1、中华人民共和国林业行业标准LY/T 1123一93松材线虫病检疫技术1主题内容与适用范围本标准规定了松材线虫病检疫检验和检疫处理的方法。本标准适用于森林植物检疫部门对松材线虫病木及其加工制品等的检疫工作，各有关口岸动植物检疫机关可参照使用。2引用标准GB 434溟甲烷3术语3.1松材线虫病pine wilt disease caused by pine wood nematode由于松材线虫Bursaphelenchus xylophilus(Steiner et Buhrer)Nickle寄生在树体内而引起的一种树木病害。松材线虫属线形动物门(Nemata或Nematoda )，线虫纲(Se
2、cernentea)，垫刃目(Tylenchida),真滑刃总科(Aphelenchoidoidea)，伞滑刃属(Bursaphelenchus),3.2检疫quarantine为了保护一个国家或地区人民的身体健康和农林牧业的生产安全，根据国家和地方政府颁布的检疫法规，由法定的专门机构，对那些主要通过人为活动而远距离传播的流行性疫病所采取的检疫检验和严格的检疫处理措施。本标准涉及的是森林植物检疫。3. 3检疫检验quarantine detection对检疫法规所规定应施检疫的森林植物和林产品，通过一定的技术手段检查、检验是否携带检疫对象。3.4检疫处理quarantine treatment
3、对检疫检验后发现带有检疫对象的森林植物或林产品，采取一定的技术措施进行除害处理。3.5传播媒介vector一些病害的病原体必须依靠一定种类的其他生物体为媒介才能传染到无病的植株上去，这种传播病原体的媒介称之为传播媒介。3.6松天牛pine sawyer学名为Monochamus alternatus Hope，又名松褐天牛。属节肢动物门(Arthropoda),昆虫纲(Hexapoda),鞘翅目(Coleoptera)，天牛科(Cerambycidae),墨天牛属(Monochamus )。它是松树的一种蛀千害虫，又是松材线虫的重要传播媒介。3.7木材蓝变wood blue-stain在松树枯
4、死木中由于多种蓝变菌(或称青变菌)的存在而导致木材变为蓝灰色。3.8分散型3龄虫(Lu,) dispersal J,夏末初秋，松材线虫病枯死木中出现与增殖期3龄幼虫不同的另一类型3龄幼虫，从形态上表现出内含物显著增加，从生物学来看它可以抵抗不良环境条件如冬季寒冷和木材失水，被称为分散型3龄中华人民共和国林业部1993一07一07批准1994一05一01实施LY/T 1123一93虫。4检疫检验4.，直观检查直接和借助于锯、斧等工具观察应施检疫的松木或其加工制品等材质是否干枯;重量是否明显减轻;木质部有否蓝变;有无松夭牛栖居的痕迹，如侵人孔、蛀道、蛹室等。4.2室内镜检4.2.1抽样4.2.1.
5、1抽样时要选取材质干枯、有蓝变和有天牛栖居痕迹等病害特征的松木或其加工制品，若无上述特征时可随机抽样。4.2.1.2抽样数量为每批总件数的0.5%5.。%，但最低不得少于3件。4.2.2取样4.2.2.1将所抽的样木分别锯约5 cm长木段，或用手摇钻钻取少量木屑不得少于10 g)，标号后即带到实验室内。4.2-2.2取样时注惫选取靠近蛀道、蛹室的部位，钻取木屑时要注意先把取样部位的树皮剥净。4.2-2.3必要时可将样木整件带回实验室检验。4.2.2.4对加工制品可参照上述原则取样。4.2.3分离线虫4.2.3.1分离装置4.2.3.1.1将大小适当(直径1015 cm)的漏斗末端接一段长约10
6、 cm的乳胶管后置于漏斗架上，在乳胶管上装一止水夹。剪大小适当纱布两层铺在漏斗上。4.2.3.1.2将带到实验室的样段去皮后劈成长约3-4 cm的细条，约取log(或木屑)置于漏斗上的纱布中，将纱布四角向中间盖上分离材料，然后注入清水浸没(见图1)。注人清水后要注意使水充满漏斗和下面的乳胶管，不要产生空隙。分离材料图1贝尔曼漏斗法线虫分离装置图LY/T 1123一934.2.3.2温度和时间分离时室温不要低于70C，先将分离用水的温度调至20-400C，具体水温可视分离时室温的高低而定，即室温较低时可将水温调得较高些，但不超过400C, 0. 51.0 h后镜检。4.2.4镜检用千净的培养皿接
7、在乳胶管下，轻轻打开止水夹，接取分离液约15 mL,镜检，记录。4.2.4.1松材线虫的形态特征成虫虫体细长，约1 mm。头部唇区高，缴缩显著，口针细长，基部略微增厚。中食道球卵圆形，占体宽的三分之二以上，食道腺细长叶状，覆盖于肠背面。排泻孔的开口大致与食道和肠交接处平行，半月体在排泻孔后约三分之二体宽处。雌虫尾部亚圆锥形，末端钝圆，少数有微小的尾尖突。卵巢前伸，卵呈单行排列，阴门开口于虫体的中后部73%处，上覆以宽的阴门盖。雄虫交合刺大，弓状，哮突显著，远端膨大如盘状，雄虫尾部似鸟爪，向腹面弯曲，尾端为小的卵形交合伞所包裹(见图2),2龄至4龄幼虫在形态上是以体长和生殖腺长度来区别的。分散型
8、3龄虫(L动体内内含物增加导致体色较深。尾部呈半圆形，与其他龄期幼虫相比更宽、钝。LY/T 1123一93I口公，7矛忿目朴卜月口，毛召.卜1.队肠俄44.,恤铭劫洲.、叭认飞汁”，咙d决曰训L、孟井撇奋弓 z心正:r一幼，吹尸世M.竺二竺竺型竺竺己二鱼藕效 r.图2松材线虫Bursaphelenchus xylophilus(Steiner et Buhrer)Nickle1-雌虫12一雄虫。3-雄虫尾部t4一雄虫尾部腹面观，尾端有交合伞;5-文合刺腹面观t6一雌虫前端;7-雌虫阴门迢一10一雌虫尾部139LY/T 1123一934.2.4.2与拟松材线虫B. mucronatus(Mami
9、ya et Enda)在形态上的主要区别拟松材线虫在形态学和生物学方面均与松材线虫相似，而分布较松材线虫广泛，在松材线虫病的检验中常常可见。它们在形态上的主要区别在于:a.雌虫尾部，松材线虫为亚圆锥形，末端钝圆，少数可见微小的尾尖突;拟松材线虫为圆锥形，末端有明显的尾尖突，长约3. 8-5 pm(见图2,3)ab.雄虫尾部交合伞形状，松材线虫为卵形，拟松材线虫为近方形(见图2,3),图3拟松材线虫B. mucronatus(Mamiya et Enda)1-雌虫;2一雄虫;3一雌虫前端;4-V5一雌虫尾部;6一雄虫尾部口一交合伞.8-9一三龄幼虫尾部;1。一耐久型幼虫(dauerlarvae)
10、尾部;11-耐久型幼虫前端4.2.4.3镜检于解剖镜下检查，若难确认可做临时玻片在显微镜下观察。4.2-4.4临时玻片的制作4.2.4.4.1在洁净的载玻片中央滴一水滴，水滴的量以加盖玻片后恰好充满盖玻片下的空间为好。4.2-4-4.2用细针挑取，或用毛细滴管吸取线虫置于载玻片的水滴中，并使之沉底。4.2.4.4.3将放有线虫的载玻片在酒精灯火焰上往返通过5-6 s,杀死线虫。4.2.4.4.4用细针摆好水滴中的死线虫，然后用镊子夹盖玻片从一侧轻轻盖下。4.2.5检验记录LY/T 1123一93有关检验情况分别填入松材线虫病性验记录表。记录表的主要内容形式可参考附录A(参考件)。4.3签证根据
11、镜检结果，对被检的每个样均未发现松材线虫的松木及其加工制品等，按国务院颁布的植物检疫条例、中华人民共和国进出境动植物检疫法和林业部公布的植物检疫条例实施细则(林业部分)的有关规定，签发“植物检疫证书”。5检痊处理在被检样中发现松材线虫，就地及时进行除害处理。5.1熏蒸处理51.1熏蒸剂常用熏蒸剂有滨甲烷(MB),硫酞氟(SF),磷化铝(AP)等。5.1.2嗅甲烷林间帐幕熏燕澳甲烷的质量要求符合GB 434,5.1，2.1熏蒸帐幕双面压延防水布或0. 1 mm农用塑料薄膜(聚乙烯薄膜)均可。5.1.2.2熏蒸场地就地选择一块地势平坦、土壤紧密、阳光较充足、通风良好、交通方便、远离居民区的地方作为
12、熏蒸场地。5.1.2.3熏燕布置堆垛及丈量堆积将应施检疫处理的松木或其加工制品等在选择好的熏燕场地上堆垛。堆垛的大小视具体情况而定堆垛要尽量整齐，基本上形成一个长方形。一般垛高为1. 5-2. 0 m。堆积按式(1)计算:V二LXWXh”，”.(1)式中:V堆积，m;L长，m;W宽，m;h高，m,注若堆垛的宽度不整齐，向上明显变窄时，宽度应以基部和顶部宽度的平均值来计算b.挖沟在堆垛四周挖一圈宽20 cm以上，深30 cm以上的沟，挖出的土堆放在沟外侧，用作覆盖帐幕后回填。c.设置投药点根据堆垛的大小设置投药点，堆垛在70 m以下时，可在堆垛上部中央处设置一个投药点，堆垛大于70 m“时，可在
13、堆垛上部设置两个投药点。在投药点将一块50 cm X 50 cm的塑料布吊起四角，形成一个中间下凹的蒸发盘，然后将投药管的一端置于蒸发盘内，另一端伸出沟外。d.万盖帐幕将准备好的帐幕覆盖在堆垛上，帐幕四周边埋入沟内，用沟外侧的土回填，适当加水，踩紧踏实。5.1.2.4投药量和熏蒸时间投药量和熏蒸时间的选择参照表当日最高气温低于4时则停止熏蒸。1，其中温度为熏蒸当日最高气温;投药量指每立方米的投药量。.Y/T 1123一93表1投药量和熏蒸时间表温度，投药量,g/m熏燕时间，h410104-1254869-8372102063834842567220以上42-634828-42725.1.2.5
14、总投药量C,=Cxv”一“(2)式中:c总总投药量,g;C每立方米的投药量,g/m;V堆积，m ,5.1.2.6投药 投药前先检查帐幕有否破损，四周边、进药口外缘是否封好，帐幕若有破损处Iff用不干胶带或其它枯合剂补好，确认封闭严密后开始投药。操作人员站在上风处，缓缓打开置于磅秤上的钢瓶阀门，使澳甲烷通过投药管进入堆垛，直至磅秤上显示已放完所需的总投药量时即关闭阀门，取出投药管，封好进药口，保持密闭至所选择的熏蒸时间。5.1.27散毒熏蒸完毕，先将帐幕下风方向一边打开，0. 5 h后再揭幕充分散毒，揭幕时从打开的一边开始。5.1.2.8效果检查在必要时应进行效果检查，效果检查需在揭幕Ih后进行
15、。a.在堆垛上部分别取3段长约50 cm的样段，样段的选择参照本标准4.2.1条;b.将三个样段分别劈开检查松夭牛幼虫的有无及死活。松夭牛死活鉴别参照表2;表2松夭牛死活鉴别表体表色泽虫体软硬程度对外界刺傲反应虫体截面形状4丝无光禅4 Aft无弹性头部位置向腹面弯曲图形c.分别在劈开后的样段中取样带到实验室内镜检松材线虫的死括前伸袍.3-。取样方法参照本标准4.2.2条;镜检方法参照本标准4.2.3条和4.2.4条，d.经检查后各样均无活天牛又无活线虫即为熏蒸合格。5.1.2.9熏蒸记录有关熏蒸情况分别填入澳甲烷熏燕记录表。记录表的主要内容和形式可参考附录B(参考件)。5.1.3澳甲烷库房熏燕
16、有些应施检疫处理的松木或其加工制品等，也可根据具体情况堆积在临时选择的库房内熏蒸。5.1.3.1对临时库房的要求避免在办公室、厂房、宿舍等人员集中活动的地方需封闭严密;现场周围需设置警告。熏蒸方法氏阮已5.1.3.2142LY/T 1123一93参照本标准5.1.2条中有关部分。5.1-3.3检漏投药后在进药口和库房周围有可能封闭不严之处进行检肠，发现泄漏需及时封堵。卤化物渗漏检测器、测澳灯等各种类型的检测器可用来检漏。使用卤化物渗漏检测器时先用火柴从燃烧头的开口处将其点然，然后再向左慢馒转动调节阀，待反应板或锥形体发热变红时，把火焰调至能够维持这种颜色的最小范围。将探测管末端开口处放在被检处
17、，然后观察火焰的颜色是否发生变化，如火焰颜色变绿，则说明有澳甲烷外漏，漏的程度越严重，火焰的绿色越深，以致变为蓝绿色、蓝色。5.飞检漏人员需佩戴防毒面具。3.4散毒熏熬完毕后打开可以通风之处，散毒.操作人员应注意佩戴防毒面具。散毒24 h后即进行效果检查。d签证熏蒸效果检查合格，参照本标准4.3条签发“植物检疫证书”。处理，直至合格。效果检查不合格，寻找原因后进行再5.2集中烧毁对利用价值不大的待处理松木或其加工制品等可集中烧毁场地和焚烧过程的管理，特别是余火的处理。，严禁遗漏。为避免火灾要注意选择焚烧53水浸将应施检疫处理的松木沉于水中5个月以上。水浸后亦需进行效果检查。5.4改变用途的处理5.4.1切片将应施检疫处理的松木切片后用作纤维板、刨花板或纸浆等工业原料。5.4.2烧炭和用作燃料。LY/T 1123一93附录A松材线虫病检验记录表(参考件)表A1松材线虫病检验记录表批号样号检验日期年、月、日干枯蓝变松天牛栖居 痕迹有无线虫 十、一备注检验人附录B澳甲烷.燕记录表(参考件)表B1澳甲烷熏蒸记录表批号徉号熏蒸日期年、月、日瞥RiAag/ma总投药量B熏燕时间h活天牛十、一活线虫+、一记录人144LY/T 1123一93附加说明:本标准由林业部科技司标准处提出。本标准由林业部森林病虫害防治总站负责起草。本标准主要起草人王玉嫉、宋玉双、减秀强、刘阳
