1、 国际商务标准 SW/T 72013 SW 中国医药保健品进出口商会发布 2013-9-10 发布 2013-10-1 实施 植物提取物 水飞蓟提取物 Milk Thistle Extract SW/T 72013 1 前 言 为了规 范水 飞蓟 提取 物的 生产和 国际 商务 活动 的质 控管理 ，制 定本 标准 。 本标准 的附 录A为规范 性附录， 附录B 为资 料性 附录 。 本标准 由中 华人 民共 和国 商务部 归口 。 本标准 由中 国医 药保 健品 进出口 商会 国际 商务 标准 化技术 委员 会负 责解 释。 本标准 起草 单位 ： 长沙 康隆 生物 制品 有限 公司 、盘锦
2、天 源药 业有 限公 司 。 本标准 主要 起草 人：刘喜 荣、 吴长 军、 吴长 昱、王 松政 、罗成平 、 吴 吉平、 刘婷 、李 世凯 SW/T 72013 2 国际商务标准 植物提取物 水飞 蓟提取物 1 范围 本标准 规定 了水 飞蓟 提取 物的工 艺要 求、 产品 要求 、检验 方法 及包 装、 标签 、贮存 要求 。 2 规范性引用文件 下列文 件中的条款通过本标准的 引用而成为本标准的条款 。凡是不注日期的引用文 件，其最 新版本 适用 于本 标准 。 中华 人民 共和 国 药典2010 第二部 附 录 E 粒度和粒度 分布 测定 法第 二法 中华 人民 共和 国 药典2010
3、 第二部 附 录 H重金属检查 法第 二法 中华 人民 共和 国 药典2010 第二部 附录 L 干燥 失重检 查法 中华 人民 共和 国 药典2010 第二部 附录 N炽灼残渣检 查法 中华 人民 共和 国 药典2010 第二部 附 录 J 微生 物限度 检查 法 中华 人民 共和 国 药典2010 第二部 附录 P残留溶剂测 定法 3 名称、结构式、分子式和相对分子质量 水飞蓟 提取物由一组有效成分组 成，各组分名称、结构式 特征基团、分子式、相对 分子质量 见表1 。 表1 水飞蓟各组份 的结构 式、分子式、相对分 子质 量 名称 结构式 分子式 相对分 子质 量 水飞蓟亭 (Silyc
4、hristin) O HO OH OH O OH CH 2 OH OCH 3 OH O C 25 H 22 O 482.44 1 0水飞蓟宁 （Silydianin ） O HO OH O OH OH OCH 3 O OH OC 25 H 22 O 482.44 1 0SW/T 72013 3 水飞蓟宾 A （Silybin A ） O HO OH O OH O O OH OCH 3 CH 2 OHC 25 H 22 O 482.44 1 0水飞蓟宾 B （Silybin B ） O HO OH O OH O O OH OCH 3 CH 2 OHC 25 H 22 O 482.44 1 0异
5、水飞蓟宾 A （Isosilybin A ） O HO OH O OH O O CH 2 OH OH OCH 3C 25 H 22 O 482.44 1 0异 水飞蓟宾 B （Isosilybin B ） O HO OH O OH O O CH 2 OH OH OCH 3C 25 H 22 O 482.44 1 04 技术要求 4.1 工艺要求 4.1.1 植物原料 为菊科 植物 水飞 蓟 Silybum marianum （L. ） Gaertn. 的干 燥成 熟果 实， 于 7 至 9 月份 成熟 时采 收， 除去杂 质， 晒干 而获 得。 4.1.2 工艺过程 果实 压榨 丙酮 或乙酸
6、乙酯 或乙 醇 提取 浓缩 脱脂 干燥 成品 4.2 产品要求 4.2.1 感官要求：应符 合表 2 的要 求。 表 2 感官要求 项 目 要 求 色 泽 淡黄色 或黄 棕色 SW/T 72013 4 气 味 水飞蓟 提取 物特有气 味 状 态 非结晶 状粉 末 4.2.2 理化指标：应符 合表 3 的规 定。 表 3 理化指标 项 目 指 标 鉴别试 验 供试品溶液中有效成分的色谱峰特征应与对照品溶 液中对 应组 分色 谱峰 特征 一致 指标成 分 水飞蓟总黄酮（以干品、 水飞蓟 宾计 ） ，% 3065 水飞蓟亭和水飞蓟宁含量 之和占水飞蓟总黄酮的百 分比，% 2045 水飞蓟 宾 A 和
7、水飞 蓟宾 B 含量之和占水飞蓟总黄 酮 的百分 比，% 4065 异水飞 蓟宾 A 和异 水飞 蓟 宾 B 含量 之和 占水 飞蓟 总 黄酮的 百分 比，% 1020 炽灼残 渣，% 0.5 干燥失 重，% 5.0 粒度（80 目筛 通过 率） ，% 99% 堆积密 度 松密度 ，g/mL 0.300.50 紧密度 ， g/mL 0.500.90 溶剂残 留 甲醇，mg/kg 20 乙酸乙 酯，mg/kg 100 丙酮，mg/kg 10 正己烷 ，mg/kg 10 重金属 （以 Pb计） ， mg/kg 10 4.2.3 微生物指标要求：应符合表4的要求 。 表4 微生物指标 项 目 指 标
8、 细 菌 数，CFU/g 1000 霉菌和 酵母 菌总 数，CFU/g 100 大 肠 埃 希 菌，CFU/g 不得检 出 SW/T 72013 5 4.2.4 其他污染物：其 他污 染物限 量要 求， 依据 不同 用途， 应符 合我 国相 关法 规的规 定。 对于 出 口 产品， 应符 合出 口目 的国 相关法 规的 规定 。 5 检验方法 5.1感官检验 取适量 样品置于清洁、干燥的白 瓷盘中，在自然光线下， 观察其色泽、外观，嗅其 气味，检 查有无 异物 。 5.2理化检验 5.2.1 鉴别 按附 录 A.2.中规定 的试 验方法进 行测 定。 5.2.2 主要 成分 含量 按附 录 A
9、.3 中规定 的检 验方法进 行测 定。 5.2.3 炽灼 残渣 按中华人 民共 和国 药典 2010 第二部 附录 N 进行测 定。 5.2.4 重金 属（以 Pb计） 按中华人 民共 和国 药典 2010 第二部 附录 H 第二法 进行 测定 。 5.2.5 干燥 失重 按中华人 民共 和国 药典 2010 第二部 附录 L 进行测定 。 5.2.6 粒度 按中华人 民共 和国 药典 2010 第二部 附 录 E 第二法 规 定的 试验 方法 进行 测定。 5.2.7 堆积 密度 堆积密 度分 为松 密度 和紧 密度， 按附 录 A.4 中规 定的试验 方法 进行 测定 。 5.2.8 溶
10、剂 残留 按附 录 A.5 中规定 的检 验方法进 行测 定。 5.2.9 微生 物指 标 按中 华人 民共 和国 药典 2010 第二部 附 录 J 微 生物限 度检 查法 进行 测定 。 6包装、标签、运输、贮存 6.1包装 包装材 料应 符合 GB 9685 食品容 器、 包装 材料 用添 加剂使 用卫 生标 准的 要求。 6.2标签 包装标 签上 应标 明： 名称 、批号 、规 格、 毛重 、净 重、生 产厂 名、 厂址 、产 地、生 产日 期、 保质期 、贮 存条 件。 6.3 运输 6.3.1 运输 工具 应清 洁、 卫 生，不 得与 有毒 、有 害、 有异味 、易 污染 物品 混
11、装 混运； 6.3.2 搬运 过程 中不 得雨 淋、暴晒 ； 6.3.3 搬运 时应 轻拿 轻放 ， 严禁扔 摔、 撞击 或挤 压。 6.4 贮存 SW/T 72013 6 产品应 贮存 于干 燥、通风 、 清洁 的仓 库中 。堆 码距 墙壁和 地面 20 cm 以上、 并有垫 隔物 ， 堆 放高度 不得 超过 4 桶 ；避 免与有 毒、 有害 、易 腐、 易污染 等物 品一 起堆 放。 6.5 保质期 在符合 规定 的贮 运条 件和 包装完 整、 未经 开启 封口 的情况 下， 保质 期 为 36 个月 。 附 录 A （规范性附录） 检验方法 A.1一般规定 本标准 所用 试剂 和水 ，在
12、 没有注 明其 他要 求时 ，均 指分析 纯试 剂和GB/T 6682 规定的 三级 水。 实验中 所用 溶液 在未 注明 用何种 溶剂 配制 时， 均指 水溶液 。 A.2鉴别试验 按A.3 规定 的方 法进 行鉴 别 试验， 供试 品溶 液中 有效 成分的 色谱 峰特 征应 与对 照品溶 液中 对应 组分色 谱峰 特征 一致 。 A.3 水飞蓟总黄酮含量测定方法 A.3.1 方法提要 样品经 甲醇 超声 溶解 后， 采用高 效液 相色 谱法 测定 ，用外 标法 定量 。 A.3.2 仪器和用具 A.3.2.1 分析天 平， 感量 为 0.01mg。 A.3.2.2 超声波 清洗 仪。 A.
13、3.2.3 高效液 相色 谱仪 （附紫 外检 测器 ） 。 A.3.3 试剂和溶液 A.3.3.1 甲醇， 色谱 纯。 A.3.3.2 磷酸。 A.3.3.3 标准品 ：水飞蓟 宾标准 品，纯度 98% ， 内含水 飞蓟 宾 A 和水飞 蓟宾 B 两个 组分( 购自 中 国食品 药品 检定 研究 院) 。 A.3.3.4 水飞蓟 提取 物定 性对照 品： 含有 水飞蓟 亭、 水飞蓟 宁、 水飞蓟 宾 A 、 水飞蓟 宾 B、异水 飞 蓟宾 A、异水 飞蓟 宾 B 6 种组分 。 A.3.3 色谱条件 a ）色谱柱 ：以 十八 烷基 硅烷键合 硅胶 （5 m ）为 填充剂 ， 长度 150 mm
14、, 内径 4.6 mm ； b) 检测 波长 ：288 nm ； c) 流动 相： 流动相 A：磷 酸 - 甲醇-水（ 0.5 ： 35 ： 65， v/v/v）； 流动 相 B：磷酸 - 甲醇-水（ 0.5 ：SW/T 72013 7 50 ：50 ，v/v/v） 。梯度 程序见 表 A1 。 d) 流速 ：0.8 mL/min ； e) 进样量 ：10 L 。 表 A1 梯度条件 时间（min ） 流动 相 A （% ） 流动 相 B （% ） 0 -28 100 0 0 100 28-35 0 100 35-36 0 100 100 0 36-51 100 0 A.3.4分析步骤 A.3
15、.4.1. 标准 品溶 液的制 备 精密称 取水 飞蓟 宾对 照品 10 mg （精确 至 0.01mg） ， 用甲醇 溶解 并 定容 至 100 mL 。 摇匀， 备 用。 A.3.4.2 . 定性 对照 品溶 液的 制备 称取水 飞蓟 提取 物定 性 对照品 适量 ， 用甲醇 溶解 并 定容 至 100 mL 。摇匀，备用 。 A.3.4.3 供试 品溶 液的制 备 称取供 试品 60 mg （精 确至 0.01mg）， 用 甲醇 溶解 并定容 至 100 mL 。 A.3.4.4. 测定 法 分别吸 取定性 对照品 溶液 、 标准品 溶液 、 供试 品溶 液各 10 L ， 依次 注入液
16、 相色 谱仪 进行 测定 。 以定性对照 品中各组分的色谱峰保留 时间作为供试品溶液中各 组分的定性依据，确定供 试品溶液 中各组 分的色 谱峰。 水飞 蓟总黄 酮以水 飞蓟宾 计， 标准品 溶液中 水飞蓟 宾的峰面积 为 水飞 蓟宾 A 和水飞 蓟宾 B 两个峰 面积 之和 ，样品 溶液 中 水飞蓟 总黄酮 的 峰面积 为 水飞蓟 亭、水 飞蓟 宁、 水飞 蓟宾 A、水飞 蓟宾 B 、异 水飞蓟 宾 A、异水 飞蓟 宾 B 6 种组 分峰 面积 之和 。 A.3.5计算 A.3.5.1 水飞 蓟总 黄酮含量（以干 品、 水飞 蓟宾 计） 的质量 分数 以w 1 % 100 ) 1 ( ) (
17、 ) ( 0 1 8 7 1 1 6 5 4 3 2 1 1 + + + + + + = w m A A V c A A A A A A w 计， 按公 式（A.1 ）计算 ： (A.1) A.3.5.2 水飞 蓟亭 和水 飞蓟 宁 总量 占 水飞蓟 总黄酮 的 质量分 数以w 2 % 100 ) ( 6 5 4 3 2 1 2 1 2 + + + + + + = A A A A A A A A w 计， 数值以% 表示， 按 公式 （A.2 ） 计算： （A.2） A.3.5.3 水飞 蓟宾A和水飞 蓟宾B 的 总量 占水 飞蓟 总黄酮 的质 量分 数以w 3 % 100 ) ( 6 5 4
18、 3 2 1 4 3 3 + + + + + + = A A A A A A A A w 计， 数值以% 表示 ， 按公式 （A.3 ） 计算 ： （A.3） A.3.5.4 异水飞蓟 宾A和异水 飞蓟宾B 的 总量 占水 飞蓟 总 黄酮 的质 量分 数以w 4 % 100 ) ( 6 5 4 3 2 1 6 5 4 + + + + + + = A A A A A A A A w 计 ， 数值 以%表示 ， 按公式 （A.4 ）计算 ： （A.4） SW/T 72013 8 式中： A 1 供试 品 色谱图 中水 飞蓟亭 的峰 面积 ； A2 供试品 色谱 图中 水飞蓟宁 的峰 面积 ； A3
19、 供试品 色谱 图中 水 飞蓟宾A 的峰 面积 ； A4 供试品 色谱 图中 水 飞蓟宾B 的峰 面积 ； A5 供试品 色谱 图中 异水飞蓟 宾A的峰面 积； A6 供试品 色谱 图中 异水飞蓟 宾B的峰面 积； A7 标准品 溶液 中水 飞蓟宾A的峰面 积； A8 c 标准品 溶液 中水 飞蓟宾B的峰面 积； 1 标准品溶 液中水飞蓟 宾 的浓度 （包含 水飞蓟宾A 和水飞 蓟宾B 两个组 分 ） ，单 位为毫 克每 毫升（mg/mL ）； V 1 供试 品溶 液的 体积 ，单位 为毫 升（mL ） ； m 1 供试品 的质 量， 单位为毫 克 （mg ）。 w 0 A.4.1.1 天平
20、。 供 试品 干燥 失重的 质量分 数，% 。 A.4堆积密度的测定 A.4.1仪器 A.4.1.2 量筒 ，100 mL 。 A.4.2操作步骤 A.4.2.1 量筒 的准 备：取 洁 净、干 燥的 量筒 （m 2 ）。 A.4.2.2 松密 度的 测定： 将 样品松 缓地 转入 量筒 中至 （905）mL 处， 称量量筒 与样品 的质 量 （m 3 ）， 精确 到 0.1 g，并弄 平粉 末表面， 读取 固体 粉末 的体 积（V 2 ）。 A.4.2.3 紧密 度的 测定： 将 上述盛 有样 品的 量筒 放在 台面上 （ 铺有 约 5 mm 厚的橡胶） ， 由 2 cm 左右 的高度 自坠
21、 到台 面上 ，反 复此操 作 约 100 次， 量得 压紧后 的粉 末体 积（V 0 ） ，继续上 述操 作约 30 次，量 得粉 末体 积（V 3 ）。 当 V 0 与V 3 相差小 于 2 mL 时 ，读取 最终 体积 （V 3 ）, 否则重复 上述 操作 ， 直到符 合为 止。 A.4.3 计算 松密度w5 和紧密 度w6 2 2 3 5 V m m w = 分别按式 （A.5 ） 和式 （A.6 ） 计算。 （A.5 ） 3 2 3 6 V m m w = (A.6) 式中：w 5 松密 度（g/mL ）； w 6 紧密度 （g/mL ）； m 3 m 量筒+ 样品 重（g）； 2
22、空量筒 重（g ）； V 2 松固 体粉 末体 积（mL ）； V 3 A.5 甲醇、乙酸乙酯、丙酮和正己烷残留量测定 紧固 体粉 末体 积（mL ）。 SW/T 72013 9 A.5.1 方法提要 样品 用顶 空法 ，外 标法定量 。 A.5.2 仪器和用具 A.5.2.1 气相 色谱 仪（ 带 氢火焰 离子 检测 器） 。 A.5.2.2 进样 系统 ：顶 空进样器 。 A.5.2.3 色谱 柱：PEG-20M 毛 细管 柱或 同类 型色谱 柱。 A.5.2.4 分析 天平 ， 感量为 0.1mg。 A.5.3 试剂和 溶液 A.5.3.1 甲醇标 准品 A.5.3.2 乙酸乙 酯标 准
23、品 A.5.3.3 丙酮标 准品 A.5.3.4 正己烷 标准 品 A.5.3.5 二甲基 甲酰 胺 ， 色谱纯 。 A.5.4色谱条件 A.5.4.1 检测条 件 A.5.4.1.1 载气 ：氮 气。 A.5.4.1.2 进样 方式 ：顶 空分流 （分 流比=1 ：10）。 A.5.4.1.3 载气 流量 ：1.2mL/min 。 A.5.4.1.4 进样 体积 ：1mL 。 A.5.4.1.5 进样 口温 度：200。 A.5.4.1.6 检测 器温 度：260。 A.5.4.1.7 升温 程序 ： 见表 A 2 。 表 A 2 升温程序 序号 温度设定（ ） 柱温（ ） 保持时间（min
24、 ） 1 初始温度 40 8 2 程序升温 35/min 5.7 终点温度 240 5 A.5.4.2 顶空条 件： 见表 A 3。 表 A 3 顶空进样条件 样品制备程序 操作参数 平衡温度（） 105 平衡时间（min ） 30 传输线温度（） 110 A.5.5 溶液 制备 及测 定 A.5.5.1 标准品 溶液 的制 备 SW/T 72013 10 精密称 取甲 醇 0.2g （称 准至 0.1mg） 于 100mL 容量瓶中， 用二甲 基甲 酰胺 定 容,混匀。 取该液 0.1mL 于 100mL 容量瓶中,用二 甲基 甲酰 胺稀 释至 100mL,配制成甲 醇浓度为 2 g/mL
25、的标准品使 用溶液 。精 密称 取乙 酸乙 酯 1.0g 、丙 酮 0.1g、正己 烷 0.1g ，按 上述 相同 方法 配制成 乙酸 乙酯 浓度 为 10g/mL 、丙酮浓度 为 1g/mL 、正己烷浓 度为 1g/mL 。取该标准品 溶液 5.0 mL 加入到 20mL 顶空瓶 中， 立即 塞紧 瓶盖 ，同时 压紧 铝盖 ，备 用。 A.5.5.2 供试品 溶液 的制 备 精密称 取供 试品 0.5g （称准至 0.1mg） 于 20mL 的顶空瓶中 ， 加入 二甲 基甲 酰胺 5.0mL，立即 塞紧瓶 盖， 同时 压紧 铝盖 ，备用 。 A.5.5.3 测定 标准品 溶液 和供 试品 溶
26、液 顶空进 样， 注入 气相 色谱 仪，记 录色 谱图 。 A.5.6 结果计算 溶剂残 留甲 醇（ 或乙 酸乙 酯、或 丙酮 、或 正己 烷） 以w 7 (A.7) 式中： w 计， 按式 （A.7 ）计 算： 7 供 试品 中甲 醇 （ 或乙 酸乙酯 、 或丙 酮、 或正 己烷 ） 残留量 ， 单位 为毫 克每 千克 （mg/kg）； A 7 供试 品溶 液中 甲醇 （或乙 酸乙 酯、 或丙 酮、 或正己 烷） 的峰 面积 ； A 8 标准 品溶 液中 甲醇 （或乙 酸乙 酯、 或丙 酮、 或正己 烷） 的峰 面积 ； c 2 标 准品 溶液 中甲醇（ 或乙 酸乙 酯、 或丙酮 、或 正己
27、 烷） 的浓 度，单 位为 微克 每毫 升 （ g/ ml）； V 4 样品 溶液 定容 体积 （mL）； m 4 4 8 7 2 4 7 c w m A A V = 供试品 质量 ，单 位为克（g）。 SW/T 72013 11 附录 B （资料 性附 录） B.1 水飞蓟提取物高效液 相色谱图 图 B1 水飞蓟 宾标 准品 液相色谱 图 表B.1 水飞蓟宾标准品参考保留时间 组分名称 保留时间（min ） 水飞蓟宾 A 29.75 水飞蓟宾 B 31.72 SW/T 72013 12 图 B2 水飞蓟 提取 物样 品液 相色谱 图 表B2 水飞蓟提取物中各组分参考保留时间 组分名称 保留时
28、间（min ） 相对保留值 水飞蓟亭 18.25 0.58 水飞蓟宁 21.18 0.68 水飞蓟宾 A 31.33 1.0 水飞蓟宾 B 33.52 1.07 异水飞蓟宾 A 39.78 1.27 异水飞蓟宾 B 42.05 1.34 B.2 水飞蓟提取物样品中 甲醇、乙酸乙酯、丙 酮、 正己烷气相色谱图 SW/T 72013 13 图 B3 甲 醇、 乙酸 乙酯 、丙 酮、正 己烷 标准 品 气相色 谱图 表B.3 甲醇、 乙酸 乙酯 、丙酮、 正己 烷标 准品 参考 保留时 间 组分名称 保留时间（min ） 甲醇 1.95 乙酸乙酯 3.13 丙酮 4.78 正己烷 6.47 图 B4 水 飞蓟 提取 物样 品中 甲醇、 乙酸 乙酯 、丙 酮、 正己烷 气相 色谱 图 表B.4 水飞蓟 提取 物样 品中甲醇 、乙 酸乙 酯、 丙酮 、正己 烷 参考保 留时 间 SW/T 72013 14 组分名称 保留时间（min ） 甲醇 1.989 乙酸乙酯 3.251 丙酮 4.763 正己烷 6.456
