1、 B 46 河北省地方标准DB13/T 8122006大豆及其制品蛋白质溶解度的测定 2006-11-11 发布 2006-11-20 实施DB13河北省质量技术监督局 发布DB13/T 8122006 I前 言 本标准由河北省畜牧兽医局提出。 本标准起草单位：河北农业大学、河北省饲料工业办公室、河北省饲料产品质量监督检验站。 本标准主要起草人：赵国先、王铃、师校军、米振杰、武英利、黄仁录、李艳琴。DB13/T 8122006 1大豆及其制品蛋白质溶解度的测定 1 范围 本标准规定了大豆及其制品中蛋白质溶解度测定的原理、试剂、仪器设备和测定方法。 本标准适用于饲料检测单位、饲料企业、养殖场（户
2、）、大中专院校对大豆及其制品加工质量的检测和监控。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6012002 化学试剂 标准滴定溶液的制备 GB/T 64321994 饲料粗蛋白测定方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 蛋白质溶解度 在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白质质量占试样中总蛋白质量的百分数。通常采用氮溶解指数（NSI ）和蛋白质分
3、散指数（PDI ）来表示。 4 原理 用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可溶性蛋白质，在催化剂作用下用浓硫酸将提取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用盐酸滴定测出试样中可溶性蛋白质含量；同时，测定原始试样中粗蛋白质含量，计算出试样的蛋白溶解度。 5 试剂 a） 氢氧化钾（分析纯） ，无水硫酸钾、五水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲酚绿、硫酸铵； b） 浓硫酸、盐酸（分析纯）、95% 乙醇、蒸馏水。 6 仪器和设备 a) 感量为 0.0001 g 分析天平； b) 磁力搅拌器； c) 离心机； d) 样品粉碎机； e) 60 目分析筛； f) 电炉
4、； g) 100 ml 或250 ml 凯氏烧瓶； h) 凯氏蒸馏装置； i) 250 ml 锥形瓶； j) 1 000 ml 容量瓶； k) 微量滴定管。 7 分析步骤 7.1 试剂 7.1.1 0.042 mol/L 氢氧化钾溶液 称取 2.360 g 氢氧化钾，加水溶解后，转移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度。 7.1.2 混合催化剂 称取 6 g 硫酸钾和 0.4 g 硫酸铜，磨碎混匀。 DB13/T 8122006 27.1.3 氢氧化钠溶液 称取 400 g 氢氧化钠，加水溶解后，转移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度。 7.1.4 硼酸溶液 称取 20
5、g 硼酸，加水溶解后，转移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度。 7.1.5 0.1 mol/L 盐酸标准溶液 量取 8.3 ml 浓盐酸，注入 1 000 ml 水中混匀，按 GB/T 601-2002 要求进行标定即可。 7.1.6 混合指示剂 称取 1 g 甲基红和 5 g 溴甲酚绿，加入乙醇溶解后，转移至 1 000 ml 容量瓶中，用乙醇定容至刻度。 7.2 样品制备 取具有代表性的试样用四分法缩减至 200 g，粉碎至 60 目，装入密封容器中。 7.3 操作步骤 7.3.1 试样处理 称取试样 1.5 g（准确至 0.0002 g）置于 250 m 烧杯中，准确移入 0
6、.042 M 氢氧化钾溶液 75 m，磁力搅拌 20 min，然后将试样转移至离心管中，以 2700 r/min 的速度离心 10 min。 7.3.2 测定 吸取上清液 15 ml, 放入消化管中, 按照 GB/T 6432-1994 凯氏定氮法测定试样中可溶性蛋白质的含量。同时，按照 GB/T 6432-1994 凯氏定氮法测定试样中粗蛋白质的含量。 7.3.3 分析结果 计算 试样中蛋白质溶解度按照（1 ）式进行计算： 100MP(%)p =（1 ） 式中： p试样中蛋白质溶解度，% ； P试样中可溶性蛋白质的含量； M试样中粗蛋白质的含量。 7.3.4 重复性 7.3.4.1 每个样品应取 2 份平行样进行测定，以其算术平均值为分析结果。 7.3.4.2 测定允许相对偏差不大于 1%。 7.4 注意事项 7.4.1 不同样品的粒度应相同。 7.4.2 不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应一致。
