1、ICS 65.020.40 B 61 DB13 河北省 地方标准 DB 13/T 2724 2018 有髯鸢尾工厂化育苗生产技术规程 2018 - 04 - 09 发布 2018 - 05 - 09 实施 河北省质量技术监督局 发布 DB13/T 2724 2018 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河北省林业厅提出。 本标准起草单位：河北省林业科学研究院。 本标准主要起草人：尹新彦、储博彦、李金霞、赵玉芬、张全锋、王鑫、张鑫、贾红姗、庞曼、杨小兵、徐立军、张琛、田静、杜娟、杨丽、宋 平。 DB13/T 2724 2018 1 有髯鸢尾工厂化育苗生产技
2、术规程 1 范围 本标准规定了有髯鸢尾 （ Beared Irises） 工厂化育苗生产的术语和定义、一般性要求、种苗组培快繁、组培穴盘苗生产、组培裸根苗生产、苗 木质 量标准，以及包装和运输等技术要求。 本标准适用于有髯鸢尾工厂化育苗生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅 注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 LY/T 2234-2013 林业机械 林业工厂化育苗 育苗穴盘 NY/T 2118-2012 蔬菜育苗基质 NY/T 2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程 NY/T
3、2312-2013 茄果类蔬菜穴盘育苗技术规程 DB13/T 605-2005 花卉组培苗 生产技术规程 DB13/T 1036-2009 德国鸢尾种苗生产技术规程 3 术语和定义 NY/T 2306-2013界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 有髯鸢尾 垂瓣上有髯毛附属物的鸢尾的统称。 3.2 幼嫩花序 花葶抽出后，花蕾长至 1cm 2 cm的花序。 3.3 幼芽 秋天萌生未出土，用于组织培养外植体的 芽。 3.4 组培裸根苗 移栽到种植筐（床）中培育的组培苗。 DB13/T 2724 2018 2 4 一般性要求 4.1 组培工厂的设计要求、所需设备、器材及试剂 4.1.1 工
4、厂设计要求 按照 NY/T 2306-2013 中 4执行。 4.1.2 所需设备 除 NY/T 2306-2013附录 B的要求外，还应增加其他设备，见表 1。 表 1 组培工厂所需增加设备及说明 4.1.3 所需试剂 除 NY/T 2306-2013附录 D的要求外，还应增加多效唑（英文名称： paclobutrazol；分子式 C15H20ClN3O；分子量 293.79；保存方法：室温、阴凉干燥、避免直射光、通风良好）。 4.2 培养容器和接种器械的清洗 按照 NY/T 2306-2013 中 6执行。 4.3 培养基选择与母液配制 4.3.1 培养基选择 以 NY/T 2306-20
5、13附录 F中 MS为基本培养基。 根据有髯鸢尾不同品种和 不同 外植体选择合适的培养基种类和 植物生长调节剂 配比，见附录 A。 4.3.2 基本培养基母液配制和保存 按照 NY/T 2306-2013 附录 G执行。 4.3.3 植物生长调节剂的母液配制和保存 按照 NY/T 2306-2013 附录 H执行。 4.4 培养基制作 4.4.1 配制 根据培养基成分准备好蒸馏水、琼脂、砂糖和各类母液等。制作 1 L培养基加蒸馏水 700 mL（按所需容量的 70 %左右），再加入琼脂 6 g 9 g，加热搅拌使琼脂融化。加砂糖 30 g，糖溶解后，根据 预配母液取量， 添加一定量的 细胞分裂
6、素（ 6-BA） ，并充分搅拌均匀后，加蒸馏水定容至 1 L。用 pH计或仪器设备名称 年生产规模，万株 规格型号 用途说明 50 100 200 自动洗瓶机 1 1 1 滚筒式，适用于 20 mL 1000 mL，每分钟 30 瓶 80 瓶；1.5 KW；耗水量每小时 0.6 t 1 t 清洗培养瓶 培养基自动定量灌装机 1 1 1 50 L， 310 W；不锈钢；装罐量 10 mL 500 mL；工作量：90 mL/瓶， 20次 /min；液体温度 95 培养基配置与灌装 DB13/T 2724 2018 3 pH试纸测 pH值，用 0.1 mol/L的 HCl或 NaOH溶液调节培养基
7、pH值为 5.8 6.0。生产中根据所需容量按比例配置。 4.4.2 分装 用量以不同规格培养瓶不同，以距瓶底厚度 1 cm0.1 cm为宜。分装培养基时勿将培养基沾在培养瓶瓶口。分装完成后，注明培养基编号及配制日期。 4.4.3 高压灭菌 培养基分装后应在 10 h内进行湿热灭菌；灭菌条件一般在 1.1 kg/cm2 1.2 kg/cm2、 121 以 下，灭菌 18 min。 4.4.4 贮存 灭菌后的培养基放至室温后，储存于培养基储藏室内，存储时间不应超过 7 d。 4.5 接种操作 按照 NY/T 2306-2013 中 10执行。 4.6 培养室操作 按照 NY/T 2306-201
8、3 中 11执行。其中培养室温度控制在 18 2 ， 光照强度 20molm-2s-1 100 molm-2s-1， 光照时间每天 10 h 12 h。 5 种苗组培快繁 5.1 种苗组培快繁规模化生产工艺流程图 有髯鸢尾种苗组培快繁规模化生产工艺流程图见附录 B。 5.2 品种选择 选择抗逆性强，观赏价值高，市场流行或具有市场潜力的品种 ，参见附录 C。 5.3 母本材料保存 将通过引进或选育获得的有髯鸢尾母本分品种进行露地栽植。采用 1.5 m 2.0 m宽， 30 cm高的高畦种植，花期前后加强肥水管理。夏季控制水分供应，雨天前后采取措施，预防软腐病。 5.4 外植体采集 、 消毒与接种
9、 5.4.1 外植体采集 在健康的有髯鸢尾植株上，春季选取幼嫩花蕾、幼嫩花序轴上带节点区段，秋季选取幼芽做外植体。幼嫩花蕾、幼嫩花序的采集宜在晴天午后或植物表面露水干后，幼芽采集不受时间限制。 5.4.2 外植体消毒 按照 DB13/T 605-2005 中 6.2.2执行。 5.4.3 外植体接种 DB13/T 2724 2018 4 在超净工作台上用 手术刀和镊子将外植体切割成所需大小。花蕾切去顶部，留花托近 1.0 cm左右，纵切为 2块。幼嫩花序轴上带节点区段要求保留 0.5 cm 1.0 cm；幼芽要求带基部保留 1.0 1.5 cm。将外植体接种到初代培养基上。 1瓶接种 1个外植
10、体。将品种代号、培养基类型、接种人员以及接种日期标示到瓶上。 5.5 初代培养 外植体在初代培养基培养 1周后，外植体基部开始膨大。培养 3周后，形成淡黄（或浅绿）光滑的愈伤组织或不定芽。 5.6 增殖培养 将不定芽不断转接到增殖培养基中进行培养。每 3周继代 1次，初代培养以后的继代次数控制在 10代 15代，增殖系数宜控制在 3 5。 200 mL的培养瓶接种数量为每瓶 5块，排放均匀、整齐。 5.7 生根培养 根据生产需求，当继代培养的组培苗达到一定规模后，剪取或切取生长健壮、叶色正常、叶片舒展、高度 2 cm左右带 3芽 4芽的丛生芽无根苗，无根苗接种在生根培养基上。 200 mL的培
11、养瓶接种数量为每瓶 5丛。培养 15 20 d，幼苗基部长出 3条 5条 2 cm 3 cm的新根时即可进行移栽。 5.8 炼苗 将培养瓶置于有散射光 60 molm-2s-1 100 molm-2s-1的温室中，温度控制在 23 2 ，经过 0 d4 d的封口锻炼后，进入移栽阶段。 5.9 种质资源离体保存 5.9.1 保存材料与保存容器 根据市场需求暂时不进行大规模扩繁的品种，以增殖继代的试管苗为保存材料， 采用规格为直径18 mm 25 mm，高 160 mm 180 mm的试管，用内置硅胶圈的密封塑料盖封口，用标签写明种质编号。 5.9.2 保存条件 将离体保存材料接种于种质保存培养基
12、上，保存温度 （ 5 1 ，光照强度 10 mol m-2s-1 20 mol m-2s-1，光照时间每天 10 h。每管加培养基 15 mL 20 mL。 5.9.3 保存数量 每份种质保存 10管以上，每 管 1个丛芽。 5.9.4 继代周期 每 12个月 15个月继代 1次 。 5.10 种质恢复 根据生产需求，将保存的种质重新接种到继代培养基上。操作同 5.6。 6 组培穴盘苗生产 DB13/T 2724 2018 5 6.1 穴盘选择 育苗穴盘选择型号 2PX-50 PS吹塑穴盘，穴盘长 540 mm、宽 280 mm、高 85 mm。 6.2 穴盘消毒 按照 NY/T 2312-2
13、013中 5.2.3.2执行 。 6.3 基质配置 选择洁净、消过毒的混凝土地面或基质搅拌机，将草炭、珍珠岩、蛭石按 3:1:1均匀混拌，并符合NY/T 2118-2012的要求。 6.4 基质填装 填装方法 按照 NY/T 2312-2013中 5.3.2执行。 填装完毕， 用 80%多菌灵可湿性粉剂 0.5 g/L溶液或0.3 % 0.5 %高锰酸钾溶液喷透后再用清水冲淋 ，控水 备用。 6.5 试管苗处理 用镊子从瓶中轻轻取出生根苗，放在盛有 20 左右的清水中， 用毛刷将附着在根上的培养基刷洗干净 ，注意不能伤根，然后 在 80%多菌灵杀菌剂 0.5 g/L的溶液中浸泡 3 min 5
14、 min。 6.6 移栽 用不锈钢叉或 2 cm宽竹片在填装好基质的穴盘上打长、宽各 2 cm左右，深 3 cm 4 cm的孔，将组培苗的根顺延下去，基质以刚盖过组培苗基部为宜，稍压实，以幼苗不倒即可。移栽后用细喷雾器喷水，使根系和基质紧密接触。 6.7 摆放 穴盘苗分品种、移栽日期，在苗床上整齐摆放。插牌注明品种和日期。 6.8 管理 6.8.1 温湿度、光照、浇水、施肥 按照 NY/T 2306-2013执行。 6.8.2 病虫害防治 参见附录 D。 7 组培裸根苗生产 7.1 栽植设施 栽植设施可用种植筐长 宽 高 （ 50 cm70 cm20 cm）或在温室内做宽 100 cm 120
15、 cm种植池，长度根据实际需要而定。 7.2 基质准备 DB13/T 2724 2018 6 移栽基质可用蛭石或珍珠岩。将基质填 入栽植设施内，厚度 15 cm。用 80 %多菌灵可湿性粉剂 0.5 g/L溶液或 0.3 % 0.5 %高锰酸钾溶液喷透后再用清水冲淋备用。 7.3 试管苗处理 试管苗处理同 7.6。 7.4 移栽 将洗净的组培苗在栽植筐（床）上按条行栽植，株行距均为 5 cm 7 cm。移 栽 方法同 7.7。 7.5 管理 管理同 7.9。 8 苗木质量标准 8.1 组培穴盘苗 8.1.1 株形 植株挺拔。叶基生、剑形，呈扇形排列， 淡绿色、灰绿色或深绿色，常具白粉， 无黄叶
16、现象。 8.1.2 根系 根系嫩白密集，根毛浓密，根系将基质紧紧缠绕，形成完整根坨，能轻易拔出而基质不散。 8.1.3 苗高 苗高 10 cm 15 cm。 8.1.4 叶片数 叶片数 4片以上。 8.1.5 整齐度 同一批次 90 %以上的苗高达到要求的高度。 8.1.6 病虫害状况 无检疫性病虫害。 8.2 组培裸根苗 8.2.1 株形 同 8.1.1。 8.2.2 根系 根系发达，须根较多，长势好。 8.2.3 苗高 DB13/T 2724 2018 7 苗高 15 cm 18 cm。 8.2.4 叶片数 叶片数不少于 3片。 8.2.5 整齐度 同一批次 90 %以上的苗高达到要求的高
17、度。 8.2.6 病虫害状况 无检疫性病虫害。 9 包装和运输 9.1 包装 9.1.1 组培穴盘苗 用定制的瓦楞纸箱或硬塑料箱等包装。将穴盘装在小纸箱内，再将小纸箱装入大纸箱中，每箱装 4张穴盘，高温季节，包装箱内宜加冰袋。 9.1.2 组培裸根苗 将起 出的组培裸根苗按一定的数量打捆（一般每捆 50芽或 100芽），然后装入小塑料盒（袋）中，放在泡沫箱中，箱外再用纸箱包装，每个纸箱中 1000芽。高温季节，包装箱内宜加冰袋。 9.2 标签 每箱应贴上标签，注明品种、类型、数量、产地、出苗日期、目的地、联系人、注意事项等。 9.3 运输 装车时切勿倒置，短途 1 d内到达目的地 ， 宜采用普
18、通厢式货车运输；长途 2 d 5 d内到达目的地 ，宜采用厢式保温车，货厢内适宜温度保持 12 15 ，空气相对湿度保持在 70 %左右。 DB13/T 2724 2018 8 A A 附 录 A （规范性附录） 有髯鸢尾不同品种外植体培养基配方 A.1 有髯鸢尾不同品种外植体培养基配方见表 A.1。 表 A.1 有髯鸢尾不同品种外植体培养基配方 单位： mg L-1 外植体与培养基 适合品种 外植体 花蕾、幼芽、带节点的花序轴区段 所有有髯鸢尾品种 成熟胚 有髯鸢尾成熟的杂交种子 初代培养基 MS 有髯鸢尾成熟的杂交种 胚 MS+6-BA1.0 白与黄、白与蓝 MS+6-BA1.5 常春黄、
19、开拓者、爱抚 MS+6-BA1.0+NAA1.0 常春黄 MS+6-BA1.0+IBA0.5 白花、短梦、法国回声、金娃娃、金皇后、紫花 MS+6-BA1.5+IAA0.2 金娃娃 MS+6-BA2.0+NAA0.1 金娃娃、黑骑士 MS+6-BA3.0+NAA1.0 魂断蓝桥、白与蓝、白天鹅 MS+6-BA3.0+NAA0.5+2-4D0.5 白与黄、黑色旗帜 MS+6-BA3.0+NAA1.0+2-4D0.5 惊险 增殖培养基 MS+6-BA1.0+NAA0.3 白与黄 MS+6-BA1.5+NAA0.5 白天鹅、黑色旗帜 MS+6-BA1.5+IBA0.1 常春黄 MS+6-BA2.0+
20、NAA0.5 魂断蓝桥、白与蓝、惊险 MS+6-BA2.0+IBA0.5 白花、短梦、法国回声、金娃娃、金皇后、紫花 MS+6-BA2.0+IAA0.5 金娃娃 MS+6-BA4.0+NAA0.1 常春黄、开拓者、白与蓝、白与黄 MS+6-BA4.0+NAA0.2 金娃娃 生根培养基 1/2 MS+NAA0.5 白花、短梦、法国回声、金娃娃、金皇后、紫花、白天鹅、黑色旗帜、魂断蓝桥、白与蓝、白天鹅、惊险、白与黄、黑色旗帜 1/2 MS+IBA0.8 常春黄 1/2 MS+6-BA0.2+IAA1.5 金娃娃 MS+NAA0.1 开拓者、白与黄 MS+NAA0.3 爱抚、常春黄、白与蓝 MS+P
21、P3330.5 0.7 适合所有有髯鸢尾品种 种质保存培养基 MS(1/2MS)+ 2% 5%甘露醇 适合所有有髯鸢尾品种 复壮培养基 MS+6-BA0.2+IBA0.4+ PP3332.0 适合所有有髯鸢尾品种 DB13/T 2724 2018 9 B B 附 录 B （规范性附录） 有髯鸢尾种苗组培快繁规模化生产工艺流程 B.1 有髯鸢尾种苗组培快繁规模化生产工艺流程见图 B.1。 图 B.1 有髯鸢尾种苗组培快繁规模化生产工艺流程 有髯鸢尾新品种母本选择与保存 组培无菌系建立 花蕾、幼芽等外植体诱导 不定芽分化培养 丛芽增殖培养 种质保存 丛芽生根诱导 组培苗炼苗 组培裸根苗移栽 组培穴
22、盘苗移栽 移栽后管理 包装运输 培养条件优化 温室培养条件优化 有髯鸢尾工厂化育苗生产技术规程制定 DB13/T 2724 2018 10 C C 附 录 C （资料性附录） 市场流行品种及主要特征 C.1 市场流行品种及主要特征见表 C.1。 表 C.1 市场流行品种及主要特征 中文 品种名 品种名 株形 花期 花色 单枝 花朵数 /个 旗瓣 垂瓣 髯毛 平瓣粉 Iris germanica Pink Horizon 高生 4 5 月 肉粉 肉粉 桔黄 4 紫褐 Iris germanica Zi He 中生 4 5 月 浅蓝紫 深蓝紫 黄 4 樱花园 Iris germanica Cher
23、ry Gardens 矮生 4 5 月 紫红 紫红 深紫堇色 3 血石 Iris germanica Blood stone 矮生 4 5 月 深红 深红 深蓝紫 4 短梦 Iris germanica Little Dream 矮生 4 5 月 堇 堇 蓝 3 音箱 Iris germanica Music Box 矮生 4 5 月 棕黄 棕黄 藕荷 4 黄娃娃 Iris germanica Sun Doll 矮生 4 5 月 黄 黄 上白下黄 4 不朽白 Iris germanica Immortality 高生 4 5 月， 10月下旬至下霜 白 白 黄 4 印度 首领 Iris ger
24、manica Indian chief 中生 4 5 月 暗粉色 墨紫色 黄 8 白与黄 Iris germanica White and yellow 中生 4 5 月， 10月下旬至下霜 复色 发黄 复色发黄，浅蓝边 黄 8 DB13/T 2724 2018 11 D D 附 录 D （资料性附录） 有髯鸢尾常 见病虫害及防治方法 D.1 有髯鸢尾常见病虫害及防治方法见表 D.1。 表 D.1 有髯鸢尾常见病虫害及防治方法 病虫害名称 发病部位及症状 防治方法 细菌性软腐病 主要危害叶片、根茎。症状：受侵染的根状茎软腐，发出恶臭味，叶片出现明显水渍状条纹 1、避免虫害侵染 2、及时清除杂草
25、、病株 3、环境消毒 4、药物防治：农用链霉素可溶性粉剂 3000 倍喷施 茎腐病 主要危害叶片、根茎。症状：病菌引起根茎腐烂，其上产生许多微小的黑色菌核。早春受害的植株上可见到病菌菌体 1、清除病株、枯叶 2、药物防治：多菌灵 800 倍浸根防治 细菌性叶斑病 主要危害 叶片、根茎。症状：初期叶斑症状是不规则的半透明的斑点，遇连续阴雨时病斑很快布满全叶 1、早期摘除并销毁病叶及其他带病组织 2、适当喷施链霉素等抗菌素 蛴螬 主要危害根部，使植株生长势减弱直至死亡 1、及时捕捉消灭 2、 50 %辛硫磷 1000 倍液，或 50 %磷胺 2000 倍液灌根 蚜虫 主要危害叶片造成植株生长不良，并传播多种疾病 1、喷施 20 %杀灭菊酯 2、 10 %吡虫啉粉剂 2000 倍喷治 金针虫 主要钻食根状茎，造成幼苗枯死 必速灭 1000 倍液灌根
