1、DEUTSCHE NORM Dezember 2003Mikrobiologie von Lebensmitteln und FuttermittelnHorizontales Verfahren fr die Zhlung von koagulase-positiven Staphylokokken(Staphylococcus aureus and anderen Spezies)Teil 2: Verfahren mit Kaninchenplasma/Fibrinogen-Agar (ISO 6888-2:1999 + AMD 1:2003)Deutsche Fassung EN IS
2、O 6888-2:1999 + A1:2003EN ISO 6888-2ICS 07.100.30Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci(Staphylococcus aureus and other species) Part 2: Technique using rabbit plasma fibrinogen agar medium(ISO 6888-2:1999 + AMD 1:2003
3、);German version EN ISO 6888-2:1999 + A1:2003Microbiologie des aliments Mthode horizontale pour le dnombrement des staphylocoques coagulase positive (Staphylococcus aureus et autres espces) Partie 2: Technique utilisant le milieu glos au plasma de lapin et aufibrinogne (ISO 6888-2:1999 + AMD 1:2003)
4、;Version allemande EN ISO 6888-2:1999 + A1:2003Ersatz frDIN EN ISO 6888-2:1999-05Die Europische Norm EN ISO 6888-2:1999 hat den Status einer Deutschen Norm,einschlielich der eingearbeiteten nderung A1:2003, die von CEN getrennt verteiltwurde.Nationales VorwortDiese Europische Norm enthlt unverndert
5、die Internationale Norm ISO 6888-2:1999 + AMD 1:2003, dievom SC 9 Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln (Sekretariat: Frankreich) des TechnischenKomitees ISO/TC 34 Landwirtschaftliche Lebensmittelerzeugnisse (Sekretariat: Ungarn) erarbeitet wurde.Aufgrund der Ergebnisse der parallelen Ab
6、stimmung im Rahmen der Wiener Vereinbarung gilt diese Normebenso als Europische Norm EN ISO 6888-2:1999 + A1:2003.Die Mitarbeit des DIN im SC 9 des ISO/TC 34 und in der Arbeitsgruppe 6 des CEN/TC 275 wird ber denArbeitsausschuss Mikrobiologische Lebensmitteluntersuchung einschlielich Schnellverfahre
7、n desNormenausschusses Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) wahrgenommen.Anlass zur berarbeitung der ISO 6888-2:1999 war die Entscheidung, die Teile 1 und 2 der ISO 6888 alsgleichwertig anzuerkennen, sowie die Einarbeitung der Przisionsdaten.Der Text der nderung ist durch eine senkrec
8、hte Linie am linken Rand gekennzeichnet.Fr die im Abschnitt 2 zitierte Internationale Norm wird im Folgenden auf die entsprechende DeutscheNorm hingewiesen:ISO 6887-1 siehe DIN EN ISO 6887-1ISO 6888-1 siehe DIN EN ISO 6888-1Fortsetzung Seite 2und 17 Seiten ENNormenausschuss Lebensmittel und landwirt
9、schaftliche Produkte (NAL)im DIN Deutsches Institut fr Normung e. V. DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. .Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, Ref. Nr. DIN EN ISO 6888-2:2003-12nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e. V., Berlin, gestattet. Preisgr. 12 Vertr.-Nr. 2
10、312Alleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 BerlinNormCD Stand 2004-03DIN EN ISO 6888-2:2003-122nderungenGegenber DIN EN ISO 6888-2:1999-05 wurden folgende nderungen vorgenommen: nderungen EN ISO 6888-2/A 1:2003 eingearbeitet.Frhere AusgabenDIN EN ISO 6888-2: 1999-05Nationaler Anhang
11、NA(informativ)LiteraturhinweiseDIN EN ISO 6887-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungs-proben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen fr mikrobiologische Untersu-chungen Teil 1: Allgemeine Regeln fr die Herstellung von Erstverdnnunge
12、n und Dezimalverdnnungen(ISO 6887-1:1999); Deutsche Fassung EN ISO 6887-1:1999.DIN EN ISO 6888-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren frdie Zhlung von koagulase-positiven Staphylokokken (Staphylococcus aureus und andere Species) Teil 1: Verfahren mit Baird Parker
13、-Agar (ISO 6888-1:1999 + AMD 1:2003); Deutsche FassungEN ISO 6888-1:1999 + A1:2003.NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-2Mai 1999EUROPISCHE NORMEUROPEAN STANDARDNORME EUROPENNE+A1Juni 2003ICS 07.100.30Deutsche FassungErsatz fr EN ISO 6888-2:1999Mikrobiologie von Lebensmitteln und FuttermittelnHorizontale
14、s Verfahren fr die Zhlung von koagulase-positivenStaphylokokken (Staphylococcus aureus und andere Spezies)Teil 2: Verfahren mit Kaninchenplasma-/Fibrinogen-Agar(ISO 6888-2:1999+AMD 1:2003)Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staph
15、ylococci (Staphylococcus aureus and otherspecies) Part 2: Technique using rabbit plasma fibrinogen agarmedium(ISO 6888-2:1999+AMD 1:2003)Microbiologie des aliments Mthode horizontale pour le dnombrement desstaphylocoques coagulase positive (Staphylococcusaureus et autres espces) Partie 2: Technique
16、utilisant le milieu glos au plasmade lapin et au fibrinogne(ISO 6888-2:1999+AMD 1:2003)Diese Europische Norm wurde von CEN am 1999-02-15 angenommen.Die nderung A1 wurde von CEN am 2. Juni 2003 angenommen.Die CEN-Mitglieder sind gehalten, die CEN/CENELEC-Geschftsordnung zu erfllen, in der die Bedingu
17、ngen festgelegt sind, unter denendieser Europischen Norm ohne jede nderung der Status einer nationalen Norm zu geben ist.Diese Europische Norm wurde vom CEN in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Franzsisch) erstellt. Eine Fassung in eineranderen Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eig
18、ener Verantwortung durch bersetzung in seine Landessprache gemacht und demManagement-Zentrum mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen.CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Dnemark, Deutschland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland
19、,Island, Italien, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, sterreich, Portugal, Schweden, Schweiz, Spanien, der TschechischenRepublik, Ungarn und dem Vereinigten Knigreich.EUROPISCHES KOMITEE FR NORMUNGEUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATIONCOMIT EUROPEN DE NORMALISATIONManagement-Zentrum: rue de Sta
20、ssart, 36 B-1050 Brssel 2003 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchemVerfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten.Ref. Nr. EN ISO 6888-2:1999 + A1:2003 (D)NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-2:1999+A1:2003 (D)2InhaltSeiteVorwort 3Einleitung 41 Anwe
21、ndungsbereich. 52 Normative Verweisungen . 53 Begriffe. 54 Prinzip 55 Verdnnungsflssigkeit und Nhrmedien66 Gerte und Glasgerte 77 Probenahme. 88 Vorbereitung der Untersuchungsprobe 89 Durchfhrung 810 Angabe der Ergebnisse 911 Przision 1012 Untersuchungsbericht 12Anhang A (informativ) Ergebnisse des
22、Ringversuchs 13Anhang ZA (normativ) Normative Verweisungen auf internationale Publikationen mit ihrenentsprechenden europischen Publikationen . 16Literaturhinweise 17NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-2:1999+A1:2003 (D)3VorwortDer Text der Internationalen Norm ISO 6888-2:1999 vom Technischen Komitee IS
23、O/TC 34 Lebensmittel-erzeugnisse der Internationalen Organisation fr Normung (ISO) wurde als Europische Norm EN ISO 6888-2:1999 durch das Technische Komitee CEN/TC 275 Lebensmittelanalytik Horizontale Verfahrenbernommen, dessen Sekretariat vom DIN gehalten wird.Diese Europische Norm muss den Status
24、einer nationalen Norm erhalten, entweder durch Verffentlichungeines identischen Textes oder durch Anerkennung bis August 1999, und etwaige entgegenstehende nationaleNormen mssen bis August 1999 zurckgezogen werden.Entsprechend der CEN/CENELEC-Geschftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der
25、 folgendenLnder gehalten, diese Europische Norm zu bernehmen: Belgien, Dnemark, Deutschland, Finnland,Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, sterreich,Portugal, Schweden, Schweiz, Slowakei, Spanien, Tschechische Republik, Ungarn und das Vereinigte
26、Knigreich.Die erste Ausgabe von ISO 6888-2:1999 zusammen mit ISO 6888-1 ersetzt die ISO 6888:1983, die fachlichberarbeitet wurde.ISO 6888 besteht aus den folgenden Teilen unter dem allgemeinen Titel Mikrobiologie von Lebensmitteln undFuttermitteln Horizontales Verfahren fr die Zhlung von koagulase-p
27、ositiven Staphylokokken(Staphylococcus aureus und andere Spezies). Teil 1: Verfahren mit Baird-Parker-Agar. Teil 2: Verfahren mit Kaninchenplasma/Fibrinogen-Agar.AnerkennungsnotizDer Text der Internationalen Norm ISO 6888-2:1999 wurde vom CEN als Europische Norm ohne irgendeineAbnderung genehmigt.Vo
28、rwort der nderung A1Der Text der nderung EN ISO 6888-2:1999/A1:2003 zur EN ISO 6888-2:1999 des Technischen KomiteesISO/TC 34 Lebensmittelerzeugnisse“ wurde als nderung zur Europischen Norm durch das TechnischeKomitee CEN/TC 275 Lebensmittelanalytik Horizontale Verfahren“, dessen Sekretariat vom DIN
29、gehaltenwird, bernommen.Diese nderung der Europischen Norm EN ISO 6888-2:1999 muss den Status einer nationalen Normerhalten, entweder durch Verffentlichung eines identischen Textes oder durch Anerkennung Januar 2004,und etwaige entgegenstehende nationale Normen mssen bis Januar 2004 zurckgezogen wer
30、den.Entsprechend der CEN/CENELEC-Geschftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der folgendenLnder gehalten, diese Europische Norm zu bernehmen: Belgien, Dnemark, Deutschland, Finnland,Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, sterreich,Portug
31、al, Schweden, Schweiz, Slowakei, Spanien, Tschechische Republik, Ungarn und das VereinigteKnigreich.AnerkennungsnotizDer Text der nderung zu der Internationalen Norm ISO 6888-2:1999/AMD 1:2003 wurde von CEN als nde-rung zur Europische Norm ohne irgendeine Abnderung genehmigt.ANMERKUNG Die normativen
32、 Verweisungen auf Internationale Normen sind im Anhang ZA (normativ) aufgefhrt.NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-2:1999+A1:2003 (D)4Einleitung0.1 Wegen der Vielzahl von Lebensmitteln und Futtermitteln kann dieses horizontale Verfahren nicht bis insEinzelne fr bestimmte Produkte geeignet sein. In diese
33、m Falle drfen unterschiedliche Verfahren, diespeziell auf diese Produkte zutreffen, angewendet werden, wenn dies aus fachlichen Grnden absolutnotwendig ist. Dennoch sollte stets versucht werden, diesem horizontalen Verfahren so weit wie mglich zufolgen.Bei der nchsten berarbeitung von ISO 6888 werde
34、n smtliche dann zur Verfgung stehendenInformationen ber die Akzeptanz dieser Norm und die Grnde fr Abweichungen bei einzelnen Produktenbercksichtigt werden.Die Harmonisierung der Untersuchungsverfahren kann nicht sofort erfolgen. Fr bestimmte Produktgruppenknnen bereits Internationale Normen und/ode
35、r nationale Normen bestehen, die diesen Regeln nichtentsprechen. Es ist jedoch anzustreben, sie bei einer berarbeitung an diesen Teil von ISO 6888anzupassen, so dass es sich bei den noch verbleibenden Abweichungen nur um solche handelt, die fachlichbegrndet sind.0.2 ISO 6888 beschreibt zwei horizont
36、ale Verfahren (Teil 1 und Teil 2) fr die Zhlung von koagulase-positiven Staphylokokken, zu denen enterotoxische Stmme gezhlt werden. Hier ist hauptschlichStaphylococcus aureus gemeint, aber auch S. intermedius und einige Stmme von S. hyicus.Beide Teile der ISO 6888 sind gleichwertig. ISO 6888-2 wird
37、 fr solche Lebensmittel (wie z. B. Rohmilchkseund bestimmte rohe Fleischerzeugnisse) empfohlen, die wahrscheinlich kontaminiert sind durch: Staphylokokken, die auf Baird-Parker-Agar atypische Kolonien bilden, oder Begleitflora, die die gesuchten Kolonien berdecken kann.0.3 In diesem Teil von ISO 688
38、8 beruht die Besttigung von Staphylococcus aureus auf einer starkpositiven Koagulase-Reaktion. Es ist jedoch zu beachten, dass einige Stmme von Staphylococcus aureusschwach positive Koagulase-Reaktionen aufweisen. Diese letztgenannten Stmme knnen mit anderenKeimen verwechselt werden. Sie knnen jedoc
39、h von diesen Keimen mit zustzlichen Prfungen, die nicht indiesem Teil von ISO 6888 enthalten sind, unterschieden werden, wie z. B. anhand der Lysostaphin-Empfindlichkeit und der Bildung von Hmolysin, von Thermonuklease und von Mannit (siehe Literaturhinweise1).NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-2:1999+
40、A1:2003 (D)51 AnwendungsbereichDieser Teil von ISO 6888 beschreibt ein horizontales Verfahren fr die Zhlung von koagulase-positivenStaphylokokken in Lebensmitteln und Futtermitteln. Die nach aerober Inkubation bei 35 C oder 37 C aufeinem festen Medium (Kaninchenplasma/Fibrinogen-Agar) erhaltenen Kol
41、onien werden gezhlt (sieheLiteraturhinweise 2).2 Normative VerweisungenDie folgenden zitierten Dokumente sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datiertenVerweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzteAusgabe des in Bezug genommenen
42、 Dokuments (einschlielich aller nderungen).ISO 6887-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs Preparation of test samples, initial suspensionand decimal dilutions for microbiological examination Part 1: General rules for the preparation of the initialsuspension and decimal dilutions.ISO 6888
43、-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal method for the enumeration ofcoagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) Part 1: Technique usingBaird-Parker agar medium.ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs General rules for microbiolog
44、ical examination.3 BegriffeFr die Anwendung dieses Dokuments gelten die folgenden Begriffe.3.1koagulase-positive StaphylokokkenMikroorganismen, die auf einem selektiven Kaninchenplasma/Fibrinogen-Agar typische Kolonien bilden, wenndie Untersuchung nach diesem Teil von ISO 6888 durchgefhrt wird3.2Zhl
45、ung von koagulase-positiven StaphylokokkenBestimmung der Anzahl von koagulase-positiven Staphylokokken in einem Milliliter oder einem Gramm Probe,wenn die Untersuchung nach diesem Teil von ISO 6888 durchgefhrt wurde4 Prinzip4.1 Gussplatten mit Kaninchenplasma/Fibrinogen-Agar werden im Doppelansatz m
46、it einer festgelegtenMenge an Untersuchungsprobe bei flssigen Proben oder mit einer festgelegten Menge an Erstverdnnungbei anderen Proben hergestellt.Unter denselben Bedingungen werden zwei Platten je Verdnnungsstufe mit Dezimalverdnnungen derUntersuchungsprobe oder mit der Erstverdnnung beimpft.4.2
47、 Die Platten werden 18 h bis 24 h oder, wenn erforderlich, weitere 24 h bei 35 C oder 37 C1)bebrtet.4.3 Die Anzahl der koagulase-positiven Staphylokokken je Milliliter oder je Gramm der Probe wird aus derAnzahl der typischen Kolonien je Petrischale errechnet.1) Die Temperatur wird zwischen den betre
48、ffenden Partnern vereinbart und im Untersuchungsbericht festgehalten.NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-2:1999+A1:2003 (D)65 Verdnnungsflssigkeit und Nhrmedien5.1 AllgemeinesZur blichen Laborpraxis siehe ISO 7218.5.2 VerdnnungsflssigkeitSiehe ISO 6887-1 und die spezielle Norm fr das zu untersuchende Pr
49、odukt.5.3 Kaninchenplasma/Fibrinogen-Agar (siehe 3 und 4)ANMERKUNG Kommerziell erhltliche Medien, die in bereinstimmung mit ISO 6888-2 sind, knnen verwendetwerden. Da sich jedoch die kommerziell erhltlichen Medien sehr stark unterscheiden, wird empfohlen, jede Charge derRinderfibrinogen/Kaninchenplasma-Lsungen vor der Verwendung mit positiven und negativ
