1、ICS 67.180.10X 31场8-(G8-中华人民共和国国家标准GB/T 18932. 10-2002蜂蜜中澳蜻醋,4 ,4-澳二苯甲酮残留量的测定方法气相色谱质谱法Method for the determination of bromopropylate and4，4-dibromobenzophenone residues in honey-Gas chromatography/mass spectrometry2002一12一30发布2003一06一01实施中华人民共和匡国家质量监督检验检疫总局GB/T 18932 10-2002前 曰J 目GB/T 18932-2002分为12
2、个部分，本部分为第10部分。GB/T 18932的本部分遵循GB/T 20001. 4-2001(!标准编写规则第4部分：化学分析方法的编写规则。本部分的附录A、附录B、附录C为资料性附录。本部分由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。本部分由中华全国供销合作总社归口。本部分起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局。本部分主要起草人：庞国芳、刘永明、林忠。本部分系首次发布的国家标准。GB/T 18932 10-2002蜂蜜中澳蜻醋、4。4仁二澳二苯甲酮残留量的测定方法气相色谱质谱法范围GB/T 18932的本部分规定了蜂蜜中澳蜻醋,4,4一二澳二苯甲酮残留量气相色谱质谱测定及质谱确
3、证方法。本部分适用于蜂蜜中澳蜻醋,4,4嗅二苯甲酮残留量的测定。本部分的方法检出限：滨蜻醋为0. 012 m司kg; 4,4- -嗅二苯甲酮为。.040 m刃kg2规范性引用文件下列文件中的条款通过GB/T 18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB/T 6379-1986测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性(neq ISO 5725：1981)GB/T 668
4、2-1992分析实验室用水规格和试验方法（neq ISO 3696;1987)3原理试样中残留的嗅蜡酷和4，4气二嗅二苯甲酮用甲醇水提取，经过Oasis HLB固相萃取柱或相当者萃取净化后，用气相色谱质谱仪选择离子检测方式直接测定，外标法定量。必要时，用多离子检测方式确证。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682-1992规定的一级水。4 1甲醇：一级色谱纯。42正己烷：重蒸馏。43甲醇水（(8+7)：将80 mL的甲醇与70 mL的水混合。4 4 Oasis HLB固相萃取柱或相当者：3 mL, 60 mg。使用前，用3 ml，甲醇活化和3 ml,水平衡萃取柱。4
5、5标准物质：嗅蜡醋纯度妻98.50a;4,4一二浪二苯甲酮纯度妻97a46标准溶液：分别准确称取适量的澳蜡醋,4,4-澳二苯甲酮标准物质（4.5)，用正己烷溶解配成浓度为0. 1 mg/mL的标准储备溶液。根据需要用正己烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。5仪器5 1气相色谱质谱联用仪。52液体混匀器。GB/T 18932 10-200253旋转蒸发器。54真空泵。55固相萃取真空装置。56玻璃储液器:50 mL,57微量注射器：10 jAL,6试样的制备与保存61试样的制备对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀；对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅
6、速冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并标明标记。62试样的保存将试样于常温下保存。7分析步骤71提取称取5g试样，精确至0. 01 g,置于150 mL三角瓶中。加人15 mL甲醇十水（(4-3)，在液体混匀器上快速混合1 mm，使试样完全溶解。72净化将上接玻璃储液器（5.6)的Oasis HLB固相萃取柱（4.4)安装在固相萃取真空装置（5.5）上，把混合均匀的样液倒人玻璃储液器，在减压情况下，调节样液以约2 mL/min速度通过固相萃取柱，待样液完全流出后，用10 mL甲醉水分三次洗涤三角瓶，并过柱。弃去全部流出液，萃取柱在65 kPa负压下减压抽干15
7、 min，用10 mL正己烷洗脱萃取柱，洗脱液收集于鸡心瓶中。在旋转燕发器上浓缩至干，用正己烷定容1 mL，摇匀。此溶液供气相色谱质谱仪测定。73测定731气相色谱质谱测定条件a)色谱柱:DB-5MS(30 in X0.25 mm X0. 10 ptm）石茱毛细管柱或相当者；b）色谱柱温度：50保持0. 5 min，然后以20C/min程序升温至280 C，保持5 min;c）载气氦气，纯度李99.999，流速：1. 4 ml./min,d）进样口温度：290 C ;e)进样量1 ptL;f)进样方式：无分流进样，1 min后开阀；g）电子轰击源(Ell:70 eV;h)离子源温度：2500C
8、；）GC-MS接口温度：280C ;J)电子倍增电压：自动调谐；k）选择离子检测:m/z 341,m/z 340;辅助离子：m/z 183,m/z 261.732气相色谱质谱测定根据样液中杀蜡剂浓度，选定峰面积相近的标准工作液。标准工作液和样液中杀蜡剂的响应值均应在仪器检测的线性范围内。标准工作液与样液等体积参插进样测定。澳蜡醋选择m/z 341,4,4-澳二苯甲酮选择m/z 34。作为定量离子进行定量测定。根据峰面积计算样品中浪蜻酷、4,4-漠二苯甲酮的实际含量。在上述色谱质谱条件下，4, 4-浪二苯甲酮的保留时间约为8. 8 min,澳蜡醋的保留时间约为10 2 min.GB/T 1893
9、2 10-2002标准物质的选择离子检测色谱图参见附录A中图A. 1,本方法的添加回收率数据参见附录C,74确证741色谱质谱确证条件确证的测定条件除检测方式外，其他条件同7.3.1.检测方式：多离子检测。742色谱质谱确证用标准溶液测定澳蜻醋和4,4一二嗅二苯甲酮多离子（m/z 341,m/z 340,m/z 183,m/z 261）检测质谱图，根据质谱图，得到所选择的离子之间丰度之比值。澳蜻酷的丰度比约为100 a 12 s 48 : 10;4,4-二澳二苯甲酮的丰度比约为10 =57 .100:22。在对样液和标准工作液按7.3.1条件进行测定时，如果样液和标准工作液在相同保留时间有检测
10、离子峰出现，则用多离子检测方式进行检测，得出被测物中离子之间丰度之比值，并与标准溶液相对照来确证。标准物质的扫描质谱图参见附录B中图B. 1,图B. 2 ,75平行试验按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。76空白试验除不称取试样外，均按上述分析步骤进行。8结果计算结果按式（1)计算：A。C。V人今八，m。，。（1）式中：X试样中杀蜡剂残留量，单位为毫克每千克（mg/kg) ;A样品溶液中杀蜡剂的峰面积；C一一一标准工作溶液中杀蟠剂的浓度，单位为微克每毫升（jAg/mL),V一一样品溶液定容体积，单位为毫升（mL) ;A,标准溶液中杀蜡剂的峰面积；m样品溶液所代表的试样I，单位为克（9）。注
11、计算结果应扣除空白值。9精密度GB/T 18932的本部分精密度数据是按照GB/T 6379-1986的规定，通过八个实验室对四个添加水平的试样所做的试验中确定的。获得重复性和再现性的值是以95的可信度来计算。91重复性在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限（：），澳蜡酷和4, 4-澳二苯甲酮的含量范围及重复性方程见表1 ,表1含f范围及皿复性和再现性方程单位为毫克每千克名称含量范围重复性限r再现性限R澳蜡醋0 0120 12Igr=O 804 2 Igm-1 534 0R=0 091 1 m+O 001 54,4一二澳二苯甲酮0 0400 40r=0 058 1 m-
12、0 000 41gR=0 541 2 Ig。一1 409 7注m为两次侧定值的平均值。GB/T 18932 10-2002如果差值超过重复性限，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。92再现性在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限（R),澳蜡醋和4,4一二澳二苯甲酮的含量范围及再现性方程见表laGB/T 18932 10-2002附录A（资料性附录】选择离子检洲色讲图R 819280064.4一二澳二苯甲砚10 185澳幼西图A 1选择离子检测色谱图GB/T 18932 10-2002附录B（资料性附录）标准物质质漪圈B 1澳蜻醋标准物质质谱图9000008500
13、0080000075000070000065000060000055000050000()45000040000035000300000-b101T0020000015000 010000050000076 10440 60 ,一 j， 12680 100 120 1犯160 180209 2份下1飞1份200 220281 310 325240 260 280 300 320 940367 389叮r了甲了甲甲于甲于360 380m/z一圈B 1澳摘命标准物质质谱圈B 2 4,4一二澳二苯甲酮标准物质质谱圈以加仪沉OC仪000000加朋 别4540书朋15000012仑辛”喇卜，120 14
14、0206 232协281 31240 60160 1B0 200 220 240 260 280 300 320 340m2一355 377门，甲甲了护360 380图B 2 4,4一二澳二苯甲酮标准物质质谱图GB/T 18932 10-2002附录C（资料性附录）回收率本方法中澳蜡醋和4,4一二嗅二苯甲酮添加浓度及其回收率的试验数据：澳蜻酷在添加量为0. 012 mg/kg时，平均回收率为93.81%;在添加量为0. 060 mg/kg时，平均回收率为93.17 % ;在添加量为。.120 mg/kg时，平均回收率为98.87%04,4-=澳二苯甲酮在添加量为0. 040 mg/kg时，平均回收率为92. 34%;在添加量为0. 20 mg/kg时，平均回收率为93.90%;在添加量为0. 40 mg/kg时，回收率为92.51纬
