1、ICS 65020B 04 N Y中华人民共和国农业行业标准NYT 1 8577101 0黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程第7部分：Rules for evaluation of cucumber for resistance to diseasesPart 7：Rule for evaluation of cucumber for resistance to cucumber mosaic virus20100520发布 20100901实施中华人民共和国农业部发布刖 置NYT 18577_2010NYT 1857-2010黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程为系列标准，共8部分第1部分：黄瓜抗霜霉
2、病鉴定技术规程；第2部分：黄瓜抗白粉病鉴定技术规程；第3部分：黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程；第4部分：黄瓜抗疫病鉴定技术规程；第5部分：黄瓜抗黑星病鉴定技术规程；第6部分：黄瓜抗细菌性角斑病鉴定技术规程；第7部分：黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程；第8部分：黄瓜抗南方根结线虫病鉴定技术规程。本部分为NYT 1857-2010的第7部分。本部分的附录A为资料性附录。本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所。本部分主要起草人：杨宇红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、龚慧芝。NYT 185772010黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程第7部分：黄瓜抗黄瓜花叶病
3、毒病鉴定技术规程1范围本部分规定了黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件及试验设计、接种、病情调查、抗病性评价和鉴定记载表格。本部分适用于各种黄瓜资源对黄瓜花叶病毒病抗性的室内鉴定及评价。2术语和定义下列术语和定义适用于本部分。21抗病性disease resistance植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。2 2抗病性鉴定identification of disease resistance通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水平。2 3抗性评价evaluation of resistance levels根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应
4、程度和抵抗水平的描述。2 4致病性pathogenicity病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。2 5人工接种artificial inoculation在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程。26病情级别disease rating scale人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。27接种体inoculum用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。28病情指数disease index(D1)通过对植物个体发病程度(病情级别)数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式。2 9株系strain同种病毒中不同来源的、血清学相关的，但生物学性状不完全相
5、同，或对不同寄主植物及不同品种具有致病力差异的变异类群。YYT 185772010210黄瓜花叶病毒病Cucumber ilnosaic virus由黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaic virus，CMV)所引起的叶片呈花叶、叶小皱缩、植株黄桔、瓜条畸形症状为主的黄瓜病毒病害。3接种体制备和保存接种前进行接种体的繁殖。常用繁殖方法：取少量保存的株系鲜病叶或冻干叶摩擦接种在“早粉2号”番茄或枯斑三生烟的叶片上，置防虫温室内(26300(2)繁殖10 d14 d后采收病叶用作接种毒源。将感病毒的叶片置于无菌研钵内，在低温下将病叶研碎，加003 molL磷酸盐缓冲液(磷酸氢二钠1075 g、
6、磷酸二氢钾408 g、蒸馏水1 000 mL，调节至pH 8o)匀浆，纱布过滤或3 000 rmin离心15 min，其滤液或上清液即为接种悬浮液。株系可常年保存在防虫温室内的枯斑三生烟(Nicotiana tabacum cvsSamsun NN)或珊西NC烟(NcvsXanthi NC)上，或将鲜病叶制作成冻干叶保存在-20以下的冰箱内。冻干叶的简易制作法：将鲜病叶剪成小块，与硅胶或氯化钙隔层(用滤纸隔开)放置在密封的容器里，再将容器置于4。C冰箱里，头两天每天换一次干燥剂，以后每两天换一次，直到叶片彻底干燥为止。整个制作过程应防止其他病毒污染。4室内抗性鉴定4 1鉴定室设置人工接种鉴定室
7、应具备人工调节温度、湿度及光照的条件，使人工接种后具备良好的发病环境。42鉴定对照品种鉴定时设“中农9号”黄瓜为抗病对照品种，“中农19号”黄瓜为感病对照品种。4 3鉴定设计鉴定材料随机或顺序排列，每份材料重复3次，每重复10株苗。4 4鉴定材料育苗鉴定材料种子经10磷酸三钠溶液浸泡15 min后，用清水冲洗，放人垫有两层滤纸的培养皿中，然后于恒温培养箱中28催芽。待胚根长至05 cm时，将其播于装有播种基质的塑料育苗钵内。育苗基质为草炭，蛭石和菜田土(2：1：1)，基质经高温蒸汽灭菌(134。(2，30 rain)。在2025的日光温室内育苗，幼苗应生长健壮、一致。4 5接种4 51接种期黄
8、瓜花叶病毒病抗性鉴定接种期为1片真叶充分展开时。45 2接种浓度1 g鲜病叶加10mL 003molL的磷酸盐缓冲液。4 53接种方法少量鉴定采用汁液摩擦接种法，在叶片上撒少许600目的金刚砂，充分洗净手指后用食指蘸取病毒接种液涂抹于叶片上；大量鉴定采用喷枪接种法，即喷枪的杯内盛接种悬浮液。喷枪嘴距叶片约2 cm，空气压缩机压力为2058 kPa2450 kPa。接种两次，间隔3 d5 d。接种后立即用清水冲洗叶面上多余的病毒汁液。46接种后管理接种后将植株置于2428、自然光照的鉴定室内正常管理。，NYT 18577q0105病情调查51调查时间病情调查于第一次接种后15 d20 d进行。5
9、2调查方法调查每份鉴定材料接种株发病情况，根据病害症状描述，逐份材料进行调查，记载病情级别，计算出病情指数(DJ)。病情指数按公式(1)计算：DI一絮挈舢。式中：DJ病情指数；s各病情级别代表数值；”各病情级别病株(叶)数；N调查总株(叶)数；S最高病情级别代表值。5 3病情分级标准室内病情分级及其对应的症状描述见表l。表1 黄瓜黄瓜花叶病毒病病情级别划分病情级别 症状描述0 无症状l 心叶明脉或轻花叶3 心叶及中部叶片花叶5 心叶及中部叶片花叶。少数叶片畸形、皱缩7 重花叶，多数叶片畸形、皱缩9 重花叶，叶片明显畸形。植株矮化甚至死亡G抗性评价G1鉴定有效性判别当感病对照材料达到其相应感病程
10、度(D，40)，该批次抗花叶病毒病鉴定视为有效。62抗性评价标准依据鉴定材料的发病程度(病情指数)确定其对花叶病毒病的抗性水平，划分标准见表2。表2黄瓜对花叶病毒病抗性评价标准病情指数 抗性评价O60 高感(Hs)NYT 1857 720107鉴定记载表格黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定结果记载表格见表3。表3黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定结果记载衰病情级别编号 品种名称 来 源 病情指数 抗性评价0级 1级 3级 5级 7级 9级1播种日期： 2接种日期：3接种生育期： 4接种病毒株系编号：5调查日期：4鉴定技术负责人(签字)A1学名和形态描述附录A(资料性附录)黄瓜花叶病毒病病原殛其株系划分Nvv 18
11、57 72010黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)。为单链、正义RNA病毒，含有RNAl、RNA2和RNA3三个RNA片段。病毒颗粒球状，直径28 nm30 nm。寄主范围广泛，可侵染85科365属1 000多种单子叶、双子叶、木本及草本植物。主要以蚜虫非持久性方式传播，也可经汁液接触而机械传播。A2黄瓜花叶病毒株系由于广泛的寄主和地域适应性，CMV的株系分化十分普遍。1981年以来，据不完全统计已报道有63个株系或分离物，其名称分别为：B；Bm一1。Bin 2，Bm一3；Bm 312；BmL，BMo；C，C1，C2；Ca)CA；Ch；CL；Cp；EM；Fny；
12、117F；Fb；Fp；GC。GCM；H；K；K8；J；J 83，Jr)L；Lny，L3；Lp；M27，M48；Mm：Ns；NT2，NT9；OL；Peet；Pf；PFl，Pf2；Rm；S；SB)Sc)SfiSfi；Sp)Ss)T；Tn)TL，To)U；V；WG)wL；wT；Wv；Z。依据血清学及生物学等特征，将众多的CMV株系分为2个亚组，即DTL血清组属亚组I，ToRS血清组属亚组。随着研究数据的积累和研究、分析手段的不断改进，近年来研究表明，CMv亚组I能进一步分为亚组IA和IB。中华人民共和国农业行业标准黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程第7部分：黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程NYT 18571 2010中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码：100125 网址；wwwccapcomcn)北京昌平环球印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销开本880mm1230mml16 印张075 字数7千字 举蒹叫III IIIIIIIIIII IIIIII II III IIIooN。卜卜一一扣Z
