1、中华人民共和国医药行业标准口腔材料生物试验方法静脉注射急性全身毒性试验YY/r 0127. 2一93本标准参照采用国际标准化组织技术文件ISO/TR 7405-1954齿科材料生物评价1主题内容与适用范围本标准规定了齿科材料静脉注射全身毒性试验方法。本标准适用于各种齿科材料(附录A)经静脉途径注射的急性全身毒性评价。2引用标准中国医院制剂规范3术语3.1浸提介质:用于浸提材料的液体。3.2浸提液:由浸提介质浸提材料所得到的液体。3.3空白浸提液:不含材料的浸提介质。与浸提液做对比。3.4全身毒性:远离浸提液注射部位发生的不良反应。3. 5急性毒性:在注射浸提液后14d或更少天数观察期内出现的不
2、良反应。4试验方法4.1试验动物20只白化小白鼠:雌雄各半。体重1723 g。标准饮食，不限制饮水。将小鼠随机分为试验和对照两组，每组10只，雌雄各半。饲养时每个笼内放同性别、注射同一浸提液的小鼠5只，并标记小鼠。4.2器具4.2.1高压消毒锅:能保持温度1151“C，环境压力为1个标准大气压时，表压力为。07士。. 001 MPa4.2.2天平:分度值为。.0001 g,4.2.3浸提容器:合适的具塞玻璃容器，以保护浸提液不被生物及化学污染或蒸发。4,2.4恒温箱:能保持温度37士1。4.3材料浸提液的制备4.3.1浸提介质:根据材料特性选择下列浸提介质之一。4.3.1.1 0.90o氯化钠
3、注射液。4.3.1.2注射用水4.3.1.3根据特殊需要应选择的其他浸提介质。4.3.2材料尺寸按照材料最终使用状态进行浸提。浸提前按厂家说明书对材料进行清洗和消毒。在每20 ml一浸提介质中加入上下面积总和为120 cm(厚度小于。. 5 mm)或60 cm(厚度0. 5-1. Omm)的试验材料。若国家医药管理局1993-07一01批准1993一10一01实施YY/T 0127. 2一93材料厚度大于1. 0 mm或无定形材料，则取4.0g材料。应尽量细分样品，使浸提介质完全覆盖材料。4.3.3浸提过程4.3.31对浸提、转移和保存浸提液的过程中使用的容器和装置进行消毒和干燥。4.3.32
4、取6个各含20 mL浸提介质的容器，其中3个容器内各加人一份材料为试验液，另3个容器中的空白浸提液为对照液。盖紧容器盖。4.3.3.3浸提条件:根据材料特性，选择如下浸提条件之一37士112o h50士2 C 72 h70士224 h121士22h所选用的浸提条件应对材料的物理性能无显著影响。浸提期间不得搅动浸提介质和振动浸提容器。4.3-3.4浸提完毕后，振荡浸提容器。将同种三个容器中的浸提液合并，用孔径4.5-9 pm的垂熔漏斗将浸提液过滤，以防浸提液中含有可能阻塞血管的细微粒。4.3.35将过滤后的浸提液于115十o 0C，环境压力为1个标准大气压时，表压力为。. 07士0. 001 M
5、Pa下灭菌消毒0. 5 h o43.3.6浸提液贮存温度为22-30，并应在制备后的24 h内使用。4.4给药途径4.4.1经鼠尾静脉给试验组10只小鼠注射50 mL/kg的材料浸提液。对照组10只小鼠注射等量的空白浸提液。4.4.2注射速度不超过0. 1 mL/s,4.4.3每次注射前强烈搅动浸提液，以保证浸提液分布均匀，并记录pH值，称重小鼠4. 5在注射后立即观察所有动物，并于注射后4,24,48和72 h观察和记录所有动物的状态、毒性(毒性程度分级见表)表现和死亡动物数。并在注射后24,48和72 h对所有的动物分别进行称重，并记录，见下表。毒性程度分级反应#i逐一正常(无症状)轻微死
6、亡注射后小鼠未出现毒性症状注射后小鼠呈现轻微不显著的以下症状运动机能减退、呼吸困难、或腹部刺激注射后小鼠出现明显的腹部刺激、呼吸困难，运动机能减退、眼睑下垂、腹泻或体重下降(下降到15-i7 g之间)注射后小鼠出现虚脱、发纷.展颜和严重的腹泻、眼睑下垂或呼吸困难、体重迅速下降(低于15 g)等症状注射后小鼠死亡4.6结果判断4.6.1在72 h观察期内，试验组的动物无一只比对照组动物反应大，则认为该材料符合本标准要求。4.6.2如试验组的动物有2只或2只以上动物呈现明显的毒性症状或死亡，则认为该材料不符合本标准要求。4.6.3如果试验组的任何动物呈现轻微的毒性症状或仅1只试验动物有显著的毒性症
7、状或死亡，则需进行重复试验。4.6.4若试验组动物体重均下降，即使无其他毒性症状，仍需重复试验4.6.5重复试验结果符合4.6. 1条的要求，则认为该试验材料符合本标准要求。YY/T 0127. 2一93附录A用于静脉注射急性全身毒性试验的齿科材料(补充件)齿科植人材料金属与合金类。陶瓷类。树脂类。热解碳类。月.，口q月乌根管充填材料固体根充材料。糊状根充材料。根管封闭剂及水门汀。月.勺亡八牙周塞治剂及敷料。口腔外科用材料:司.JI.月.月.qn艺门艺月乙IJ月qAAAAAAAAAAA口腔外科拔牙后敷料口腔外科组织粘合剂A4A4附加说明:本标准由全国口腔材料和器械设备标准化技术委员会提出。本标准由国家医药管理局北医医疗器械标准化技术分归口单位归口本标准由国家医药管理局口腔材料质量检测中心负责起草。本标准主要起草人林红、刘文一、易传立。
