1、B 42、性，甲刊DB13LrUJ.刁DB13/T 721-2005羊冻精制作技术规程2005-09-20发布2005-09-20实施河北省质量技术监督局发布DB13/T 721 2005月q青本标准附录A为规范性附录。本标准由河北省畜牧局提出。本标准由承德市畜牧研究所起草。本标准起草人:赵国军、郭建军、邱殿锐、宋树森、张会文、金晓东、杨秀敏、王青妹。DB13厅721 2005羊冻精制作技术规程法、范围本标准规定了羊冻精生产过程中冷冻精液(以下简称冻精)的规格与质量、制作程序、精子检查方冻精的包装、标记、贮存。本标准适用于羊的冻精生产和贮存。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为
2、本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 4143牛冷冻精液3术语与定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1精子密度每毫升精液中的精子数。3. 2精子活力37环境下直线前进运动精子占精子总数的百分比。3. 3精子顶体完整率顶体完整精子占精子总数的百分比。3. 4精子崎形率畸形精子占精子总数的百分比。3. 5精子存活率在37环境下保存4h时直线前进运动精子占精子总数的百分比。3. 8细菌数一剂量冻精解冻后经培养出现
3、的细菌菌落数。4器材设备4. 1仪器设备显微镜、千分之一感量天平、精子密度测定仪、恒温箱、干燥箱、冰箱、水浴锅、冷冻槽、蒸馏水发生器等。4. 2主要器材采精筒、内胎、集精杯、玻璃棒、烧杯、100 mL容量瓶、量筒、温度计、纱布或专用滤纸。4.3药物试荆乳糖、果糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、卵黄、甘油、双蒸馏水、无水乙醇、中性凡士林。5规格与质t5. 1荆型DB13/T 721-2005为细管剂型。5. 2剂量每管0.25 mL a5. 3质量指标5. 3. 1解冻后精子活力不低于03505. 3. 2每剂量解冻后呈直线前进运动的精子数不低于3 000万个。5. 3. 3解冻后的精子畸形率不超过
4、20%05. 3. 4解冻后的精子顶体完整率不低于40%05. 3. 5解冻后的精液无病原性微生物，每毫升中细菌菌落数不超过1 000个。5. 3. 6在5 C 8贮存时解冻后存活时间不少于12h，在37时不少于4 ho6制作程序6. 1种公羊选择用于生产冻精的种公羊，其体型外貌和生产性能，均应符合本品种的种用公羊特等、一等标准。种公羊必须经过县以上畜牧行政主管部门鉴定。6.2精液采集6. 2. 1采精月龄初次采精月龄一般为8月龄。8. 2. 2采精次数成年种公羊每周可采精2-3次;每次连续排精两回。8. 2. 3采精过程按附录A的方法进行操作。8. 2. 4合格新鲜精液质最标准精液呈乳白色稍
5、带黄色;精子活力不低于0.60:每毫升精子密度不低于15亿;精子畸形率不高于15%p8. 3精液的稀释8. 3. 1稀释保护剂的配制a)称取柠檬酸钠2.97 g，放入100 mL双蒸馏水中过滤，再加入搅碎卵黄10 mL混合均匀。b)量取a液41. 75 mL，加入果糖2. 5 g，甘油7 mL，加青霉素50 000 IU，链霉素50 000 IU,混合均匀。稀释保护剂要现配现用。8. 3. 2稀释比例根据鲜精液的密度和活力确定相应的稀释比例。8. 3降温和平衡稀释后的精液，采用逐渐降温法。在1 h-1.5 h内，使稀释精液的温度降到4 C -5后，并在4C冰箱内平衡2 h4 ho6. 4冷冻精
6、液制作6. 4. 1制备冻精的操作室符合GB 4143的要求。6.4.2冻精的器具符合GB 4143的要求。6.4.3制作过程参照GB 4143的方法进行.7质量检查方法7. 1精子活力检查按照GII 4143附录B. 3的方法进行。7. 2精子密度检查按照GB 4143附录B. 4的方法进行。7.3精子崎形率检查按照GB 4143附录B. 5的方法进行。7. 4冻精中细菌数的检查2DB 13/T 721-2005按照GB 4143附录B. 5的方法进行。7. 5解冻后精子存活时间检查细管解冻后，在5C -8或37下贮存，在38C 40下镜检。8包装、标记、贮存和运翰S. 1包装用无菌纱布袋包
7、装，每袋包装量不超过100支。8. 2标记包装袋外面，均应有明显的标记。注明生产单位、公羊品种、公羊号、生产日期或批号、数量、精子活力。8.3贮存8. 3. 1用液氮生物容器贮存，容器内液氮必须浸没冻精。8.3.2应经常检查液氮生物容器的状况，如发现容器异常，立即将冻精转移到其他完好的容器内。8. 3. 3取放冻精之后，应及时盖好容器塞，防止液氮蒸发或异物浸入。8.3.4大型液氮生物容器，应有冻精分类存放位置的详细图表，分别注册，登记清楚，并应备有足够的液氮生物容器，严防不同品种和不同个体的冻精混淆。无继续贮存价值的冻精，妥善销毁。DB13/T 721-2005附录A(规范性附录)种公羊采精过
8、程A. 1台羊选择选择发情好的健康母羊作台羊，后躯应擦干净，头部固定在采精架上。训练好的公羊，还可用公羊作台羊、假台羊等都能采出精液来。A. 2假阴道的准备将消毒过的的内胎，用生理盐水棉球或稀释液棉球从里到外的擦试，在假阴道一端扣上集精瓶(当室温低于25时，集精瓶夹层内要注入30 C -35的温水)。在外壳中部生水孔注入150毫升左右的SOCrSSC温水，拧上气卡塞，套上双连球打气，使假阴道的采精口形成三角形。最后把温度计插入假阴道内测温，温度在39 C -42为宜。在假阴道内胎的前1/3，涂抹稀释液或生理盐水作润滑剂。A. 3采精操作采精前，将包皮周围擦干净。采精员蹲在台羊右侧后方，右手握假阴道，气卡塞向下，靠在台羊臀部，假阴道和地面呈35。角。当公羊爬跨伸出阴茎时，左手轻托阴茎包皮，迅速地将阴茎导入假阴道内，当公羊完成抬头、挺腰、前冲动作时，表示射精完毕。随着公羊从台羊身上滑下时，将假阴道取下，立即使集精瓶的一端向下坚立，打开气卡塞，放气卡取下集精瓶，送操作室检查。900闪。L闪卜1的一H自
