1、August 2008DEUTSCHE NORM Normenausschuss Materialprfung (NMP) im DINPreisgruppe 9DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin, gestattet.ICS 71.100.40!$K$r“1400179www.din.deDDIN EN 15608
2、Grenzflchenaktive Stoffe Quantitative Bestimmung freier Fettsure in Alkylamidopropylbetainen Gaschromatographisches Verfahren;Deutsche Fassung EN 15608:2008Surface active agents Quantitative determination of free fatty acid in alkylamidopropylbetaines Gas-chromatographic method;German version EN 156
3、08:2008Agents de surface Dosage quantitatif des acides gras libres dans les alkylamidopropylbtanes Mthode par chromatographie en phase gazeuse;Version allemande EN 15608:2008Alleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlin www.beuth.deGesamtumfang 14 SeitenDIN EN 15608:2008-08 2 Nation
4、ales Vorwort Dieses Dokument (EN 15608:2008) wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 276 Grenzflchenaktive Stoffe“ erarbeitet, dessen Sekretariat vom AFNOR (Frankreich) gehalten wird. Das zustndige deutsche Gremium ist der Arbeitsausschuss NA 062-05-62 AA Analytik von Tensiden“ im Normenausschuss Mater
5、ialprfung (NMP). Fr die in diesem Dokument zitierten Normen wird im Folgenden auf die entsprechenden Deutschen Normen hingewiesen: ISO 607 siehe DIN ISO 607 EN ISO 3696 siehe DIN ISO 3696 ISO 5725-2 siehe DIN ISO 5725-2 Nationaler Anhang NA (informativ) Literaturhinweise DIN ISO 607, Tenside und Was
6、chmittel Verfahren zur Probenteilung DIN ISO 3696, Wasser fr analytische Zwecke Anforderungen und Prfungen DIN ISO 5725-2, Genauigkeit (Richtigkeit und Przision) von Messverfahren und Messergebnissen Teil 2: Grundlegende Methode fr die Ermittlung der Wiederhol- und Vergleichprzision eines verein-hei
7、tlichten Messverfahrens EUROPISCHE NORM EUROPEAN STANDARD NORME EUROPENNE EN 15608 Mai 2008 ICS 71.100.40 Deutsche Fassung Grenzflchenaktive Stoffe Quantitative Bestimmung freier Fettsure in Alkylamidopropylbetainen Gaschromatographisches Verfahren Surface active agents Quantitative determination of
8、 free fatty acid in alkylamidopropylbetaines Gas-chromatographic method Agents de surface Dosage quantitatif des acides gras libres dans les alkylamidopropylbtanes Mthode par chromatographie en phase gazeuse Diese Europische Norm wurde vom CEN am 11. April 2008 angenommen. Die CEN-Mitglieder sind ge
9、halten, die CEN/CENELEC-Geschftsordnung zu erfllen, in der die Bedingungen festgelegt sind, unter denen dieser Europischen Norm ohne jede nderung der Status einer nationalen Norm zu geben ist. Auf dem letzten Stand befindliche Listen dieser nationalen Normen mit ihren bibliographischen Angaben sind
10、beim Management-Zentrum des CEN oder bei jedem CEN-Mitglied auf Anfrage erhltlich. Diese Europische Norm besteht in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Franzsisch). Eine Fassung in einer anderen Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch bersetzung in seine Landess
11、prache gemacht und dem Management-Zentrum mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen. CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dnemark, Deutschland, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Lettland, L
12、itauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien, Schweden, der Schweiz, der Slowakei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, Ungarn, dem Vereinigten Knigreich und Zypern. EUROPISCHES KOMITEE FR NORMUNG EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION COMIT EU
13、ROPEN DE NORMALISATIONManagement-Zentrum: rue de Stassart, 36 B- 1050 Brssel 2008 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten.Ref. Nr. EN 15608:2008 DEN 15608:2008 (D) 2 Inhalt Seite Vorwort 3 1 Anwendu
14、ngsbereich .4 2 Normative Verweisungen4 3 Kurzbeschreibung .4 4 Reagenzien.4 5 Gerte5 6 Probenahme und Probenvorbereitung5 7 Durchfhrung.5 8 Berechnung und Angabe der Ergebnisse.6 9 Przision.6 10 Prfbericht7 Anhang A (informativ) Referenz-GLC-Chromatogramm8 A.1 Einstellungen des Gaschromatographen .
15、9 Anhang B (informativ) Verfahrensvalidierung. 10 B.1 Kalibrierung. 10 B.2 Statistische und sonstige aus den Ergebnissen des Ringversuches abgeleitete Daten 10 B.3 Bemerkungen 11 Literaturhinweise . 12 DIN EN 15608:2008-08 EN 15608:2008 (D) 3 Vorwort Dieses Dokument (EN 15608:2008) wurde vom Technis
16、chen Komitee CEN/TC 276 Grenzflchenaktive Stoffe“ erarbeitet, dessen Sekretariat vom AFNOR gehalten wird. Diese Europische Norm muss den Status einer nationalen Norm erhalten, entweder durch Verffentlichung eines identischen Textes oder durch Anerkennung bis November 2008, und etwaige entgegenstehen
17、de nationale Normen mssen bis November 2008 zurckgezogen werden. Es wird auf die Mglichkeit hingewiesen, dass einige Texte dieses Dokuments Patentrechte berhren knnen. CEN und/oder CENELEC sind nicht dafr verantwortlich, einige oder alle diesbezglichen Patentrechte zu identifizieren. Entsprechend de
18、r CEN/CENELEC-Geschftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der folgenden Lnder gehalten, diese Europische Norm zu bernehmen: Belgien, Bulgarien, Dnemark, Deutschland, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norw
19、egen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien, Schweden, Schweiz, Slowakei, Slowenien, Spanien, Tschechische Republik, Ungarn, Vereinigtes Knigreich und Zypern. DIN EN 15608:2008-08 EN 15608:2008 (D) 4 1 Anwendungsbereich Diese Europische Norm legt ein Verfahren zur Bestimmung des Massenanteils an freie
20、r Fettsure, FFA, in Alkylamidopropylbetainen fest, der als Menge an Fettsure in Gramm je 100 g des Produkts definiert ist. Validiert wurde dieses Verfahren zur Bestimmung von C6- bis C20-Fettsuren in einem Gesamtkonzentrations-bereich der Fettsure je 100 g des Produkts von 0,02 g/100 g bis grer 3,0
21、g/100 g. 2 Normative Verweisungen Die folgenden zitierten Dokumente sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschlielich aller nde
22、rungen). EN ISO 3696, Wasser fr analytische Laborzwecke Spezifikation und Prfverfahren (ISO 3696:1987) ISO 607, Surface active agents and detergents Methods of sample division 3 Kurzbeschreibung Die Fettsuren werden im sauren pH-Bereich mit Petrolether extrahiert. Die extrahierten Fettsuren werden d
23、erivatisiert und anschlieend mit GLC-FID analysiert. Das Chromatogramm lst die verschiedenen Suren entsprechend ihrer Alkylkettenlnge auf. Zur quantitativen Bestimmung wird die Summe der Peakflchen aller Fettsurehomologen ins Verhltnis zur Peakflche des internen Standards Tridecansure gesetzt. 4 Rea
24、genzien 4.1 Allgemeines WARNUNG Die Vorschriften fr den Umgang mit gefhrlichen Substanzen sind zu beachten. Es sollten technische, organisatorische und persnliche Schutzvorkehrungen getroffen werden. Zur Analyse sind, sofern nicht anders festgelegt, nur Reagenzien bekannter analytischer Reinheit, di
25、e zuvor daraufhin berprft worden sind, dass keine Strkomponenten vorhanden sind, und Wasser der Qualitt 1 nach EN ISO 3696 zu verwenden. 4.2 Tridecansure, Reinheit 99 % (Massenanteil) (CAS-Nr.: 638-53-9). 4.3 Petrolether (40 C bis 60 C) (CAS-Nr.: 101316-46-5). 4.4 Ethanol (CAS-Nr.: 64-17-5). 4.5 HCl
26、, w(HCl) = 37 % (Massenanteil) (CAS-Nr.: 7647-01-0). 4.6 Interne Standardlsung In einen 25-ml-Messkolben sind 0,3 g reine Tridecansure (4.2) auf 0,1 mg einzuwgen, dann ist der Mess-kolben bis zur Marke mit Petrolether aufzufllen. Dies ergibt die interne Standardlsung. 4.7 TMPAH, Trimethylphenylammon
27、iumhydroxid-Lsung, c(TMPAH) etwa 0,5 M in Methanol (CAS-Nr.: 1899-02-1). 4.8 Wasserfreies Methanol (CAS-Nr.: 67-56-1) DIN EN 15608:2008-08 EN 15608:2008 (D) 5 4.9 Wasserfreier Methyl-tert-butylether (CAS-Nr.: 1634-04-4) 4.10 Phenolphthalein (CAS-Nr.: 77-09-8), 1 % in MeOH. 5 Gerte bliche Laborausrst
28、ung und die folgenden Gerte. 5.1 15-ml-Probenglas mit Schraubkappe. 5.2 Gaschromatograph mit Kapillarinjektor mit Split und einem Flammenionisationsdetektor. 5.3 Quarzglas-Kapillarsule mit geeigneter Trennleistung, wie im Chromatogramm im Anhang A gezeigt. 6 Probenahme und Probenvorbereitung Die Pro
29、be muss nach ISO 607 vorbereitet und gelagert werden. 7 Durchfhrung 7.1 Fettsureextraktion 1 g Probe ist auf 0,1 mg in ein 15-ml-Probenglas mit Schraubkappe einzuwgen. Bei Proben mit einem zu erwartenden Massenanteil an freier Fettsure kleiner 1 g/100 g Probe sind etwa 2 g Probe einzuwgen. 5 ml eine
30、s Wasser-Ethanol-Gemisches in einem Volumenverhltnis 1 : 1 sind hinzuzufgen, anschlieend ist zu homogenisieren. Mit einer Przisionspipette ist ein Aliquot von 500 l der internen Standardlsung (4.6) hinzuzufgen. 0,5 ml HCl (4.5) sind zur Ansuerung hinzuzufgen und die Lsung ist zu homogenisieren. Der
31、pH-Wert der Lsung muss kleiner 2 sein. 5 ml Petrolether sind hinzuzufgen. Das Probenglas ist krftig (etwa 1 min) zu schtteln und bis zur Phasentrennung stehen zu lassen (blicher-weise reichen 2 min aus). 7.2 Herstellung des Methylesters (Methylierung mit TMPAH) ANMERKUNG Vor der Analyse werden die a
32、us der Probe extrahierten Fettsuren methyliert, um die Ausbildung eines guten GC-Peaks sicherzustellen, der eine korrekte quantitative Analyse zulsst. Die Methylierung kann mit TMPAH durch eine Reaktion im GLC-Injektor auf einfache Weise durchgefhrt werden. Da dieses Verfahren aber hohe Temperaturen
33、 erfordert, wird die nachfolgende Verwendung einer unpolaren GLC-Sule (100 % Dimethylpolysiloxan) empfohlen. Alternativ dazu kann die Methylierung als eine Reaktion mit Methanol und Bortrifluorid als Katalysator im flssigen Milieu durchgefhrt werden. 500 l des Extrakts (7.1) sind in ein Autosampler-
34、Probenglas (2 ml) hineinzugeben. 500 l eines 1 : 1-Gemisches Methanol/Methyl-tert-butylether (4.8/4.9) sind hinzuzufgen, und es ist grndlich zu durchmischen. Nachfolgend sind 2 Tropfen Phenolphthalein-Lsung (4.10) hinzuzugeben. DIN EN 15608:2008-08 EN 15608:2008 (D) 6 Anschlieend ist TMPAH (4.7) tro
35、pfenweise hinzuzufgen, bis die Lsung nicht mehr entfrbt wird und eine Magentafrbung behlt. Durch Einspritzen von 2 l in den GC ist die Lsung bei einer Injektortemperatur von mindestens 310 C direkt zu analysieren. 7.3 Gaschromatographie GC Die Analyse der Derivate wird durch Kapillar-Gaschromatograp
36、hie durchgefhrt. Es gibt verschiedene Trennsulen unterschiedlicher Polaritt zur Trennung von Fettsuremethylestern. Deren Anwendung kann jedoch durch die Methylierung (siehe 7.2 und B.3) eingeschrnkt sein. In jedem Falle mssen die Retentionszeiten der einzelnen Fettsuren (C6bis C20einschlielich aller
37、 relevan-ten ungesttigten Spezies) mittels einer Referenzanalyse eines Standard-FAME-(Fettsuremethylester)-Gemisches bestimmt werden. Eine geeignete GC-Analyse mittels einer unpolaren Trennsule, einschlielich aller Parameter, ist in An-hang A dargestellt. 8 Berechnung und Angabe der Ergebnisse Der G
38、esamt-Massenanteil an freier Fettsure, w, wird anhand des GLC-Chromatogramms, wie folgt, berech-net und in Gramm je 100 g Probe angegeben: sistdistdistdmRmAAwii= (1) Dabei ist Aidie Peakflche, die jedem einzelnen Fettsurehomologen entspricht, auer dem Peak des internen Standards; Aistddie Peakflche
39、des internen Standards; msdie Einwaage der Probe (7.1), in Gramm; mistddie Einwaage des internen Standards im Aliquot (7.1), in Gramm; Ristddie Reinheit des internen Standards, in Gramm je 100 g. Es wird vorausgesetzt, dass die relativen Response-Faktoren aller Fettsurehomologen, bezogen auf die Tri
40、decansure als interner Standard, denen der C6- bis C20-Fettsuren gleichen (siehe Anhang B). 9 Przision 9.1 Wiederholgrenze Die absolute Differenz zwischen zwei voneinander unabhngigen einzelnen Prfergebnissen, die mit dem-selben Verfahren am identischen Probenmaterial in demselben Laboratorium von d
41、emselben Analytiker mit derselben Apparatur innerhalb eines kurzen Zeitraums gewonnen werden, wird die Wiederholgrenze r nicht in mehr als 5 % der Flle berschreiten. DIN EN 15608:2008-08 EN 15608:2008 (D) 7 9.2 Vergleichgrenze Die absolute Differenz zwischen zwei einzelnen Prfergebnissen, die mit de
42、mselben Verfahren am iden-tischen Probenmaterial in verschiedenen Laboratorien von verschiedenen Analytikern mit unterschiedlichen Apparaturen gewonnen werden, wird die Vergleichgrenze R nicht in mehr als 5 % der Flle berschreiten. 10 Prfbericht Der Prfbericht muss die folgenden Angaben enthalten: a
43、) alle Angaben zur Identifizierung der geprften Probe; b) Hinweis auf diese Europische Norm (EN 15608:2008); c) Prfergebnisse; d) Einzelheiten aller Verfahrensschritte, die nicht in dieser Europischen Norm oder in Europischen Normen, auf die verwiesen wird, festgelegt sind, sowie alle zur Wahl geste
44、llten Verfahrensschritte und alle Ereignisse, die die Ergebnisse beeinflusst haben knnen. DIN EN 15608:2008-08 EN 15608:2008 (D) 8 Anhang A (informativ) Referenz-GLC-Chromatogramm Legende 1 Response 2 Laufzeit Bild A.1 Chromatogramm einer Betainprobe, die 2 % FFA enthlt DIN EN 15608:2008-08 EN 15608
45、:2008 (D) 9 A.1 Einstellungen des Gaschromatographen Es sind 2 l des Probenextrakts in den Gaschromatographen zu injizieren, wobei die folgenden Einstellungen als geeignet erwiesen sind: Sule HP-11)(30 m, 0,32 mm, 0,25 m) Vordruck 15 psi Tinlet/TFID310 C T1(t1) 80 C (2 min) Heizgeschwindigkeit 8 C/m
46、in T2(t2) 300 C (20 min) Nachheizperiode 305 C (10 min) Split 20 ml/min Helium 1) HP-1 (100 % Dimethylpolysiloxan) ist die Herstellerbezeichnung des Produktes, geliefert von Agilent Technologies. Diese Angabe dient nur zur Unterrichtung der Anwender dieser Norm und bedeutet keine Anerkennung des gen
47、annten Produktes durch CEN. DIN EN 15608:2008-08 EN 15608:2008 (D) 10 Anhang B (informativ) Verfahrensvalidierung B.1 Kalibrierung Die einzelnen Kalibrierfaktoren der C8- bis C20-Sure gegen die C13-Sure knnen im Bereich 0,85 bis 1,1 in Abhngigkeit von der Kettenlnge und dem Reinheitszustand des GC v
48、ariieren. Fr die Fettsuren der Kokosnuss wurde ein allgemeiner Durchschnittskorrektionsfaktor von 0,97 bis 1,03 in Abhngigkeit von der einzelnen Kettenlngenverteilung erhalten. Aus praktischen Grnden wird ein relativer Response-Faktor der Fettsuren der Kokosnuss zur Tridecan-sure gleich 1 angenommen
49、. Dadurch entfllt die Notwendigkeit der Kalibriermessungen fr alle einzelnen Fettsuren. Das ist nur zulssig, sofern die Fettsurenverteilung der Betaine nicht von der der Kokosnuss abweicht. Diese muss analysiert werden. Um eine hohe Genauigkeit zu erzielen oder falls die Kettenlngenverteilung von der der Kokosnuss abweicht, wird eine geei
