1、Oktober 2010DEUTSCHE NORM Normenausschuss Wasserwesen (NAW) im DINPreisgruppe 18DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin, gestattet.ICS 13.060.50!$ia“1709262www.din.deDDIN 38407-35De
2、utsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- undSchlammuntersuchung Gemeinsam erfassbare Stoffgruppen (Gruppe F) Teil 35: Bestimmung ausgewhlter Phenoxyalkancarbonsuren undweiterer acider Pflanzenschutzmittelwirkstoffe Verfahren mittelsHochleistungs-Flssigkeitschromatographie undmassenspektrometr
3、ischer Detektion (HPLC-MS/MS) (F 35)German standard methods for the examination of water, waste water and sludge Jointly determinable substances (group F) Part 35: Determination of selected phenoxyalkyl carbonic acids and further acid planttreatment agents Method using high performance liquid chroma
4、tography and massspectrometric detection (HPLC-MS/MS) (F 35)Mthodes normalises allemandes pour lanalyse des eaux, des eaux rsiduaires et desboues Substances dterminables ensemble (groupe F) Partie 35: Dtermination des acides phnoxyalcaniques slectionns et dautres produitsacide de traitement pour la
5、protection des plantes Mthode par chromatographie enphase liquide haute performance et spectromtrie de masse (CLHP-MS/MS) (F 35)Alleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlin www.beuth.deGesamtumfang 46 SeitenB55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09DCEB7EE8ED9NormCD - Stand 2010-10 DIN 38
6、407-35:2010-10 Inhalt Seite Vorwort 4 Einleitung.5 1 Anwendungsbereich .6 2 Normative Verweisungen8 3 Begriffe .8 4 Grundlage des Verfahrens8 5 Strungen .9 5.1 Strungen durch die Probenahme.9 5.2 Strungen bei der Extraktion .9 5.3 Strungen bei der Hochleistungsflssigkeits-Chromatographie und Massens
7、pektrometrie9 6 Bezeichnung.9 7 Reagenzien .9 8 Gerte11 9 Probenahme .12 10 Durchfhrung.13 10.1 Probenvorbereitung.13 10.2 Extraktion .13 10.3 Hochleistungs-Flssigkeitschromatographie (HPLC) .14 10.4 Detektion.14 10.5 Blindwertmessungen 15 11 Kalibrierung16 11.1 Grundlagen.16 11.2 Kalibrierung mit e
8、xternem Standard17 11.3 Kalibrierung mit internem Standard 18 11.4 Kalibrierung nach dem Verfahren der Standardaddition 19 11.5 Prfung der Kalibrierung 20 12 Bestimmung der Wiederfindungsraten .20 12.1 Wiederfindungsraten des Verfahrens20 12.2 Wiederfindungsraten aus Proben 21 12.3 Wiederfindungsrat
9、en von internen Standards .22 13 Auswertung 23 13.1 Besttigung einzelner Substanzen 23 13.2 Berechnung des Einzelergebnisses bei Kalibrierung mit externem Standard .23 13.3 Berechnung des Einzelergebnisses bei Kalibrierung mit internem Standard 24 13.4 Berechnung des Einzelergebnisses bei Standardad
10、dition .25 14 Angabe der Ergebnisse.25 15 Analysenbericht.25 16 Verfahrenskenndaten 26 2 B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09DCEB7EE8ED9NormCD - Stand 2010-10 DIN 38407-35:2010-10 Seite Anhang A (informativ) Beispiele fr Sorbentien, Arbeitsbedingungen und Wiederfindungsraten30 Anhang B (informativ) B
11、eispiele fr HPLC-Sulen und Chromatogramme 35 Anhang C (informativ) Beispiele fr Detektion 42 Anhang D (informativ) Beispiele fr Erweiterung des Verfahrens.44 Anhang E (informativ) Erluterungen .45 Literaturhinweise46 Bilder Bild B.1 Chromatographische Trennung, Beispiel 136 Bild B.2 Chromatographisc
12、he Trennung, Beispiel 237 Bild B.3 Chromatographische Trennung, Beispiel 338 Bild B.4 Chromatographische Trennung und Nachsulenzugabe von TRIS-Puffer.39 Bild B.5 Chromatographische Trennung fr anreicherungsfreie Bestimmung 41 Tabellen Tabelle 1 Pflanzenschutzmittelwirkstoffe, deren Bestimmung nach d
13、iesem Verfahren erprobt wurde .6 Tabelle 2 Bedeutung der Indizes17 Tabelle 3 Verfahrenskenndaten nach DIN 38402-42 zur Bestimmung ausgewhlter Pflanzenbehandlungsmittel Verfahren mittels HPLC/MS-MS; Probe 1 Standardlsung .26 Tabelle 4 Verfahrenskenndaten nach DIN 38402-42 zur Bestimmung ausgewhlter P
14、flanzenbehandlungsmittel Verfahren mittels HPLC/MS-MS; Probe 2 Trinkwasser, aufgestockt .27 Tabelle 5 Verfahrenskenndaten nach DIN 38402-42 zur Bestimmung ausgewhlter Pflanzenbehandlungsmittel Verfahren mittels HPLC/MS-MS; Grundwasser, aufgestockt .28 Tabelle 6 Verfahrenskenndaten nach DIN 38402-42
15、zur Bestimmung ausgewhlter Pflanzenbehandlungsmittel Verfahren mittels HPLC/MS-MS; Oberflchenwasser, aufgestockt .29 Tabelle A.1 Beispiele fr Wiederfindungsraten mit Bakerbond SDB-2, 30 mg (Arbeitsbedingungen siehe A.1.1) 32 Tabelle A.2 Beispiele fr Wiederfindungsraten mit Oasis HLB (Arbeitsbedingun
16、gen siehe A.1.2 und A.1.3).33 Tabelle A.3 Beispiele fr Wiederfindungsraten mit Focus und Isolute ENV+ (Arbeitsbedingungen siehe A.1.4 und A.1.5).34 Tabelle B.1 nderung der gemessenen Signal-zu-Rauschen-Verhltnisse durch Nachsulenzugabe von TRIS-Puffer.40 Tabelle C.1 Massenbergnge der zu bestimmenden
17、 Substanzen42 Tabelle C.2 Massenbergnge von geeigneten internen Standardsubstanzen43 3 B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09DCEB7EE8ED9NormCD - Stand 2010-10 DIN 38407-35:2010-10 Vorwort Dieses Dokument wurde vom Arbeitskreis NA 119-01-03-02-16 AK LC-MS/MS-Verfahren“ des NA 119-01-03 AA Wasseruntersuc
18、hung“ im Normenausschuss Wasserwesen (NAW) erarbeitet. Es wird auf die Mglichkeit hingewiesen, dass einige Texte dieses Dokuments Patentrechte berhren knnen. Das DIN ist nicht dafr verantwortlich, einige oder alle diesbezglichen Patentrechte zu identifizieren. Diese Norm ist Bestandteil der Reihe De
19、utsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung Gemeinsam erfassbare Stoffgruppen (Gruppe F) Bestimmung ausgewhlter Phenoxyalkancarbonsuren und weiterer acider Pflanzenschutzmittel-wirkstoffe Verfahren mittels Hochleistungs-Flssigkeitschromatographie und massenspektrometrisch
20、er Detektion (HPLC-MS/MS) (F 35) Diese Norm wurde gemeinsam mit der Wasserchemischen Gesellschaft eine Fachgruppe in der Gesellschaft Deutscher Chemiker aufgestellt (siehe Anhang E). Es ist erforderlich, bei den Untersuchungen nach dieser Norm Fachleute oder Facheinrichtungen einzuschalten und beste
21、hende Sicherheitsvorschriften zu beachten. Bei Anwendung der Norm ist im Einzelfall je nach Aufgabenstellung zu prfen, ob und inwieweit die Festlegung zustzlicher Randbedingungen erforderlich ist. Zu DIN 38407 Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung Gemein-sam erfas
22、sbare Stoffgruppen (Gruppe F)“ gehren weitere Teile. Eine bersicht der Gruppen A bis T der Deutschen Einheitsverfahren“ enthlt Anhang E. WARNUNG Anwender dieser Norm sollten mit der blichen Laborpraxis vertraut sein. Diese Norm gibt nicht vor, alle unter Umstnden mit der Anwendung des Verfahrens ver
23、bundenen Sicherheitsaspekte anzusprechen. Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, angemessene Sicherheits- und Schutzmanahmen zu treffen und sicherzustellen, dass diese mit nationalen Festlegungen bereinstimmen. 4 B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09DCEB7EE8ED9NormCD - Stand 2010-10 DIN 38407-35
24、:2010-10 Einleitung Zur Bestimmung von Pflanzenschutzmittelwirkstoffen stehen verschiedene Verfahren zur Verfgung (vergleiche Literaturhinweise). In dieser Norm wird ein flssigkeitschromatographisches Verfahren nach Festphasenextraktion zur Bestimmung ausgewhlter Phenoxyalkancarbonsuren und weiterer
25、 acider Pflanzenschutzmittelwirkstoffe beschrieben (siehe Tabelle 1). 5 B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09DCEB7EE8ED9NormCD - Stand 2010-10 DIN 38407-35:2010-10 1 Anwendungsbereich Diese Norm legt ein Verfahren zur Bestimmung ausgewhlter Pflanzenschutzmittelwirkstoffe (siehe Tabelle 1) in Trink-, G
26、rund- und Oberflchenwasser in Massenkonzentrationen 0,025 g/l fest. Die Anwendbarkeit des Verfahrens auf weitere, in Tabelle 1 nicht genannte Verbindungen oder andere Wasserarten, ist nicht ausgeschlossen; sie muss jedoch im Einzelfall geprft werden (siehe Anhang D). Tabelle 1 Pflanzenschutzmittelwi
27、rkstoffe, deren Bestimmung nach diesem Verfahren erprobt wurde Trivialname Chemische Bezeichnung (IUPAC)aSummenformel Relative molare Masse g/mol CAS-RNbClopyralid 3,6-Dichlorpyridin-2-carbonsure C6H3Cl2NO2192,0 1702176 DNOC 4,6-Dinitro-o-kresol C7H6N2O5198,1 534521 MCPA 4-Chlor-o-tolyloxyessigsure
28、C9H9ClO3200,6 94746 Mecoprop (RS)-2-(4-Chlor-o-tolyloxy)propionsure 7085190c Mecoprop-P (R)-2-(4-Chlor-o-tolyloxy)propionsure C10H11ClO3214,6 16484778d 2,4-D (2,4-Dichlorphenoxy)essigsure C8H6Cl2O3221,0 94757 Dicamba 3,6-Dichlor-o-anissure C8H6Cl2O3221,0 1918009 Quinmerac 7-Chlor-3-methyl-chinolin-8
29、-carbonsure C11H8ClNO2221,6 90717036 MCPB 4-(4-Chlor-2-methylphenoxy)buttersure C11H13ClO3228,7 94815 Dichlorprop (RS)-2-(2,4-Dichlorphenoxy)propionsure 120365cDichlorprop-P (R)-2-(2,4-Dichlorphenoxy)propionsure C9H8Cl2O3235,1 15165670d Dinoterb 2-tert-Butyl-4,6-dinitrophenol C10H12N2O5240,2 1420071
30、 Bentazon 3-Isopropyl-(1H)-2,1,3-benzothiadiazin- 4(3H)-on-2,2-dioxid C10H12N2O3S 240,2 25057890 2,4-DB 4-(2,4-Dichlorphenoxy)buttersure C10H10Cl2O3249,1 94826 6 B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09DCEB7EE8ED9NormCD - Stand 2010-10 DIN 38407-35:2010-10 Tabelle 1 (fortgesetzt) Trivialname Chemische Be
31、zeichnung (IUPAC)aSummenformel Relative molare Masse g/mol CAS-RNbFluroxypyr 4-Amino-3,5-dichlor-6-fluor-2-pyridyloxy-essigsure C7H5Cl2FN2O3255,0 69377817 2,4,5-T 2,4,5-Trichlorphenoxyessigsure C8H5Cl3O3255,5 93765 Bromoxynil 3,5-Dibrom-4-hydroxy-benzonitril C7H3Br2NO 276,9 1689845 Fluazifop (RS)-2-
32、4-(5-trifluormethyl-2-pyridyloxy)phenoxypropionsure 69335917cFluazifopP (R)-2-4-(5-trifluormethyl-2-pyridyloxy)phenoxypropionsure C15H12F3NO4327,3 83066880d Sulcotrion 2-(2-Chlor-4-mesylbenzoyl)cyclohexan-1,3-dion C14H13ClO5S 328,8 99105778 Fenoxaprop (RS)-2-(4-(6-Chlor-1,3-benzoxazol-2-yloxy)phenox
33、y)propionsure 95617097cFenoxapropP (R)-2-(4-(6-Chlor-1,3-benzoxazol-2-yloxy)phenoxy)propionsure C16H12ClNO5333,7 113158400d Mesotrion 2-(4-Mesyl-2-nitrobenzoyl)cyclohexan-1,3-dion C14H13NO7S 339,3 104206828 Haloxyfop (RS)-2-4-(3-Chlor-5-trifluormethyl-2-pyridyloxy)phenoxypropionsure 69806344cHaloxyf
34、opP (R)-2-4-(3-Chlor-5-trifluormethyl-2-pyridyloxy)phenoxypropionsure C15H11ClF3NO4361,7 95977290d Ioxynil 4-Hydroxy-3,5-diiod-benzonitril C7H3I2NO 370,9 1689834Nicosulfuron 2-(4,6-Dimethoxypyrimidin-2-ylcarbamoyl-sulfamoyl)-N,N-dimethylnicotinamid C15H18N6O6S 410,4 111991094 ANMERKUNG Optische Isom
35、ere werden mit diesem Verfahren chromatographisch nicht von einander getrennt, so dass bei der Quantifizierung ggf. die Summe beider Enantiomere ermittelt wird. aIUPAC (International Union of Pure and Applied Chemistry) bCAS-RN Chemical Abstracts Services Registrier-Nummer cRacematdreines Isomer7 B5
36、5EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09DCEB7EE8ED9NormCD - Stand 2010-10 DIN 38407-35:2010-10 2 Normative Verweisungen Die folgenden zitierten Dokumente sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gil
37、t die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschlielich aller nderungen). DIN 12242-1, Laborgerte aus Glas Kegelschliffe fr austauschbare Verbindungen Mae, Toleranzen DIN 32645, Chemische Analytik Nachweis-, Erfassungs- und Bestimmungsgrenze unter Wieder-holbedingungen Begriffe, Verfah
38、ren, Auswertung DIN 38402-12, Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung Allgemeine Angaben (Gruppe A) Probenahme aus stehenden Gewssern (A 12) DIN 38402-13, Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung Allgemeine Angaben (Gruppe A) Probena
39、hme aus Grundwasserleitern (A 13) DIN 38402-14, Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung Allgemeine Angaben (Gruppe A) Probenahme von Rohwasser und Trinkwasser (A 14) DIN 38402-15, Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung Allgemeine A
40、ngaben (Gruppe A) Probenahme aus Fliegewssern (A 15) DIN 38402-51, Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung Allgemeine Angaben (Gruppe A) Kalibrierung von Analysenverfahren, Auswertung von Analysen-ergebnissen und lineare Kalibrierfunktionen fr die Bestimmung von Ver
41、fahrenskenngren (A 51) DIN EN ISO 1042, Laborgerte aus Glas Messkolben DIN EN ISO 4788, Laborgerte aus Glas Messzylinder und Mischzylinder DIN EN ISO 4796-2, Laborgerte aus Glas Flaschen Teil 2: Flaschen mit konischem Hals DIN ISO 3696, Wasser fr analytische Zwecke Anforderungen und Prfungen 3 Begri
42、ffe Fr die Anwendung dieses Dokuments gelten die Begriffe nach DIN 32645 und DIN 38402-51. 4 Grundlage des Verfahrens Die Pflanzenschutzmittelwirkstoffe werden mittels Festphasenextraktion aus der unfiltrierten, angesuerten Wasserprobe angereichert und isoliert. Die Identifizierung und quantitative
43、Bestimmung erfolgt durch Hoch-leistungs-Flssigkeitschromatographie gekoppelt mit massenspektrometrischer Detektion (HPLC-MS/MS). Bei entsprechender Empfindlichkeit des Massenspektrometers kann auf die Festphasenextraktion der Wasserprobe verzichtet werden. 8 B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09DCEB7E
44、E8ED9NormCD - Stand 2010-10 DIN 38407-35:2010-10 5 Strungen 5.1 Strungen durch die Probenahme Um Strungen zu vermeiden, die Probe, wie in Abschnitt 9 angegeben, nehmen. 5.2 Strungen bei der Extraktion Die im Handel erhltlichen Festphasenmaterialien sind oft von unterschiedlicher Beschaffenheit. Von Charge zu Charge knnen Schwankungen in der Qualitt und Selektivitt auftreten. Die Wiederfindungsraten einzelner Verbindungen knnen in Abhngigkeit von der Konzentration und der Beschaffenheit der Probe schwanken. Sie sind
