中四种TSNAs的传输量，以每支卷烟主流烟气TSNAs传输量来表示，单位为ng。取两个平行测定的算术平均值作为样品的测试结果，结果精确到o01 ng。X一cV (1)n式中：x每支卷烟主流烟气TSNAs的传输量，单位为纳克每支(ng支)；3GBT 23228-2008c浓缩液中TSNAs的浓度，单位为
12、纳克每毫升(ngmL)V浓缩液的体积，单位为毫升(mL)；n烟支数量，单位为支。10精密度、回收率和检出限本方法的精密度、回收率和检出限试验研究结果参见表B1。11检验报告检验报告应包括以下内容：检验环境大气条件；卷烟的名称、规格、类型、盒标焦油量、盒标烟气烟碱量；检验结果；卷烟总粒相物产生量；总粒相物中烟碱含量(或烟气烟碱量)；总粒相物中水分含量；一一焦油量；一抽吸口数。GBT 23228-2008附录A(资料性附录)色谱图示例按照本标准规定的方法对典型卷烟样品进行分析，得到的气相色谱一质谱联用图见图A1。40 00030 000图A1典型卷烟样品色谱图GBT 23228-2008附录B(资料性附录)精密度、回收率和检出隈试验研究结果本方法的精密度、回收率和检出限试验研究结果见表B1。表B1本方法的精密度、回收率和检出限试验研究结果(n=5)TSNAs NNN NAT NAB NNK混合型卷烟测定变异系数蹦 59 47 53 5 2烤烟型卷烟测定变异系数 6 9 5 3 9 9 6 2回收率 94 3 923 942 959检测限(rig支) 070 024 079 0426
