1、书书书 犐犆犛 犃 中华人民共和国国家标准 犌犅 犜 犇犎犃 、 犈犘犃 含量测定 气相色谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犱狅犮狅狊犪犺犲狓犪犲狀狅犻犮犪犮犻犱犪狀犱犲犻犮狅狊犪 狆 犲狀狋犪犲狀狅犻犮 犪犮犻犱犮狅狀狋犲狀狋 犌犪狊犮犺狉狅犿犪狋狅 犵 狉犪 狆 犺 狔 发布 实施 国家市场监督管理总局 中国国家标准化管理委员会 发布 书书书 前 言 本标准按照 给出的规则起草。 本标准由中国标准化研究院提出并归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院、中国水产科学研究院南海水产研究所、中国标准化研究院、 浙江省海洋水产研究所、北京萨姆伯科技有限公司、河北养元智汇饮品股份有限公司、中国农
2、村技术开 发中心、华测检测认证集团北京有限公司、中国科学院过程工程研究所。 本标准主要起草人：杨贤庆、荣辉、李乐、张小军、邓建朝、马爱进、岑剑伟、李来好、马海霞、宋金龙、 郝帅、姚奎章、戴炳业、董立雅、黄永东、夏君霞、赵慧博、齐兵、崔岩。 犌犅 犜 犇犎犃 、 犈犘犃 含量测定 气相色谱法 范围 本标准规定了用气相色谱法测定二十二碳六烯酸（ ）、二十碳五烯酸（ ）含量的方法。 本标准适用于鱼油、微藻中 、 含量的测定。 本标准不适用于乙酯化的鱼油测定。 本方法检出限为 ，定量限为 。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是
3、不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 分析实验室用水规格和试验方法 原理 试样经三氯甲烷 甲醇法提取油脂，然后经甲酯化后，气相色谱毛细管柱分离，氢火焰离子化检测器 检测，内标法定量。 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 水： ，一级。 甲醇：色谱纯。 正己烷：色谱纯。 犇犎犃 ：纯度 。 犈犘犃 ：纯度 。 十七碳烷酸：纯度 。 犿狅犾 犔 氢氧化钾 甲醇溶液： 称取 氢氧化钾溶于 无水甲醇中，充分混匀。 犿犵 犿犔 十七碳烷酸内标储备液： 称取 十七碳烷酸于 容量瓶中，加入适量正己烷使溶解，并稀释至刻度，摇匀。 犇犎犃 和 犈犘犃 标准工作溶液： 分别称
4、取 的 和 标准品于 容量瓶中，加入适量正己烷使溶解，并稀释至 刻度，摇匀。然后分别取 、 、 、 、 于 个 容量瓶中，分别移入 十七碳烷酸内标储备液 ，加入正己烷使溶解，并稀释至刻度，摇匀。 仪器设备 气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（ ）。 犌犅 犜 天平：感量 、 。 研磨仪。 旋涡式振荡混合器。 超声波破碎仪。 真空干燥箱。 恒温水浴锅。 测定步骤 取样 微藻：称取 微藻，研碎后称取 均匀样品，待提取油脂所用。 鱼油：取 。 提取 取 微藻干粉试样，放入 聚四氟乙烯试管中，加入 蒸馏水，加入三氯甲烷 甲醇 （ ，体积比）混合液 ，振荡混匀后用超声波破碎仪破碎 ，加入 三氯甲烷振荡混
5、 匀 ，再加入 蒸馏水振荡混匀 ，分液漏斗静置分层，分离油层，真空干燥，称重并计算油脂 含量。 脂肪酸甲酯化 称取 油脂样品置于 带盖离心管中，加入 乙醚 正己烷（ ，体积比）混合液，摇 匀后 ，加入 的氢氧化钾 甲醇溶液 ，摇匀后在 恒温水浴下反应 ，沿壁 加水到 刻度处，静置分层，将上清液全部转移至量器内，用正己烷定容至 ，稀释一定倍数后 待进样分析。 测定 气相色谱参考条件 气相色谱参考条件如下： ） 色谱柱：聚二氰丙基硅氧烷毛细管柱（ ），或相当者； ） 载气及流速：载气为氮气，流速为 ； ） 柱温程序：初始温度 （保持 ），以 速率升到 ，保持 ； ） 进样口温度： ； ） 检测器温
6、度： ； ） 进样量： ； ） 进样方式：分流进样，分流比 。 标准曲线绘制 分别取不同浓度的标准工作溶液和空白溶液（正己烷）各 按 甲酯化后，依次进样，扣除空 白值，分别测定 甲酯、 甲酯和十七碳烷酸甲酯的峰面积。 分别以标准工作溶液 和 的质量浓度与内标物质量浓度的比为横坐标，以 甲酯和 甲酯分别与十七碳烷酸甲酯的峰面积比为纵坐标，绘制标准曲线。色谱图参见附录 中图 。 犌犅 犜 结果分析 试样中 或 的含量按式（ ）计算： 狑 犞狀 （ 狔犫 ） 犳 犪犿 （ ） 式中： 狑 试样中 或 的含量，单位为克每百克（ ）； 犞 试液最终定容体积，单位为毫升（ ）； 狀 试液稀释倍数； 狔 试
7、样中 甲酯或 甲酯与十七碳烷酸甲酯的峰面积比； 犫 标准曲线的截距； 试液最终内标物的质量浓度，单位为毫克每毫升（ ）； 犳 甲酯转换为 的转换系数（取值 ），或 甲酯转换为 的转换系数 （取值 ）； 犪 标准曲线的斜率； 犿 试样的质量，单位为毫克（ ）。 计算结果以平行测定值的算术平均值表示，保留三位有效数字。 重复性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 。 犌犅 犜 书书书 犌犅 犜 附 录 犃 （资料性附录） 犇犎犃 、 犈犘犃 、十七碳烷酸标准品色谱图 、 、十七碳烷酸标准品色谱图见图 。 图 犃犇犎犃 、 犈犘犃 、十七碳烷酸标准品色谱图 犜 犅 犌 版权专有 侵权必究 书号： 定价： 元
