1、1考点 76 DNA的粗提取与鉴定 1实验原理(1)DNA 与蛋白质在不同浓度的 NaCl溶液中溶解度不同溶解规律2 mol/L NaCl溶液0.14 mol/L NaCl 溶液DNA 溶解 析出蛋白质NaCl溶液物质的量浓度从2 mol/L逐渐降低的过程中,溶解度逐渐增大部分发生盐析沉淀溶解(2)DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理可将DNA与蛋白质进一步分离。(3)DNA 与二苯胺沸水浴加热,呈蓝色。2操作流程2考向 DNA 的粗提取与鉴定过程分析1下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是A鸡血细胞是较理想的实验材料BDNA 的溶解度随 Na
2、Cl溶液浓度的升高而增大C洗涤剂能瓦解细胞膜,但对 DNA没有影响DDNA 溶液中加入二苯胺试剂,沸水浴加热,检测结果呈蓝色【参考答案】B技法提炼DNA的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”加蒸馏水 2次加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水涨破;加到含 DNA的 2 mol/L的 NaCl溶液中,使 NaCl溶液的物质的量浓度稀释到 0.14 mol/L,使DNA析出用纱布过滤 4次过滤血细胞破裂液,得到含细胞核物质的滤液;过滤用 2 mol/L的 NaCl充分溶解的 DNA,滤去溶液中的杂质;滤取 0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的 DNA(黏稠物);过滤溶有 DNA的 2 mol/L的 N
3、aCl溶液用 NaCl溶液 4次加 2 mol/L的 NaCl溶液,溶解提取的细胞核物质;用 0.14 mol/L的 NaCl溶液使 DNA析出;用 2 mol/L的 NaCl溶液,溶解滤取的 DNA黏稠物;用 2 mol/L的 NaCl溶液,溶解丝状物用于鉴定 DNA32DNA 提取过程中可以选用鸡血或者菜花作为实验材料。请回答下列关于 DNA粗提取和鉴定的问题:(1)使用鸡血提取 DNA时,需在鸡血中加入柠檬酸钠,目的是_;在鸡血细胞液中加入蒸馏水,目的是_。(2)使用菜花提取 DNA时,需要研磨,研磨时可加入一定的洗涤剂和食盐,其作用分别是_和_。(3)DNA 在浓度为_mol/L 的氯
4、化钠溶液中溶解度最低。使用体积分数为 95%的冷却酒精可使 DNA_(填“析出”或“溶解”)。(4)使用二苯胺鉴定 DNA时,需要在_条件下进行,DNA 与二苯胺反应呈现_色。【答案】(1)防止血液凝固 使鸡血细胞破裂(2)瓦解细胞膜 溶解 DNA(3)0.14 析出(4)沸水浴 蓝1在 DNA粗提取实验中,应尽可能避免 DNA断裂和降解。相关操作正确的是A以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进 DNA溶解B向 DNA溶液中迅速加入蒸馏水,使 DNA快速析出C将丝状物溶解到 2 molL-1NaCl溶液中后,加水析出D向 DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌2在利用菜花进行“DN
5、A 粗提取与鉴定”实验中,相关操作正确的是A将 DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝B向菜花研磨液中加入适量的蒸馏水,以降低 DNA酶活性4C向质量浓度为 2 mol/L的 NaCl溶液中加入蒸馏水析出 DNA时,应快速加入,直到出现黏稠物为止D向溶有粗提物的 NaCl溶液中加入冷却的体积分数 95%的酒精,可获得较纯净的 DNA3在 DNA的粗提取实验过程中,对 DNA提取量影响较小的是A使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,释放出 DNA等核物质B搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C在析出 DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸馏水,直至黏稠物不再增多D要用冷酒精沉淀 DNA,甚至可将混合液再放入冰
6、箱中冷却4下列反映 DNA溶解度与 NaCl溶液浓度之间关系的坐标图,正确的是A BC D5关于“DNA 的粗提取与鉴定”实验中不属于该实验依据的原理是ADNA 在 NaCl溶液中的溶解度随 NaCl溶液浓度的不同而不同B利用 DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的 DNACDNA 是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D在沸水中 DNA遇二苯胺会出现蓝色反应6如图是利用鸡血粗提取 DNA的基本操作,下表中操作目的不能实现的是5AA BBCC DD7下图是“DNA 粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图,下列有关叙述错误的是A图 1中的丝状物含有 DNAB图 1所
7、示操作的原理是 DNA能溶于酒精,而蛋白质等杂质不溶C图 2所示实验操作完成后,最好待试管溶液冷却后观察颜色变化D图 2中的溶液 b能够溶解 DNA8在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同,下列有关叙述不正确的是6A实验材料选择错误的组别是丙B沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C甲组实验现象差的原因是 25 的酒精对 DNA的凝集效果差D乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂9如图为菜花 DNA的粗提取与鉴定的实验流程图。据图回答下列问题:(1)选择菜花作为提取 DNA的实验材料的原因是_。(2)研
8、磨前,向研钵中加入石英砂的目的是_,加入的物质 a是_。(3)研磨液过滤后,应向滤液中加入 2 mol/L的 NaCl溶液,目的是_;也可以向滤液中加入嫩肉粉,目的是_。(4)鉴定 DNA所用的化学试剂为_,鉴定实验中,A、B 两支试管属于对照组的是_,对照组试管中加入的物质有_。10回答下列有关“DNA 的粗提取和鉴定”实验的问题。(1)下列有关“DNA 的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是_。ADNA 在 NaCl溶液中的溶解度随 NaCl溶液浓度的降低而减小B利用 DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNACDNA 是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶
9、剂D在沸水中,DNA 遇二苯胺会出现紫色反应(2)如图为该实验过程中的一些重要操作示意图。7正确的操作顺序是_。上图 C、E 步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是_和_。图 A步骤中所用酒精必须经过_才能使用,该步骤的目的是_。(3)为鉴定 A中所得到的丝状物的主要成分为 DNA,可滴加_试剂,沸水浴,如果出现_,则该丝状物的主要成分为 DNA。11(2015江苏卷)图 1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是A. 图 1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同B. 图 1 中完成过滤之后保留滤液C. 图 2 中完成过滤之后弃去滤液D. 在图 1 鸡血细胞
10、液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质81【答案】D【解析】以菜花为材料进行研磨时,可以加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分地搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,A 项错误;为避免 DNA断裂,加入蒸馏水要缓慢,B 项错误;将丝状物溶解到 2 molL-1NaCl溶液中后,加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为 95%的酒精溶液,静置 23min,以析出含杂质较少的 DNA,C 项错误;为避免 DNA断裂和降解,要向 DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌,D 项正确。2【答案】D3【答案】B【解析】A 项的做法是为了充分释放出核中的 DNA分子,使进入滤液中的 DNA尽量的多;C项是让 DNA充分
11、沉淀,保证 DNA的量;D 项的道理同 C项;而 B项的操作并不能使DNA增多或减少。4【答案】C【解析】NaCl 溶液浓度为 0.14 mol/L时,DNA 的溶解度最低;NaCl 溶液浓度小于 0.14 mol/L时,随着 NaCl溶液浓度的升高,DNA 的溶解度逐渐降低;NaCl 溶液浓度大于0.14 mol/L时,随着 NaCl溶液浓度的升高,DNA 的溶解度逐渐升高。所以 C选项是正确的。5【答案】C【解析】根据“DNA 的粗提取与鉴定的实验”原理:DNA 在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为 0.14mol/L时,DNA 的溶解度最低,利
12、用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的 DNA析出。DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的 DNA。洗涤剂能瓦解细胞膜但是对 DNA没有影响。蛋白质不能耐受较高温度,在 80 条件下会变性,而 DNA对温度的耐受性较高。蛋白酶能水解蛋白质,而对 DNA没有影响。DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作9为鉴定 DNA的试剂。C 选项不属于该实验的原理。6【答案】B7【答案】B【解析】图 1所示的步骤是提取含杂质较少的 DNA,具体操作是在滤过的溶液中,加入冷却的、体积分数为 95的酒精溶液 50 mL,并用玻璃
13、棒搅拌,溶液中会出现含杂质较少的白色丝状物。用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分。这种丝状物的主要成分就是 DNA,A 正确。提取含杂质较少的 DNA利用的原理是 DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中蛋白质、脂质等物质可以溶于酒精溶液,B 错误。图 2所示的步骤是 DNA的鉴定,具体操作是取两支 20 mL的试管,各加入物质的量浓度为 2 mol/L的氯化钠溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。因此,图 2中的溶液 b可以溶解 DNA,D 正确。然后,向两支试管中各加入 4 mL二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5 min,待试管冷却后,观察并且
14、比较两支试管中溶液颜色的变化,C 正确。8【答案】D【解析】鸡血、菜花中都含有 DNA,而猪是哺乳动物,其成熟的红细胞中不含 DNA,因此实验材料选择错误的组别是丙,A 正确;甲、乙、丁的实验材料中都含有 DNA,但乙为植物,将植物细胞放入蒸馏水中时,植物细胞不会吸水胀破,且 DNA应该用二苯胺鉴定,而不能用双缩脲试剂鉴定,因此沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁,B正确;甲组实验现象差的原因是 25 的酒精对 DNA的凝集效果差,C 正确;乙为植物,将植物细胞放入蒸馏水中时,植物细胞不会吸水胀破,且 DNA应该用二苯胺鉴定,而不能用双缩脲试剂鉴定,D 错误。9【答案】(1)菜花中的 DN
15、A含量相对较高(2)使研磨充分 洗涤剂和食盐(3)溶解 DNA,析出不溶的杂质 分解蛋白质10(4)二苯胺 A NaCL 溶液和二苯胺试剂10【答案】(1)B(2)CBEDA 加速血细胞的破裂 降低 NaCl溶液的浓度,使 DNA析出 充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的 DNA(3)二苯胺 蓝色【解析】(1)根据 DNA粗提取和鉴定的原理:DNA 的溶解性,DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同,利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将 DNA溶解或析出,从而达到分离的目的;DNA 不溶于酒精溶液,细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精,利用这一原理可以将蛋白质和 DN
16、A进一步分离;DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质,但是不能水解 DNA,蛋白质不能耐受较高温度,DNA 能耐受较高温度,洗涤剂能瓦解细胞膜,但是对 DNA没有影响;在沸水浴的条件下 DNA遇二苯胺会呈现蓝色。分析选项可知,B 正确。(2)根据 DNA的粗提取和鉴定步骤:加入蒸馏水,破碎细胞过滤,获取含 DNA的滤液,去除滤液中杂质,DNA 的析出,鉴定。所以正确的操作顺序是 CBEDA。C 加蒸馏水是使血细胞吸水破裂,E 加蒸馏水是使 NaCl溶液的浓度降低,析出 DNA。DNA不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以 A步骤中所用酒精必须经过充分预冷才能使用,以便除去溶于酒精的杂质,提取含杂质较少(或较纯净)的 DNA。(3)DNA 鉴定用二苯胺水浴加热,呈蓝色。11.【答案】BCD11质,D 正确。