1、ICS 67.050 X04 DB36 江西省地方标准 DB 36/ T6422011 蔬菜中苯并（）芘测定 高效液相色谱法Determination of benzo( )pyrene in vegetableHPLC method 2011 - 12 - 30 发布 2012 - 02 - 01 实施江西省质量技术监督局 发布DB36/ T6422011 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1 2009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写给出的规则起草。 本标准附录A为规范性附录。 本标准由南昌市质量技术监督局提出。 本标准起草单位：农业部肉及肉制品质量监督检验测试中心，南昌市质量技
2、术监督局。 本标准主要起草人： 廖且根，罗林广，戴廷灿，李伟红，王冬根，杨敏。 DB36/ T6422011 1 蔬菜中苯并（）芘测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了蔬菜中苯并（）芘含量测定的高效液相色谱法。 本标准适用于空心菜、辣椒、黄瓜等叶菜类、瓜果类蔬菜。 本标准方法的检出限为0.5 g/kg，本标准方法的线性范围为1.0 g/kg20.0 g/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3、3 原理 蔬菜中苯并（）芘用乙腈提取，经硫酸镁盐析，提取液N- 丙基乙二胺（PSA）净化，高效液相色谱测定（荧光检测器）。外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明，仅使用确认为分析纯的试剂，实验用水应符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1 乙腈 色谱纯。 4.2 甲醇 色谱纯。 4.3 无水硫酸镁 于140 C焙烧4 h，在干燥器内冷至室温，贮于密封瓶中备用。 4.4 N-丙基乙二胺（PSA） 40 m，60 。 4.5 苯并（）芘标准品 纯度98%。 4.6 苯并（）芘标准储备液 DB36/ T6422011 2 准确称取苯并（）芘标准品0.01g（精确到0.1mg）于100 mL容
4、量瓶中，用甲醇溶解并定容到刻度。该储备液浓度为0.1 mg/mL。置-18 C冰箱中保存。 4.7 苯并（）芘标准工作液 准确移取适量苯并（）芘标准储备液，用乙腈稀释定容。置冰箱中保存。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱仪，带荧光检测器。 5.2 天平：感量 0.01g 和 0.01mg 。 5.3 匀浆机：转速不低于 10000 r/min 。 5.4 超声波发生器。 5.5 离心机：转速不低于 5000 r/min 。 5.6 旋涡混合器。 5.7 捣碎机。 6 试样制备 称取200.0g蔬菜样，用捣碎机打碎制成糜状，试样在-18 C以下保存。 7 分析步骤 7.1 提取 称取10g（精确
5、到0.01g）制备好的蔬菜置于50 mL 离心管中，加入10.0 mL乙腈，高速匀浆2 min，超声10 min, 加入2g 无水硫酸镁，剧烈振摇1min, 5000 r/min离心5 min，使乙腈和水相分层。 7.2 净化 移取2 mL上层乙腈溶液于10 mL离心管中，加入400 mg 无水硫酸镁和100 mg PSA，旋涡混合1min，5000 r/min离心5 min，过0.45 m滤膜，供液相色谱仪测定。 7.3 测定 7.3.1 色谱条件 色谱柱: Venusil XBP C18，5 m ，4.6 mm 250mm，或相当者。 流动相：甲醇。 流速：1.0 mL/min。 荧光检测
6、器：激发波长 384nm；发射波长 406nm。 柱温：30 C。 进样量：20 L。 7.3.2 测定方法 按仪器条件，对标准溶液和试样溶液等体积交替进样，保留时间定性，苯并（a）芘的响应值均应在仪器检测的线性范围内，外标法定量。标准溶液和试样溶液的色谱图见附录A。 DB36/ T6422011 3 7.3.3 空白测定 除不加试样外，采用与7.1和7.2相同的步骤平行操作。 8 结果计 算 试样中苯并（）芘的含量以X计，按式（1）计算： A CSV X = （1） ASm 式中 X试样中苯并（）芘的含量，单位， g/kg； A试液中苯并（a）芘峰面积； AS标准工作溶液中苯并（a）芘峰面积； CS标准工作溶液中苯并（a）芘浓度，单位， g/L； V试样定容体积，单位：mL； m称样量，单位：g。 注：计算结果保留三位有效数字 9 检验方法精密度 在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于两个测定值的算术平均值的20 %。 DB36/ T6422011 4 AA 附 录 A （资料性附录） 苯并()芘高效液相色谱图 图A.1 苯并（ ）芘标准溶液的液相色谱图（浓度为 5.0 g/L） 图A.2 辣椒中苯并（ ）芘的液相色谱图 _
