1、D B河北省秦皇岛市地方标准DB 1303/ T046-1999牛冷冻精液人工输精技术操作规程1999-11-11发布1999-11-11实施秦皇岛市技术监督局发布前 二一 口为适应当前养牛业考仁）众的I -:IN要，提高：冷冻精液人！：输精水平，制定本标准，有利于秦垒岛市牛的科学繁她技术的健康发展，使牛的冷冻精液技术操作科学化、标准化，以提高牛冷冻精液人工输精技术的准胎率，降低养牛成木，址终达到提高养牛者经济效益的日的。木标准山秦皇岛市一.Z-PP牧局提出。木标准山秦皇岛市一Cif牧局归日。本标准山秦垒岛市畜牧i.作站负责起草。木标准主要起草人：鲍淑琴、刘天健、常洋军、郑庆丰赵伟、李振林才标
2、准委托奈宁岛市-111牧I：作站负贡解释。本标准从发布之！起实施。，河北省秦皇岛市地方标准牛冷冻精液人工输精技术操作规程DB 1303/ TO46-19991范围本标准规定了牛冷冻精液人1：输精过程，的冻精的保存和使用、冻精解冻、发情鉴定、输精时机、输精部位、器械洁洁fn 414方法及不孕毋牛繁殖疾病的治疗。木标准适用于秦垒岛地区!f:冷冻精液人一f：输精。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准，！，J用而构成为木标准的条文。在标准出版！，士，所示版本均为有效。所有标准都会被修11-，使川木标准的各方应探i寸使川丨列标准址新版木丨I勺ciff了L.性。GB4143 1:冷冻丰ii液3 9
3、1;质量要求1仗符合G B4143 I飞冷冻精液之规定。4冻精保存和使用方法a冻粉制作完毕，应迅速移入1:物液氮容器（液氮罐）！，的液氮内。U . J L I1J f1 t 1!ii tT iT :lei小心轻放，严防碰J童、冲击、倾斜、倒置和重ft堆放。c.冻精存贮容器内的液氮星不足总容量1/3时，应立即衤卜充。秦皇岛市技术监督局1999-11-11批准1999-11-11实施DB1303/ TO46- 1999d如发现液氮消耗显著增加或容器外挂rti应众即更换新容器。e取放冻精时不要把盛冻精的提筒提到罐G 1外，只能提到罐颈!jr部(10cm以下）且不超过10秒钟。如经10秒钟还没取完，应
4、将提筒放回，经液氮浸泡后再继续提起取用。5精液解冻5.1 V1液解冻技术指标5.1.1 Mi子活力：解冻后精子活力，指呈立线前进运动的精子百分率（一卜限) 30% (即0.3),复苏率精子下限) 50%05.1.2梅一x,11星解冻后呈直线前进运动的粉子数。细t亻李支（一卜限) 1000万个颗粒：1“1粒（卜限) 1200万个5.1.3角rI!冻后的粉子畸形率(I丨尺) 20%.5.1.4角rI.冻后的粉子1.51体完整率（厂限) 400.5.1.5解冻后粉液无炳玛毛性微声1：物，经培养排屯升，(I (:病原性细I4I I4-i落数( I-. hki ) 1000个。5.1.6角11！冻后的精
5、子存活时户小在5一8 c储存时（卜限）为12小It寸：在37C亻i者存丨i寸（卜限)4小I寸。5.2 Viif tf Alt i!b;方法先取小烧杯二个：杯内放入水丿：使水温保持38一40。在取洁净小试补一支，huh内放入I支或I ml解冻液，然后用预冷的镊子从冻粉罐I I，取出I粒冻精，迅速投入试A;h-I-,中，丿仁轻轻不停地摇动。促其快速解冻。当冻精溶化到2/3-3/4时，使试竹脱离水而，继续摇动试管，到颗粒完全溶化并及时从试份取出精液，经活力检查，如精子活力达0.3以上，即可用于输精。此过程要做到“四快”，即快取、快DB 1303/TO46-1999投、快解、快用。6发情鉴定，适时输精
6、6.1母牛发情特点6.1.1初配母牛的选择。初配母牛选个体发一11良好、无疫病的体成熟的毋牛配种，一般16月龄（下限）即可初次配利，。6.1.2母it-从第一次排卵到下一次排卵的时间介Ii隔称为发情周期，毋：发情周期平均为21天。6.1.3一毋1几发情持续时Ill-Ij短，发情持续时间为18小时一22小I丨、r。6.1.4了寸产！“的排卵II寸丨、！，般在发。tri终of一后10小I寸一12小lilt.6.1.5部分母！二发情后J子宫内脱出而现像6.1.6韦I:卵结合足在输卵竹卜1/3处，既壶）Ju部进行r6.1.7卵子排丨后到达受精位i约ire1 6 J IIr-12小Ill士输精后，精子到
7、达输卵竹1几！/3处的时(Ili .般为6小时一13小丨H. 06.2 -1寸牛发洁鉴定6.2.！外部观察：毋牛阴门肿胀月二流出玻璃林状透明-rfi液；食欲减退精神兴奋，眸叫不停：接受其它！：的爬跨，毋牛发情结柬到10小时这段时户小神志山不安转向安定。第：，外阴肿胀逐渐消失IiiN山潮红变粉红最后到青紫色，粘液变少呈米黄色快状。第三，手抓尾部有拱背表现。6.2.2阴进检查：阴通粘膜充血、滑润，子宫颈充血、松弛、开张，有粘液流出。发情前期粘液稀薄，随着发情时间的推移而变稠，粘液量由少到多，发情后期粘液逐渐减少。DB 1303/TO46-19996.2.3直肠检六：触感卵巢！二有滤泡发育者为发情。
8、触感到卵泡壁簿，卵泡波动明显，有一捏即破的感觉。这时输精受胎率址高。6.3毋牛适时输精母牛排卵结束前2小时一3小时，即发情结束后8小时-10小时为第一次适宜输粉时介刂，介刂隔8小时一12小寸第二次输精，为方便起见，可掌握f,J牛，h午发情，一卜午输精，第二天I几午再复配一次。一卜午发情的姆拜“，第二天I二午和下午各输枯一次。7精方法及部位7.1输精操作者要求指甲剪短，磨平，穿好I：作服，胶鞋，手竹进行Yili洗、消毒或带长件手套，洁净的输精器用稀释液冲洗两次将精液吸入输粉器内（细is iiA则直接装入输精器内），7.7实施直肠把ti“输枯，将1:j:1几保定好，对母！几外阴部洁洗消14- “种
9、lJ一法先月氵，水洗，J妾才丨：JIJ 2%宋苏儿或1的新illI尔火消毒外11111部及拈liIll，然后月J丿卜尸1六 f水或凉)I：水川，洗，报后用消毒纱布擦。，二方法用酒粉棉消毒阴门待酒精Pi:发后再用卫,I,-纸擦1几净。川只手打开阴唇，将吸入粉液的输粉器插入阴逆内，一只一手竹涂润汾剂经肛门扌rti入f,jf二直肠if二4巴扒：子宫颈，两手相互配合将输精器插入子宫、颈内5cm-7cm处；注入粉液。输精要点：慢插、轻注、缓出、防止粉液逆流。8器械清洁、消毒8.1U! V .作间要洁洁，防止有药味存在，禁止吸烟。玻璃和金属器械彻底洗涤、冲洗，再用清水洗于净，最后用蒸DB 1303/TO4
10、6-1999馏水冲洗后，放入高压灭菌器或一卜燥箱内消毒备用。8.2橡胶器械洗涤用热碱水或洗衣粉充分洗涤，然后用清水冲洗干净后挂在干燥处阴一F备用。8.3纱布、毛巾光用清水汉泡，然后用洗衣粉水洗涤，再用清水洗涤干净，晾千后，放在高压灭菌器内或经蒸煮消毒备用。9及时治疗母牛繁殖疾病，提高受胎率屡配不孕的毋牛常患有子宫炎，卵巢疾病等，应及时用药物进行处理。对发情正常，排卵迟缓的母产！“颈部注射促排3号(LRH-A3) 40微克，4小时配种。对子宫炎症1几的处理，用盐水冲洗子宫，在输精前用37一：,)的1%盐水1000m I-I5洲m)冲洗子宫，冲丨分泌物，污物，以创造，二个适ll：粉子存活的内环境。还可向子宫灌泪：打L产I毛索，输精前月1S%itiJ萄耘，水或丿I二尸丨！Jh水200tt门. )111 ri tlt亏1Go） )j III.位，链“1ii-索2(川万单位，加Ar i至30）C丿！：右灌入子宫, .tir.使受胎率明显提I、 I:介只叨言卜卜。冲一已。
