1、 KSKSKSKSKSKSKSK KSKSKS KSKSK KSKS KSK KS KS H ISO TS 2963 KS H ISO TS 2963： 2007 2007 10 31 http:/www.kats.go.krKS H ISO TS 2963： 2007 ： () ( ) F&B () ( ) : (http:/www.standard.go.kr) ： ：2001 12 22 ：2007 10 31 20070962 ： ： ( 025097266) (http:/www.kats.go.kr). 7 5 , . KS H ISO TS 2963： 2007 i .1 1 1
2、 2 .1 3 1 4 2 4.1 .2 4.2 (CCl3COOH)2 4.3 Ac(NaOH) 5.0 mol/L 2 4.4 Bc(NaOH) 1.0 mol/L 2 4.5 Cc(NaOH) 0.1 mol/L2 4.6 (ZnCl2) 2 4.7 (pH 7.8)2 4.8 2 4.9 / .2 4.10 .3 4.11 3 5 .3 5.1 3 5.2 pH .3 5.3 3 5.4 (macerator) 3 5.5 3 5.6 .3 5.7 .3 5.8 3 5.9 3 5.10 .4 5.11 .4 5.12 (paddles)4 5.13 4 6 .4 7 .4 8 4 8
3、.1 4 8.2 .5 8.3 5 8.4 5 8.5 .5 9 .6 9.1 .6 KS H ISO TS 2963： 2007 ii 9.2 7 10 7 10.1 .7 10.2 .7 10.3 .7 11 .7 A( ) (GLP) 8 12 KS H ISO TS 2963： 2007 Cheese and processed cheese products Determination of citric acid content Enzymatic method 2006 ISO/TS 2963, Cheese and processed cheese productsDeterm
4、ination of citric acid content Enzymatic method , . ISO/TS 2963 ISO/TC 34 (SC 5), (IDF) , . ISO 2963： 1997 . 1 . 2 . 2.1 , . . 3 . a) (Citrate Lyase： CL) b) (NADH) L L , NADH (NAD) (Malate Dehydrogenase： MDH) (Lactate Dehydrogenase： LDH) 340 nm NADH . NADH . KS H ISO TS 2963： 2007 2 4 , . . 4.1 , (8
5、.5.1) . 4.2 (CCl3COOH) (CCl3COOH) 200 g 1 000 mL . 4.3 Ac(NaOH) 5.0 mol/L 200.0 g 1 000 mL . 4.4 Bc(NaOH) 1.0 mol/L 40.0 g 1 000 mL . 4.5 Cc(NaOH) 0.1 mol/L 4.0 g 1 000 mL . 4.6 c(ZnCl2) 800 mg/L 800 mg 1 000 mL . 4.7 (pH 7.8) (H2NCH2CONHCH2CO2H) 71.3 g 700 mL , A(4.3) pH 7.8 (4.6) 100 mL , 1 000 mL
6、 . 0 5 4 . 4.8 (C21H27N7O14P2Na2) 50 mg 100 mg 10 mL . 0 5 4 . 4.9 / (MDH) ； ； pH 60.2 ； EC KS H ISO TS 2963： 2007 3 1.1.1.371) (LDH)； ； pH 70.2； EC 1.1.1.27 , 600 units2)/mL MDH 1 400 units2)/mL LDH . 0 5 1 . 4.10 aerobacter aerogenes lyophilisate(CL)； EC 4.1.3.6 40 units/mL (CL) .2) 0 5 1 , 20 4 .
7、 4.11 (C6H8O7 H2O) 1.600 g 1 000 mL . 5 . 5.1 0.1 mg . 5.2 pH 5.3 50 mL 5.4 (macerator) . 5.5 100 mL 5.6 40 mL , 25 mL , 5 mL , 2 mL , 1 mL 0.02 mL 5.7 0.1 mL 10 mL 5.8 50 mL 5.9 1) EC 1 .2) ( .) 1 mol . KS H ISO TS 2963： 2007 4 7 cm . 5.10 15 cm . 5.11 (optical path length) 1 cm 2 cm , 340 nm . 5.1
8、2 (paddles) . 5.13 20 25 ( . 8.5.1 ) (5.11) . 20 . 6 . , KS H ISO 7072 . 7 . a) , . . 2 . b) , . . c) ( , , , ) , , . 7.1.2 . . 8 8.1 8.1.1 , 8.1.2 8.1.4 . (4.7 4.10) KS H ISO TS 2963： 2007 5 2 8.1.2 2 100 mL (5.5) 5.0 mL 10.0 mL (4.11) , (4.2) 10 mL 100 mL , 8.4.3 8.5.3 . 8.1.3 9.1 (2) , (4.11) 1 .
9、 V5 mL (4.11) (V5 1 000 mL) V6 mL (8.1.2) (V6 5 mL 10 mL) V7 mL (8.1.2) (V7 100 mL) 8.1.4 1 , 100 %5 % . , , , , . . 8.2 (7. ) 1 g 0.1 mg (5.3) . (5.4) 50 mL (40 50 ) . 100 mL (5.5) , 20 . 8.3 8.4 8.5 , 2 . 8.4 8.4.1 (4.2) 10 mL (8.2) , 100 mL . 8.4.2 30 . 8.4.3 (5.10) . . 8.4.4 (5.3) 25 mL pH B(4.4
10、) pH 4 , C(4.5) pH 8 . 100 mL (5.5) , . 8.4.5 (5.10) . . 8.5 8.5.1 KS H ISO TS 2963： 2007 6 (4.7) 1 . 1 (4.7) 1.00 mL 1.00 mL NADH (4.8) 0.10 mL 0.10 mL MDH/LDH (4.9) 0.02 mL 0.02 mL 2.00 mL 2.00 mL (5.12) , 5 20 (5.13) , 340 nm A0 . ： (4.10) 0.02 mL 0.02 mL 10 20 (5.13) . A10 . 8.5.2 (9.1) A . A A0
11、 A10(1) A0 ： A10 ： , 10 8.5.3 A 0.800 , 8.5.1 8.5.2 (8.2) (8.3) . 9 9.1 (w) . ()%1006427531rrs=VVVVVVVmlKMAAw (2) As ： Ar ： Mr ： ( , Mr 192.1 g/mol ) K ： 340 nm NADH ( 6.3106cm2/mol) l ： (l 1 cm) m ： (8.2) (g) KS H ISO TS 2963： 2007 7 V1 ： (V1 3.14 mL) V2 ： (8.4.5) (V2 2.00 mL) V3 ： pH 8 (8.4.4) (8.
12、4.3) (V3 100 mL) V4 ： pH 8 (8.4.4) (8.4.3) (V4 25 mL) V5 ： 8.1.2 (V5 100 mL) V6 ： (8.5.3) (8.4.5) (mL)(V6 1 ) V7 ： (8.5.3 ) (mL)(V7 1 ) 9.2 . 10 10.1 , ISO 57253) . . . 10.2 , 2 5 %( ) . 10.3 , 2 8 %( ) . 11 . a) b) , c) , d) , e) , , 10.1 3) ISO 5725： 1986, ( ) .KS H ISO TS 2963： 2007 8 A ( ) (GLP)
13、 A.1 (good laboratory practice) . . . A.2 A.2.1 ( , , , ) . A.2.2 ( , , ) (coenzyme) . A.2.3 . A.2.4 2 . A.2.5 . A.2.6 / ( 2 8 ). A.2.7 . A.2.8 , . . A.2.9 . A.3 A.3.1 (optical path length) 1 cm . . ( ). . (batch) . A.3.2 ( ) . KS H ISO TS 2963： 2007 9 (A1) . NADH( 0.15 mg/mL) , (A2) . (A2 A1) . . (
14、A2 A1) 0.5 % , , (9.1) (1 cm) . A.3.3 . A.3.4 , . . A.3.5 . A.3.6 , . A.3.7 . A.3.8 . A.3.9 (holder) , , . A.4 A.4.1 10 nm (band width) ., . NADH NADPH , 340 nm , 365 nm 334 nm . 334 nm, 340 nm 365 nm NADH NADPH . 334 nm( ) NADH NADPH： 6.18106cm2/mol 340 nm NADH NADPH： 6.3106cm2/mol 365 nm( ) NADPH：
15、 3.5106cm2/mol 365 nm( ) NADH： 3.4106cm2/mol A.4.2 NADH NADPH 2.0 , . a) 2.00 mL A0 . b) NADH 0.10 mL(0.5 mg/mL) A1 , Arn . KS H ISO TS 2963： 2007 10 Ar1 (A1 A0)2.1/3.5 A1 ： NADH b A0 ： a c) b) 14 , Arn . Arn (An A0)V/3.5 An ： n V ： n d) NADH . . A.5 A.5.1 . A.5.2 . A.5.3 ( ) . a) t . b) , 1 (t 1) .
16、 c) b) 9 . d) t 11 , t 12 , t 13 , t 14 t 15 , . e) . A.5.4 , . A.5.3 . A.5.5 / . . A.5.6 , , , . (10 L50 L) / , . A.5.7 . A.6 A.6.1 . . KS H ISO TS 2963： 2007 11 A.6.2 . . ( ) (European Community Bureau of Reference： B.C.R.) . A.6.3 . . A.6.4 , . . KS H ISO TS 2963： 2007 12 1 Enzyme Nomenclature Re
17、commendations of the Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry. Academic Press, New York, 1984 2 KS H ISO 707, 3 KS A ISO 5725 1, ( ) 1： 4 KS A ISO 5725 2, ( ) 2： 135513 7017 (02)60094114 (02)600948878 http：/ KS H ISO TS 2963： 2007 KSKSKS SKSKS KSKS SKS KS SKS KSKS SKSKS KSKSKS Cheese and processed cheese productsDetermination of citric acid contentEnzymatic method ICS 67.100.30 Korean Agency for Technology and Standards http:/www.kats.go.kr
