1、Januar 2007 Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) im DINPreisgruppe 9DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin, gestattet.ICS 65.120!,d8/“9652112www.din.
2、deDVornormDIN ISO/TS 17764-1Futtermittel Bestimmung des Gehaltes an Fettsuren Teil 1: Vorbereitung von Methylestern (ISO/TS 17764-1:2002);Deutsche Fassung CEN ISO/TS 17764-1:2006Animal feeding stuffs Determination of the content of fatty acids Part 1: Preparation of methyl esters (ISO/TS 17764-1:200
3、2);German version CEN ISO/TS 17764-1:2006Aliments des animaux Dtermination de la teneur en acides gras Partie 1: Prparation des esters mthyliques (ISO/TS 17764-1:2002);Version allemande CEN ISO/TS 17764-1:2006Alleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlin www.beuth.deGesamtumfang 12
4、SeitenDIN ISO/TS 17764-1:2007-01 2 Nationales Vorwort Die Technische Spezifikation ISO/TS 17764-1:2002 wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 327 Futtermittel Probenahme- und Untersuchungsverfahren“ (Sekretariat: NEN, Niederlande) des Europischen Komitees fr Normung in Zusammenarbeit mit dem Technisch
5、en Komitee ISO/TC 34 Lebensmittelprodukte“ (Sekretariat: MSZT, Ungarn) erarbeitet. Eine Mitarbeit des DIN im CEN/TC 327 erfolgt derzeit nicht, da von Seiten der betroffenen Wirtschaftskreise kein Interesse an diesen Normungsarbeiten bekundet wird. Thematisch zustndig ist der Normenausschuss Lebensmi
6、ttel und landwirtschaftliche Produkte (NAL). Eine Vornorm ist das Ergebnis einer Normungsarbeit, das wegen bestimmter Vorbehalte zum Inhalt oder wegen des gegenber einer Norm abweichenden Aufstellungsverfahrens vom DIN noch nicht als Norm herausgegeben wird. Zur vorliegenden Vornorm wurde kein Entwu
7、rf verffentlicht. Erfahrungen mit dieser Vornorm sind erbeten an vorzugsweise als Datei per E-Mail an naldin.de in Form einer Tabelle. Die Vorlage dieser Tabelle kann im Internet unter http:/www.din.de/stellungnahme abgerufen werden; oder in Papierform an den Normenausschuss Lebensmittel und landwir
8、tschaftliche Produkte (NAL) im DIN Deutsches Institut fr Normung e. V., 10772 Berlin (Hausanschrift: Burggrafenstrae 6, 10787 Berlin). Fr die in diesem Dokument zitierten Internationalen Normen wird im Folgenden auf die entsprechenden Deutschen Normen hingewiesen: ISO 661 siehe DIN EN ISO 661 ISO 36
9、96 siehe DIN ISO 3696 Nationaler Anhang NA (informativ) Literaturhinweise DIN EN ISO 661, Tierische und pflanzliche Fette und le Vorbereitung der Untersuchungsprobe DIN ISO 3696, Wasser fr analytische Zwecke Anforderungen und Prfungen Vornorm TECHNISCHE SPEZIFIKATION TECHNICAL SPECIFICATION SPCIFICA
10、TION TECHNIQUE CEN ISO/TS 17764-1 Oktober 2006 ICS 65.120 Deutsche Fassung Futtermittel Bestimmung des Gehaltes an Fettsuren Teil 1: Vorbereitung von Methylestern (ISO/TS 17764-1:2002) Animal feeding stuffs Determination of the content of fatty acids Part 1: Preparation of methyl esters (ISO/TS 1776
11、4-1:2002) Aliments des animaux Dtermination de la teneur en acides gras Partie 1: Prparation des esters mthyliques (ISO/TS 17764-1:2002) Diese Technische Spezifikation (CEN/TS) wurde vom CEN am 13. Februar 2006 als eine knftige Norm zur vorlufigen Anwendungangenommen. Die Gltigkeitsdauer dieser CEN/
12、TS ist zunchst auf drei Jahre begrenzt. Nach zwei Jahren werden die Mitglieder des CEN gebeten, ihreStellungnahmen abzugeben, insbesondere ber die Frage, ob die CEN/TS in eine Europische Norm umgewandelt werden kann. Die CEN Mitglieder sind verpflichtet, das Vorhandensein dieser CEN/TS in der gleich
13、en Weise wie bei einer EN anzukndigen und die CEN/TS verfgbar zu machen. Es ist zulssig, entgegenstehende nationale Normen bis zur Entscheidung ber eine mgliche Umwandlungder CEN/TS in eine EN (parallel zur CEN/TS) beizubehalten. CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Dnem
14、ark, Deutschland, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland,Irland, Island, Italien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien,Schweden, der Schweiz, der Slowakei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, Ungarn, dem Vereinigten Kni
15、greich und Zypern.EUROPISCHES KOMITEE FR NORMUNG EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION COMIT EUROPEN DE NORMALISATIONManagement-Zentrum: rue de Stassart, 36 B-1050 Brssel 2006 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern v
16、on CEN vorbehalten.Ref. Nr. CEN ISO/TS 17764-1:2006 DCEN ISO/TS 17764-1:2006 (D) 2 Inhalt Seite Vorwort 3 1 Anwendungsbereich .4 2 Normative Verweisungen4 3 Fettextraktion .4 3.1 Allgemeines4 3.2 Proben der Kategorie A.4 3.3 Proben der Kategorie B.5 4 Vorbereitung der Untersuchungsprobe des Fettes o
17、der des Fettextrakts5 5 Verfahren zur Herstellung von Fettsuremethylestern mit sechs oder mehr C-Atomen (BF3-Verfahren) 5 5.1 Kurzbeschreibung .5 5.2 Reagenzien.5 5.3 Prfeinrichtung 6 5.4 Durchfhrung.6 6 Verfahren zur Herstellung von Methylestern aus Fettsuren mit 4 oder mehr C-Atomen (KOH/HCl-Verfa
18、hren) .8 6.1 Kurzbeschreibung .8 6.2 Reagenzien.8 6.3 Prfeinrichtung 8 6.4 Durchfhrung.9 7 Lagerung.9 8 Untersuchungsbericht . 10 Vornorm CEN ISO/TS 17764-1:2006 (D) 3 Vorwort Der Text von ISO/TS 17764-1:2002 wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 34 Lebensmittelprodukte“, Unterkomitee SC 10 Futtermit
19、tel“ der Internationalen Organisation fr Normung (ISO) erarbeitet und als CEN ISO/TS 17764-1:2006 durch das Technische Komitee CEN/TC 327 Futtermittel Probenahme und Untersuchungsverfahren“ bernommen, dessen Sekretariat vom NEN gehalten wird. Entsprechend der CEN/CENELEC-Geschftsordnung sind die nat
20、ionalen Normungsinstitute der folgenden Lnder gehalten, diese Technische Spezifikation anzukndigen: Belgien, Dnemark, Deutschland, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien, Sc
21、hweden, Schweiz, Slowakei, Slowenien, Spanien, Tschechische Republik, Ungarn, Vereinigtes Knigreich und Zypern. ISO/TS 17764 mit dem allgemeinen Titel Futtermittel Bestimmung des Gehaltes an Fettsuren besteht aus folgenden Teilen: Teil 1: Vorbereitung von Methylestern Teil 2: Gaschromatographisches
22、Verfahren Anerkennungsnotiz Der Text von ISO/TS 17764-1:2002 wurde vom CEN als CEN ISO/TS 17764-1:2006 ohne irgendeine Abnderung genehmigt. Vornorm CEN ISO/TS 17764-1:2006 (D) 4 1 Anwendungsbereich ISO/TS 17764 legt Verfahren zur quantitativen Bestimmung von einzelnen Fettsuren und der Gesamtmenge a
23、n Fettsuren (eluierbare Fettsuren) fest. Dieser Teil von ISO/TS 17764 legt zwei Verfahren zur Herstellung der Methylester von als Rohstoffe fr Futtermittelmischungen vorgesehenen Fettsuren aus tierischen und pflanzlichen Fetten, len und Fettsure-Gemischen bzw. von Fettsuren, die aus Fettextrakten de
24、r Futtermittel stammen, einschlielich der Fette und Fettsure-Gemische, die Buttersure enthalten, fest. Das allgemeine Verfahren, das Bortrifluorid-(BF3-)Verfahren, betrifft die Herstellung von Methylester aus Fettsuren mit sechs oder mehr C-Atomen, die aus Fetten, len und freien Fettsuren stammen. D
25、as KOH/HCl-Verfahren befasst sich mit der Herstellung der Methylester von Fettsuren mit vier oder mehr C-Atomen. Dieses Verfahren kann auch fr die quantitative Bestimmung der Fettsuren mit einer Kettenlnge von weniger als zehn C-Atomen in Gemischen freier Fettsuren angewandt werden. Die hergestellte
26、n Methylester knnen fr die Gas-Verteilungschromatographie (GLC) verwendet werden. ANMERKUNG 1 Die nicht verseifbaren Stoffe werden nicht entfernt und knnen, wenn sie in betrchtlichen Mengen vorhanden sind, die chromatographische Analyse stren. ANMERKUNG 2 ISO/TS 17764-2 beschreibt die Anwendung der
27、Gaschromatographie mit Kapillarsulen und Flammenionisationsdetektion fr die Bestimmung des Gehaltes an Fettsuren in einem Fett, wofr die Methylester der Fettsuren, die in bereinstimmung mit dem in diesem Teil von ISO/TS 17764 festgelegten Verfahren hergestellt wurden, verwendet werden. 2 Normative V
28、erweisungen Die folgenden zitierten Dokumente sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschlielich aller nderungen). ISO 661:1989,
29、 Animal and vegetable fats and oils Preparation of test sample ISO 3696:1987, Water for analytical laboratory use Specification and test methods ISO 6492:1999, Animal feeding stuffs Determination of fat content 3 Fettextraktion 3.1 Allgemeines Zur Bestimmung des Gehaltes der verseifbaren Fettsuren i
30、n einem Futtermittel ist das Fett in bereinstim-mung mit der Futtermittelkategorie wie in ISO 6492:1999 beschrieben mit den folgenden nderungen zu extrahieren. 3.2 Proben der Kategorie A Es ist eine Fettextraktion nach ISO 6492:1999, 9.5.1 durchzufhren. Das Lsemittel ist mit einem Rotationsverdampfe
31、r in einem Wasserbad bei einer Temperatur von nicht mehr als 40 C zu verdampfen. Der Rckstand ist fr 2 h in einem Vakuumtrockenschrank bei (40 2) C zu trocknen. Vornorm CEN ISO/TS 17764-1:2006 (D) 5 3.3 Proben der Kategorie B Die Extraktion des Fettes erfolgt in zwei Schritten. Fr den ersten Schritt
32、, durchgefhrt nach ISO 6492:1999, 9.5.1, ist die Prfmenge, wie in ISO 6492:1999, 9.3 beschrieben, als eine Probe der Kategorie A zu behandeln. Der Fettextrakt ist in einem trockenen Kolben zu sammeln. Die Extraktionshlse ist an der Luft stehen zu lassen, damit das Lsemittel vom Rckstand verdampfen k
33、ann. Es ist eine Hydrolyse des Rckstandes nach ISO 6492:1999, 9.4 durchzufhren. Nach der Hydrolyse folgt das Trocknen des Rckstands in einer Extraktionshlse in einem Vakuumtrocken-schrank fr 60 min bei (40 2) C. Der Rckstand ist nach ISO 6492:1999, 9.5.1 zu extrahieren. Der Fettextrakt ist mit dem e
34、rsten Extrakt zu vereinigen. Das Lsemittel ist mit einem Rotationsverdampfer in einem Wasserbad bei einer Temperatur von nicht mehr als 40 C zu verdampfen, und der Rckstand ist fr 2 h in einem Vakuumtrockenschrank bei (40 2) C zu trocknen. 4 Vorbereitung der Untersuchungsprobe des Fettes oder des Fe
35、ttextrakts Falls die Fettprobe oder der Fettextrakt nicht vollstndig geschmolzen vorliegt, ist die Untersuchungsprobe bei einer Temperatur von nicht mehr als 10 C oberhalb der Schmelztemperatur des Fettes zu erwrmen. Siehe ISO 661. 5 Verfahren zur Herstellung von Fettsuremethylestern mit sechs oder
36、mehr C-Atomen (BF3-Verfahren) 5.1 Kurzbeschreibung Die Glyceride werden mit methanolischer Natriumhydroxidlsung verseift. Die Seifen werden durch Reaktion mit einem Bortrifluorid-Methanol-Komplex in Methylester umgewandelt. 5.2 Reagenzien Es sind nur Reagenzien und Lsungen von anerkannter Analysenre
37、inheit zu verwenden. 5.2.1 Wasser, entsprechend der Qualitt 3 nach ISO 3696:1987. 5.2.2 Heptadecansure (interner Standard), mindestens 99 % Reinheit. 5.2.3 Natriumhydroxid, methanolische Lsung, c(NaOH) 0,5 mol/l. 2 g Natriumhydroxid sind in 100 ml Methanol zu lsen, das nicht mehr als 0,5 % (Massenan
38、teil) Wasser enthlt. Wenn die Lsung fr eine lngere Zeit aufbewahrt werden muss, kann sich eine kleine Menge eines weien Natriumcarbonatniederschlages bilden; das hat keinen Einfluss auf die Herstellung der Methylester. An Stelle von Natriumhydroxid kann eine methanolische Lsung von Kaliumhydroxid mi
39、t der gleichen Konzen-tration verwendet werden. 5.2.4 Bortrifluorid (BF3), methanolische Lsung, 10 % bis 15 % (Massenanteil) Vornorm CEN ISO/TS 17764-1:2006 (D) 6 WARNUNG Bortrifluorid ist giftig. Aus diesem Grund ist nicht zu empfehlen, dass der Analytiker die methanolische Lsung von Bortrifluorid
40、aus Methanol und Bortrifluorid selbst herstellt. Die Lsungen sind im Handel erhltlich. Bei der gaschromatographischen Analyse der Methylester knnen bestimmte Reagenzien Peaks bewirken, die die Analyse stren. Insbesondere knnen BF3-Lsungen Peaks im Bereich der Methylester von Fett-suren mit 20 oder 2
41、2 C-Atomen verursachen. Es wird empfohlen, die Reagenzien zu berprfen, indem der lsuremethylester hergestellt und anschlieend mit einer gaschromatographischen Analyse untersucht wird. Reagenzien drfen keine Peaks bewirken, die die gaschromatographische Analyse der Fettsuremethylester stren. 5.2.5 n-
42、Hexan oder n-Heptan. 5.2.6 Natriumchlorid, gesttigte wssrige Lsung. 5.2.7 Natriumsulfat, wasserfrei. 5.3 Prfeinrichtung bliche Laborausrstung, insbesondere die folgende: 5.3.1 Rundkolben, Fassungsvermgen von 50 ml, mit Schliffhals und Schliffstopfen. 5.3.2 Siedesteinchen (Siedehilfe), fettfrei. 5.3.
43、3 Rckflusskhler, effektive Lnge von 20 cm bis 30 cm, mit Schliffverbindung zum Anschluss an den Kolben. 5.3.4 Messpipette mit einem Fassungsvermgen von mindestens 10 ml und einem Pipettierball aus Gummi, oder eine automatische Pipette. 5.3.5 Flschchen mit Schraubverschluss. 5.4 Durchfhrung 5.4.1 All
44、gemeines Auf Grund der Giftigkeit des Bortrifluorids ist die Methylierung am besten unter einem belfteten Abzug durch-zufhren. Es ist wichtig, alle Glasgerte unmittelbar nach dem Gebrauch mit Wasser auszuwaschen. Wenn die Fettsuren mehr als zwei Doppelbindungen enthalten, wird empfohlen, die Luft au
45、s dem Kolben durch Hindurchleiten von Stickstoff mit einem Sauerstoffgehalt von weniger als 5 mg/kg fr einige Minuten durch die Lsung zu entfernen und dann einen Stickstoffstrom im oberen Teil des Rckflusskhlers whrend der nachfolgenden Verseifung aufrechtzuerhalten. Wenn Methylester von Fettsuren f
46、r die Gas-Verteilungschromatographie hergestellt werden, darf das Lse-mittel nicht aus der Lsung der Methylester entfernt werden. 5.4.2 Prfmenge In einen Rundkolben (5.3.1) sind 100 mg bis 250 mg der vorbereiteten Untersuchungsprobe (Abschnitt 4) auf 0,1 mg einzuwgen. Als interner Standard ist in de
47、n Kolben Heptadecansure (5.2.2) mit einer auf 0,1 mg gewogenen Masse von etwa 20 % der Masse der Untersuchungsprobe zuzufgen. In einen zweiten Rundkolben ist annhernd die gleiche Menge der vorbereiteten Untersuchungsprobe einzuwgen. Beide Kolben sind in der gleichen Weise folgendermaen zu behandeln.
48、 Vornorm CEN ISO/TS 17764-1:2006 (D) 7 Betrifft die Prfmenge ein Fett oder l, ist nach 5.4.3 fortzufahren. Ist die Prfmenge ausschlielich aus freien Fettsuren oder Seifen zusammengesetzt, ist nach 5.4.5 fortzu-fahren. Wenn das Probenmaterial nicht ausreicht, darf eine Prfmenge von weniger als 100 mg
49、 verwendet werden. Die vorgeschriebenen Reagenzien und Lsemittel mssen proportional reduziert und das Volumen der Apparatur dementsprechend angepasst werden. 5.4.3 Verseifung Es sind 4 ml methanolische Natriumhydroxidlsung (5.2.3) und Siedesteinchen (5.3.2) hinzuzufgen. Der Rckflusskhler (5.4.3) ist auf d
