1、 SW 国际商务标准 SW/T 62013 植物提取物 柳枝提取物 Willow Twig Extract 2013-10-1 实施 2013-9-10 发布 中国医药保健品进出口商会发布 SW/T 62013 2 前言 为了规 范柳 枝提 取物 在生 产、运 输和 贮存 过程 中的 质量管 理， 特制 定本 标准 。 本标准 附录A.2 和附录A.3 修改采 用欧 洲标 准EP 7.0 04/2008:2312。 本标准 的附 录A为规范 性附录， 附录B 为资 料性 附录 。 本标准 由中 华人 民共 和国 商务部 归口 。 本标准 由中 国医 药保 健品 进出口 商会 国际 商务 标准
2、化技术 委员 会负 责解 释。 本标准 由西 安应 化生 物技 术有限 公司 负责 起草 。 本标准 主要 起草 人： 薛迎 春、翟 巧丽 、杨 琼、 崔延 萍、何 锦伟 SW/T 62013 3 国际商 务标准 植物提 取物 柳 枝提取 物 1 范围 本标准 规定 了柳 枝提 取物 的技术 要求 、检 验方 法、 标签、 包装 、运 输、 贮存 要求。 本标准 适用 于以 柳枝 为原 料，经 乙醇 提取 制成 的以 水杨苷 为主 要指 标成 分的 提取物 。 2 规范性引用文件 下 列文件 中的 条款通 过本标 准的引 用而 成为本 标准的 条款。 凡是 注日期 的引用 文件 ， 其随后 所
3、有 的修 改单 （ 不 包括勘 误的 内容 ） 或修 订 版均不 适用 于本 标准 ， 然 而， 鼓励 根 据本标 准达 成协 议的 各方 研究是 否可 使用 这些 文件 的最新 版本 。 凡 是不 注日 期的引 用 文 件，其 最新 版本 适用 于本 标准。 GB/T5009.74 食品添加 剂中重金 属限 量测 试 GB/T5009.17 食 品中总 汞 及有机 汞的 测定 GB/T5009.15 食品中镉 的测定 GB5009.12 食品 安全 国家 标准食 品中 铅的 测定 GB/T5009.11 食 品中 总砷 及无机 砷的 测定 GB5009.4 食品 安全 国家标 准食品 中灰
4、分的 测定 GB5009.3 食品 安全 国家标 准食品 中水 分的 测定 GB4789.15 食品 安全 国家 标准食 品微 生物 学检 验霉 菌和酵 母计 数 GB4789.4 食品 安全 国家标 准食品 微生 物学 检验 沙门 氏菌检 验 GB4789.3 食品 安全 国家标 准食品 微生 物学 检验 大肠 菌群计 数 GB4789.2 食品 安全 国家标 准食品 微生 物学 检验 菌落 总数测 定 3 有效成分名称、结构式、分子式和相对分子质量 有效成 分名 称： 水杨 苷； 别名：D- （- ）- 水杨苷 英文名 称：D- （- ）-Salicin; 分子式 ：C13H18O7 相对
5、分 子质 量：286.28 水杨苷 化学 结构 式： O OH OH OH O H O O H4 技术要求 SW/T 62013 4 4.1 工艺要求 4.1.1 植物原料 原料来 源于 杨柳 科柳 属植 物，主 要包 括S. purpurea L., S. daphnoides Vill. and S. fragilis L 等的皮 或枝 条； 全年 可采 ，去除 杂质 ，晒 干。 4.1.2 工艺过程 用碱性 的含 水乙 醇提 取后 ，浓缩 ，萃 取， 除去 杂质 后结晶 ，干 燥即 得。 4.2 产品要求 4.2.1 感官要求： 应符 合表 1 的要求。 表 1 感官 要求 项目 规格与
6、要求 水杨苷 25% 的提取物 水杨苷 50% 的提取物 色泽 棕黄色或灰色 淡黄色或灰白色 外观 均匀粉末，无可见异物 均匀粉末，无可见异物 4.2.2 鉴别 按照 附录A.2的 方法鉴 别，测试样品液应与标准溶液呈现出同样的紫红色斑， 且比移值相符合。 4.2.3 理化要求： 应符 合表 2 要求。 表 2 理化要求 项 目 规格与指标 水杨苷 25% 的提取物 水杨苷 50% 的提取物 水杨苷含量，% 25. 0 50. 0 粒度（80 目筛通过率） ，% 9 5 9 5 堆密度 松密度，g/100mL 5575 4565 紧密度，g/100mL 7095 6590 水分，% 5 . 0
7、 3 . 0 灰分，% 10. 0 5 . 0 重金属（以 Pb 计），mg/kg 2 0 2 0 铅（Pb）， mg/kg 3 . 0 3 . 0 镉（Cd）， mg/kg 1 . 0 1 . 0 砷（As）， mg/kg 1 . 0 1 . 0 汞（Hg）， mg/kg 0 . 1 0 . 1 4.2.4 微生物要求：应符合 表 3 规定。 表 3 微生 物要 求 SW/T 62013 5 项 目 指标 细菌总数，cfu/g 1000 霉菌及酵母菌数，cfu/g 100 大肠杆菌 不得检出 沙门氏菌 不得检出 5 检验方法 5.1 感官检验 启开测 试样 品袋 后， 取测 试样品10克 置
8、于 白色 瓷盘 中， 在 自然 光下， 观察 其色 泽、 外 观， 并检查 有无 异物 。 5.2 理化检验 5.2.1 鉴别 按附录A.2 中规定 的测 试方 法进行 测定 。 5.2.2 有效成 分水杨苷 含量 按附录A.3 中规定 的 检验方 法进行 测定 。 5.2.3 粒度 按附录A.4 中规定 的测 试方 法进行 测定 。 5.2.4 堆密度 按附录A.5 中规定 的测 试方 法进行 测定 。 5.2.5 重金属 （以 Pb 计） 按GB/T5009.74中规定 的方 法进行 测定 。 5.2.6 铅 按GB5009.12中 规定 的方法 进行测 定。 5.2.7 镉 按GB/T
9、5009.15中规定 的方法进 行测 定。 5.2.8 砷 按GB/T 5009.11中规定 的方法进 行测 定。 5.2.9 汞 按GB/T 5009.17中规定 的方法进 行测 定。 5.2.10 水分 按 GB 5009.3 中规定 的方 法进行 测定 。 5.2.11 灰分 按 GB 5009.4 中规定 的方 法进行 测定 。 5.2.12 细菌总 数 按 GB4782.2 中 规定 方法进 行测 定。 5.2.13 霉菌及 酵母 菌数 按 GB4789.15 中规定 方法进 行测 定。 5.2.14 大肠 杆菌 按 GB4789.3 中 规定 方法进 行测 定。 5.2.15 沙门
10、氏 菌 按 GB4789.4 中规定 方法 进行 测定 。 6 包装、标签、运输、贮存 SW/T 62013 6 6.1 包装 包装材 料应 符合 GB 9685 食品容 器、 包装 材料 用添 加剂使 用卫 生标 准的 要求 。 6.2 标签 包装标 签上 应标 注： 名称、 批号、 规格、 净含 量、 日期 、 保质期 、 生产 厂名 、 厂址、 产 地、贮 存条 件。 标签 内容 清晰可 见， 标签 应粘 贴牢 固。 6.3 运输 运输时 轻装 轻卸 ，不 得与 有毒、 有害 和易 污染 物品 混装载 运， 严防 雨淋 、暴 晒。 6.4 贮存 产品应 存放 在干 燥、 通 风 、 清洁
11、 的地方 ， 避免 与有 毒、 有害 、 易 腐、 易 污染 等物品 一起 堆放。 6.5 保质期 在符合 规定 的运 输和 贮存 条件 ， 以 及在 包装完 整 、 未经开 启封 口的 情况 下， 保质期 不超 过 24 个月 。 SW/T 62013 7 附录 A (规范性附录) 检验方法 A.1 一般规定 本标准 所用 试剂 和水 ， 在 没有注 明要 求时 ， 均 指分 析纯和GB/T6682 规定 的三 级水 。 实验 中所用 溶液 在未 注明 用何 种溶剂 配制 时， 均指 水溶 液。 A.2薄层色谱（TLC）鉴别方法 A.2.1 设 备 A.2.1.1 层析 缸， 规格 与色 谱
12、板相 适应 。 A.2.1.2 薄层 色谱 板， 涂布 有 0.25mm 厚色谱级 硅胶 ，规格 可选 择 5 cm20 cm A.2.1.3 天平, 感量 0.1mg A.2.1.4 水浴 锅 A.2.1.5 移液 管 1mL ，10mL A.2.1.6 小型 喷雾 器：50 100 mL A.2.2 试剂 和溶 液 A.2.2.1 甲醇 A.2.2.2 无水 乙醇 A.2.2.3 乙酸 乙酯 A.2.2.4 碳酸 钠 A.2.2.5 硫酸 A2.2.6 5%硫酸乙 醇： 移取5mL 的浓硫酸 缓缓 加入 到100mL 的无水乙醇 中， 摇匀， 即得 。 A.2.2.7 水杨 苷标 准品 A
13、.2.3 分析 步骤 A.2.3.1 测试 样品 溶液 称取柳 枝提 取物1.0g （精 确至0.1mg），置 于 25mL 试管中， 加甲 醇10mL 溶解，50水浴 加热振 摇10min，放 置冷 却 至室温 后过 滤作 为测 试样 品溶液 。 A.2.3.2 标准 品溶 液 称取水 杨苷 标准 品20mg(精确至0.1mg) ，置于10mL 试管中， 加甲 醇1mL 溶解，摇匀。 作 为标准 品溶 液。 A.2.3.3 点样 分别吸 取 10 L 的测试 样品溶 液和 标准 品溶 液 ， 沿色谱 板上 基线 处点 成大 小相同 的原 点状。 A.2.3.4 展开 展开剂 为水- 甲醇-
14、乙酸 乙酯（8:15:77 ，V/V/V） 。点样 后的 色谱 板放 于层 析缸中 展开 至 15cm 。 A.2.3.5 显色 将展开 后的 薄层 色谱 板吹 干， 喷 5%硫酸乙 醇溶 液后在 100 105 烘 5min ，自然 光下 观察其 颜色 。 A.2.4 结果 SW/T 62013 8 薄层色 谱测 试结 果示 意图 见图A1 。 薄层板顶端 - - - 紫红色带 展 - 紫红色带 开 紫红色带(水杨苷) 紫红色带(水杨苷) 剂 - 紫红色带 方 - - 向 - 浅棕色带 标 准品溶液 样 品溶液 图 A1 薄层色谱测试结果示意图 A.2.5比移值 计算 测试样 品色 斑的 比
15、移 值R f （A1 ） 式中： L ，按式 （A1 ）计 算： 1 测试 样品 （或 标准 品）色 斑中 心到 原点 的距 离，单 位为 厘米 （cm）。 L 0A.3 水杨苷含量测定方 法 A.3. 1 分析方 法 测试样 品经 超声 提取 后， 采用反 相高 效液 相色 谱法 测定， 用外 标法 计算 样品 含量。 A.3. 2 仪器和 设备 A.3. 2.1 高效 液相 色谱 仪( 附紫外 检测 器) 。 A.3. 2.2 分析 天平 ，感 量为0.01mg。 A.3. 2.3 超声 波清 洗仪 。 展开 剂前 沿到 原点 的距离 ，单 位为 厘米 （cm）。 计算结 果保 留小 数点
16、 后一 位有效 数字 。 A.3. 3 试剂 A.3.3.1 四氢 呋喃 ：色 谱纯 A.3.3.2 甲醇 ：色 谱纯 A.3.3.3 磷酸 A.3.3.4 水杨 苷标 准品 （中 国药品 生物 制品 检定 所提 供） ：纯度 99% ，使用 前应在放 有五 氧 化二磷 的减 压干 燥器 内干 燥24 h 。 A3. 4 色谱条 件 a) 色谱 柱: 十八烷 基键 合硅胶柱 ；100mm4.6mm,3m b) 流动 相: A 相：四 氢呋 喃-0.5% 磷酸 水溶 液（1.8:98.2，V/V）； B 相: 四氢 呋 喃。梯 度洗脱 程序 见表A1 。 表A1 梯度洗 脱程 序 0 1 L L
17、 = f R SW/T 62013 9 时间（min ） A 相 （v/v） B 相 （v/v） 0-15 100 0 15-17 100 90 0 10 17-23 90 10 23-25 90 100 10 0 25-40 100 0 c) 检测 波长: 270nm d) 流速 ：1.0mL/min e) 进样 量 10 L A.3.5 分析步 骤 A.3.5.1 标准 品溶 液的 制备 精密称 取水 杨苷 标准 品15mg （精确至0.01mg），置 于 50mL 容量瓶中 ，加25毫 升甲醇- 水 溶液（8:2 ，V/V） ，超声 溶解，冷 却后 用水 定容 至刻 度，摇 匀， 备用
18、。 A.3.5.2 供试 品溶 液的 制备 准确称 取测试样 品30mg （50%规 格） 或60mg （25% 规格） ， 精确 至0.01mg，置于50mL 容 量瓶中， 加25 毫升 甲醇-水 溶液 （8:2 ，V/V ） ， 超 声溶 解， 冷却 后用 水定 容至 刻 度， 摇匀。 用 0.45 m 微孔滤 膜过 滤， 待 测。 A.3.6 结果 计算 柳枝提 取物 中水 杨苷 的含 量以质 量分 数X 1计， 数值 以%表示， 按式(A2) 计算： （ A2 ） 式中： A 供试品 溶液 中水 杨苷的峰 面积 ； A s 标准 品溶 液中 水杨 苷的峰 面积 ； c s 标准品 溶液
19、 中水 杨苷的浓 度， 单位 为毫 克每 毫升(mg/mL) ； V 样品溶 液定 容体 积， 单位 为毫 升（mL）； m 供试 品的 称样量 ， 单位为 毫克(mg) ； P 水杨苷 标准 品纯 度， （%）； A.4 粒度的测定方法 A.4.1 设备 A.4.1.1 分样 筛（ 带筛 盖 与接收 盒） ，80 目。 A.4.1.2 天平 ，感 量 0.01g 。 A.4.2 操作步骤 将 80 目分 样筛 放在 接收 盒 上，称 取约 50g 提取物 粉末（m 1 ） ，精确 至 0.01g，置于分 样 筛内， 将筛 盖盖 好。 将分 样筛保 持水 平状 态， 左右 往返轻 轻筛动 5m
20、in ，称量 接收盒 内的 提 取物粉 末质 量（m 2 ） ，精确至 0.01g。 A.4.3 结果 计算 样品 的 80 目筛 通过 率以X 2.(A3) 计，数 值以%表示， 按式 (A3) 计算： % 100 1 2 2 m m X = % 100 c X 1 P m A V A s s SW/T 62013 10 式中： m 1 过筛前 样品 的质 量，单位 为克 （g）； m 2 过筛后 接收 盒内 样品质量 ，单 位为 克（g）。 A.5 堆密度的测定方法，堆密度分为松密度和紧密度 A.5.1 设备 A.5.1.1 天平 ，感 量为 0.01g。 A.5.1.2 量筒 ，100m
21、L 。 A.5.2. 分析步骤 A.5.2.1 量筒 的准 备： 取 洁净、 干燥 的量 筒， 并称 量其质 量（m 3 ）精 确到 0.01g。 A.5.2.2 松密 度的 测定 ： 将通 过 80 目筛 的测 试样 品缓缓地 加入 量筒 中至 90mL （5 mL）处， 缓缓 抚平粉末 表面，读 取固体 粉末的体 积（V 1 ） ，称量量 筒与测试 样品的质 量（m 4 ）， 精确 到 0.01g。 A.5.2.3 紧密 度的测 定： 将上述 盛有 测试样 品的 量 筒放在 试验 台上（ 铺有 约 5mm 厚的橡胶 垫） ， 由 2cm 左右的 高度 自由坠到 台面 上， 反复此 操作 1
22、00 次， 量得压 紧后 的粉末体 积 （V 0 ）， 继续上 述操 作 30 次， 量得粉末体 积 （V 2 ）。 当 V 0 与V 2 相差小 于 2mL 时， 读取 最 终体积 （V 2 ）。 A.5.3 结果计算 松密度 以X 3 计， 紧密度 以X 4(A4) 计， 单位 均为g/100mL ， 分别按 式 （A4）和式 （A5 ）计 算。 .(A5) 式中： m 3 量筒的 质量 ，单 位 为克（g） m 4 测试样 品和 量筒 的质量， 单位 为克 （g ）V 1 松散 体积 ，单 位为 毫升， （mL ）V 2 100 - 1 3 3 V m m X 4 = 紧密 体积 ，单
23、位为 毫升， （mL ） 附录 B 100 - 2 3 V m m X 4 4 = SW/T 62013 11 （资料性附录） 水杨苷 液相 色谱 图 图 B.1 水杨苷标准品液相色谱 图 图 B.2 50% 水杨苷试样液相色谱图 SW/T 62013 12 图 B.3 25% 水杨苷试样液相色谱图 表B1 水杨苷参考保留时间 名 称 保留时间（min ） 水杨苷标准品溶液 5.07 50% 水杨苷试样溶液 5.08 25% 水杨苷试样溶液 5.08 非商业性声明： 上述所采用的设备、 色谱柱、 标准对照品等 ， 涉及具体商业品牌、 型号的 ， 仅供参考， 无商业目的，鼓励标准使用者尝试使用不同品牌、型号的设备、色谱柱及标准品。
