1、Mai 2010 Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) im DINPreisgruppe 8DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin, gestattet.ICS 07.100.30!$)I“1570638www.din.d
2、eDVornormDIN V 10224Leitfaden fr empfohlene mikrobiologische Prfverfahren fr Gewrzeund wrzende ZutatenGuidance for recommended microbiological test methods for spices and condimentsGuide pour des mthodes dessai microbiologiques recommandes pour des pices etdes aromatesAlleinverkauf der Normen durch
3、Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlin www.beuth.deGesamtumfang 11 SeitenDIN V 10224:2010-05 Inhalt Seite Vorwort . 3 Einleitung 4 1 Anwendungsbereich 5 2 Normative Verweisungen. 5 3 Begriffe 7 4 Probenvorbereitung 7 5 Empfohlene Nachweis- und Bestimmungsverfahren . 7 Literaturhinweise . 11 2 Vornorm DIN V
4、 10224:2010-05 Vorwort Diese Vornorm wurde vom NA 057-05-07 AA Gewrze und wrzende Zutaten“ des Normenausschusses Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) erarbeitet. Zum Zeitpunkt der Erstellung der Vornorm gab es keine bereits bestehende Norm, in der ein Leitfaden fr empfohlene mikrobiol
5、ogische Prfverfahren fr Gewrze und wrzende Zutaten aufgefhrt ist, auf welche verwiesen werden konnte. Eine Vornorm ist das Ergebnis einer Normungsarbeit, das wegen bestimmter Vorbehalte zum Inhalt oder wegen des gegenber einer Norm abweichenden Aufstellungsverfahrens vom DIN noch nicht als Norm hera
6、usgegeben wird. Zur vorliegenden Vornorm wurde kein Entwurf verffentlicht. Erfahrungen mit dieser Vornorm sind erbeten vorzugsweise als Datei per E-Mail an naldin.de in Form einer Tabelle. Die Vorlage dieser Tabelle kann im Internet unter http:/www.din.de/stellungnahme abgerufen werden; oder in Papi
7、erform an den Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) im DIN, 10772 Berlin (Hausanschrift: Burggrafenstr. 6, 10787 Berlin). 3 DIN V 10224:2010-05 Einleitung Diese Vornorm gibt eine bersicht von Verfahren zum Nachweis und zur Bestimmung von Mikroorganismen, die bei der Prf
8、ung von Gewrzen und wrzenden Zutaten empfohlen werden. Die aufgefhrten Mikro-organismen legen kein Untersuchungsspektrum fest. Es wurden reprsentative Mikroorganismen gewhlt, fr die von der Deutschen Gesellschaft fr Hygiene und Mikrobiologie (DGHM) empfohlene Richt- und Warnwerte existieren oder die
9、 gleichzeitig im Rahmen von Anforderungen der Industrie und/oder des Handels relevant sind. Bei der Auswahl der empfohlenen Prfverfahren wurden, so weit mglich, Internationale Normen berck-sichtigt und die Vergleichbarkeit zu nationalen Normen und Untersuchungsverfahren geprft. Horizontale Ver-fahre
10、n gelten fr eine Vielzahl von Lebensmitteln und sind nicht unbedingt bis ins Einzelne fr alle Produkte geeignet. Aus diesem Grund wurden fr Gewrze und wrzende Zutaten zu den empfohlenen Verfahren“ auch wesentliche Modifikationen und vergleichbare Verfahren“ mit deren Modifikationen in die Tabelle 1
11、aufgenommen. Wo angegeben, muss sowohl die Vergleichbarkeit der Modifikation mit dem empfohlenen Verfahren als auch die Vergleichbarkeit der vergleichbaren Verfahren“ und deren Modifikationen mit dem empfohlenen Verfahren“ in Laboruntersuchungen berprft werden. Dafr ist ein Zeitraum von drei Jahren
12、(Laufzeit der Vornorm) vorgesehen. 4 Vornorm DIN V 10224:2010-05 1 Anwendungsbereich In dieser Vornorm sind die Normen und Verfahren zum Nachweis und zur Bestimmung von Mikroorganismen in Gewrzen und wrzenden Zutaten aufgestellt. 2 Normative Verweisungen Die folgenden zitierten Dokumente sind fr die
13、 Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschlielich aller nderungen). DIN 10103, Mikrobiologische Untersuchung von Fleisch und Fleischerzeug
14、nissen Bestimmung von meso-philen sulfitreduzierenden Clostridien Plattengussverfahren (Referenzverfahren) DIN 10120, Untersuchung von Lebensmitteln Nachweis von Salmonellen mittels Impedanz-Verfahren DIN 10135, Verfahren zum Nachweis von Salmonellen mit der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) DIN 10161
15、-1, Mikrobiologische Untersuchung von Fleisch und Fleischerzeugnissen Bestimmung der aeroben Keimzahl bei 30 C Spatel- und Plattengussverfahren (Referenzverfahren) DIN EN ISO 4833, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren fr die Zh-lung von Mikroorganismen Koloniezhlv
16、erfahren bei 30 C DIN EN ISO 6579, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren zum Nach-weis von Salmonella spp. DIN EN ISO 6887-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungs-proben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimal
17、verdnnungen fr mikrobiologische Untersuchungen Teil 1: Allgemeine Regeln fr die Herstellung von Erstverdnnungen und Dezimal-verdnnungen DIN EN ISO 6887-4, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungs-proben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnn
18、ungen fr mikrobiologische Untersuchungen Teil 4: Spezifische Regeln fr die Vorbereitung von anderen Erzeugnissen als Milch und Milcherzeugnissen, Fleisch und Fleischerzeugnissen, Fisch und Fischerzeugnissen DIN EN ISO 6888-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren f
19、r die Zh-lung von koagulase-positiven Staphylokokken (Staphylococcus aureus und andere Species) Teil 1: Ver-fahren mit Baird-Parker-Agar DIN EN ISO 6888-2, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren fr die Zh-lung von koagulase-positiven Staphylokokken (Staphylococcus a
20、ureus und andere Spezies) Teil 2: Ver-fahren mit Kaninchenplasma-/Fibrinogen-Agar DIN EN ISO 7932, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren zur Zhlung von prsumtivem Bacillus cereus Koloniezhlverfahren bei 30 C DIN EN ISO 22174, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Fut
21、termitteln Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zum Nachweis von pathogenen Mikroorganismen in Lebensmitteln Allgemeine Anforderungen und Begriffe DIN ISO 16649-2, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren fr die Zh-lung von -glucuronidase-positiven-Escherichia-coli Teil 2:
22、 Koloniezhlverfahren bei 44 C mit 5-Brom-4-Chlor-3-Indol-D-Glucuronsure DIN ISO 21528-2, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren zum Nach-weis und zur Zhlung von Enterobacteriaceae Teil 2: Koloniezhltechnik ISO 4832, Microbiology of food and animal feeding stuffs Hor
23、izontal method for the enumeration of coliforms Colony-count technique 5 Vornorm DIN V 10224:2010-05 ISO 7954, Microbiology General guidance for enumeration of yeasts and moulds Colony count technique at 25 C (ersetzt durch ISO 21527-1 und ISO 21527-2) ISO 15213, Microbiology of food and animal feed
24、ing stuffs Horizontal method for the enumeration of sulfite-reducing bacteria growing under anaerobic ISO 21527-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal method for the enumeration of yeasts and moulds Part 1: Colony count technique in products with water activity greater than 0,9
25、5 ISO 21527-2, Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal method for the enumeration of yeasts and moulds Part 2: Colony count technique in products with water activity less than or equal to 0,95 LFGB L 00.00-20, Untersuchung von Lebensmitteln Horizontales Verfahren zum Nachweis von S
26、almonella spp. in Lebensmitteln (nach DIN EN ISO 6579) LFGB L 00.00-25, Untersuchung von Lebensmitteln Bestimmung prsumtiver Bacillus cereus in Lebens-mitteln Koloniezhlverfahren (nach DIN 10198-1) LFGB L 00.00-33, Untersuchung von Lebensmitteln Horizontales Verfahren zur Zhlung von prsumtivem Bacil
27、lus cereus in Lebensmitteln Koloniezhlverfahren bei 3 C (nach DIN EN ISO 7932) LFGB L 00.00-52, Untersuchung von Lebensmitteln Verfahren zum Nachweis von Salmonellen in Lebens-mitteln mit der Polymerase-Kettenreaktion (nach DIN 10135) LFGB L 00.00-55, Untersuchung von Lebensmitteln Verfahren fr die
28、Zhlung von koagulase-positiven Staphylokokken (Staphylococcus aureus und anderen Spezies) in Lebensmitteln Teil 1: Verfahren mit Baird Parker Agar (nach DIN EN ISO 6888-1) LFGB L 00.00-56, Untersuchung von Lebensmitteln Verfahren fr die Zhlung von koagulase-positiven Staphylokokken (Staphylococcus a
29、ureus und anderen Spezies) in Lebensmitteln Teil 2: Verfahren mit Kaninchenplasma/Fibrinogen-Agar (nach DIN EN ISO 6888-2) LFGB L 00.00-67, Untersuchung von Lebensmitteln Nachweis von Salmonellen in Lebensmitteln mittels Impedanz-Verfahren (nach DIN 10120) LFGB L 00.00-88, Untersuchung von Lebensmit
30、teln Horizontales Verfahren fr die Zhlung von Mikro-organismen Koloniezhlverfahren bei 30 C (nach DIN EN ISO 4833) LFGB L 00.00-89, Untersuchung von Lebensmitteln Vorbereitung von Untersuchungsproben und Her-stellung von Erstverdnnungen und Dezimalverdnnungen fr mikrobiologische Untersuchungen von L
31、ebens-mitteln Spezifische Regeln fr die Vorbereitung von anderen Erzeugnissen als Milch und Milcherzeugnisse, Fleisch und Fleischerzeugnisse, Fisch und Fischerzeugnisse (nach DIN EN ISO 6887-4) LFGB L 01.00-3, Untersuchung von Lebensmitteln Bestimmung der coliformen Keime in Milch, Milch-produkten,
32、Butter, Kse und Speiseeis Verfahren mit festem Nhrboden LFGB L 01.00-37, Untersuchung von Lebensmitteln Bestimmung der Anzahl von Hefen und Schimmel-pilzen in Milch und Milchprodukten Referenzverfahren LFGB L 05.00-5, Untersuchung von Lebensmitteln Bestimmung von Enterobacteriaceae in Eiern, Eiprodu
33、kten, Mayonnaisen, emulgierten Soen und kalten Fertigsoen Gussverfahren (Referenzverfahren) LFGB L 06.00-18, Untersuchung von Lebensmitteln Bestimmung der aeroben Keimzahl bei 30 C in Fleisch und Fleischerzeugnissen Spatel- und Plattengussverfahren (Referenzverfahren) (nach DIN 10161-1) LFGB L 06.00
34、-24, Untersuchung von Lebensmitteln Bestimmung von Enterobacteriaceae in Fleisch Spatelverfahren (Referenzverfahren) (nach DIN 10164-1) LFGB L 06.00-39, Untersuchung von Lebensmitteln Bestimmung von mesophilen sulfitreduzierenden Clostridien in Fleisch und Fleischerzeugnissen Plattengussverfahren (R
35、eferenzverfahren) (nach DIN 10103) 6 Vornorm DIN V 10224:2010-05 7 3 Begriffe Fr die Anwendung dieses Dokuments gelten die Begriffe, die in den einschlgigen Normen definiert sind. 4 Probenvorbereitung Die Vorbereitung der Untersuchungsproben fr mikrobiologische Untersuchungen erfolgt nach DIN EN ISO
36、 6887-1, DIN EN ISO 6887-4 und LFGB L 00.00-89. Die produktspezifischen Besonderheiten sind dabei zu beachten. 5 Empfohlene Nachweis- und Bestimmungsverfahren Die nachfolgende Tabelle 1 gibt eine bersicht der empfohlenen und vergleichbaren Verfahren mit nach diesem Leitfaden gestellten (tolerierbare
37、n) Modifikationen und relevanten Anmerkungen. Vornorm DIN V 10224:2010-05 8 Tabelle 1 bersicht empfohlener Verfahren zur Bestimmung von Keimen/Keimarten in Gewrzen und wrzenden Zutaten Keime/Keimart Empfohlenes Verfahren Modifikation zum empfohlenen Verfahren Vergleichbares Verfahren Modifikation zu
38、m vergleichbaren Verfahren Bemerkung Koagulase pos. Staphylokokken DIN EN ISO 6888-1 und DIN EN ISO 6888-2 ASU 64 LFGB L 00.00-55 und L 00.00-56 Begleitflora kann Bestimmung stren; Besttigung durch Koagulasetest Aerobe Koloniezahl DIN EN ISO 4833 DIN 10161-1 (ASU 64 LFGB L 06.00-18) L 00.00-88 Spate
39、lverfahren: 48 h 2 h Sporenbildner und Schimmelpilze knnen die Auszhlung stren Enterobacteriaceae DIN ISO 21528-2 ASU 64 LFGB L 05.00-5 Bebrtungstemperatur 37 C 1 CaASU 64 LFGB L 06.00-24 Bebrtungstemperatur 37 C 1 CaUnterschied zum empfohlenen Verfahren: Spatelverfahren E. coli DIN ISO 16649-2 Chro
40、mogenes Nhr-medium mit Bebr-tungstemperatur 37 C 1 Cbcoliforme Keime ISO 4832 Chromogenes Nhr-medium mit Bebr-tungstemperatur 37 C 1 CcASU 64 LFGB L 01.00-03 ISO 4832 mit Bebrtungstemperatur 37 C 1 C Hefen und Schimmel ISO 7954 Bei niedrigem aw-Wert DG18-Agar verwenden ASU 64 LFGB L 01.00-37 Eine ne
41、ue ISO Norm ISO 21527-1 und ISO 21527-2 wurde erarbeitet V o r n o r m DIN V 10224:2010-05 9 Tabelle 1 (fortgesetzt) Keime/Keimart Empfohlenes Verfahren Modifikation zum empfohlenen Verfahren Vergleichbares Verfahren Modifikation zum vergleichbaren Verfahren Bemerkung ASU 64 LFGB L 00.00-20 Der Ansa
42、tz von Gewrz zum Voranreiche-rungsmedium (Ausgangsverdnnung) kann in einem Bereich von 1:10 bis 1:100 liegen und richtet sich nach dem Gehalt an bakterioziden und bakteriostatischen Inhaltsstoffend, e; nicht selektive Voranreicherung fr Knoblauch und Zwiebelf; Ferrioxamin E-Zusatz zur Voranrei-cheru
43、nggDIN 10120 (ASU 64 LFGB L 00.00-67) Impedanzverfahren Salmonellen DIN EN ISO 6579 DIN 10135 (ASU 64 LFGB L 00.00-52) PCR-Verfahren Gewrze beinhalten inhibitorische Stoffe fr die PCR. Aus diesem Grunde ist es notwen-dig, eine Probenaufbereitung zur Elimi-nierung/Verminderung der PCR-Inhibitoren dur
44、chzufhren. Die Probenaufbereitung wird ber eine obligatorische Inhibitionskontrolle fr jede Probe berprft (DIN EN ISO 22174) Sulfitred. Clostridien ISO 15213 Bebrtungstemperatur 37 C 1 C DIN 10103 (ASU 64 LFGB L 06.00-39) Bacillus cereus DIN EN ISO 7932 ASU 64 LFGB L 00.00-25 und L 00.00-33 Untersch
45、ied zum empfohlenen Verfahren: Besttigungstest in der Regel nicht erforder-lich V o r n o r m DIN V 10224:2010-05 10 Tabelle 1 (fortgesetzt) ANMERKUNG Die Sammlung der Untersuchungsverfahren (ASU) wird im Lebensmittel- und Futtermittelgesetzbuch (LFGB) 64 fortgefhrt. aDie Bebrtungstemperatur von 37
46、C wird durch DIN ISO 21528-2 vorgegeben. Es ist zu berprfen, ob sich ein Einfluss auf das Ergebnis bei der Durchfhrung der vergleichbaren Verfahren (ASU 64 LFGB L 05.00-5/ASU 64 LFGB L 06.00-24) bei einer Bebrtungstemperatur von 30 C ergibt. bDie Bebrtungstemperatur von 44 C wird durch DIN ISO 16649
47、-2 vorgegeben. Es ist zu berprfen, ob sich ein Einfluss auf das Ergebnis bei der Durchfhrung mit einem chromogenen Nhrmedium und einer Bebrtungstemperatur von 37 C ergibt. Chromogenes Nhrmedium = Selektiver Agar fr den gleichzeitigen Nachweis von Coliformen und E. coli; Typische Zusammensetzung in (
48、g/l): Pepton 3,0; Natriumchlorid 5,0; Natriumdihydrogenphosphat 2,2; Dinatriumhydrogenphosphat 2,7; Natriumpyruvat 1,0; Tryptophan 1,0; Agar-Agar 10,0; Natriumheptadecylsulfat-(Tergitol)7 0,15; chromogene Mischung 0,4. cDer VRBL-Agar wird durch ISO 4832 vorgegeben. Es ist zu berprfen, ob sich ein Einfluss auf das Ergebnis bei der Durchfhrung mit einem chromogenen Nhrmedium ergibt. Chromogenes Nhrmedium = Selektiver Agar fr den gleichzeitigen Nachweis von Coliformen und E. coli; Typische Zusammensetzun
