SN T 2985-2020 马流行性感冒检疫技术规范.pdf

1、以正式出版文本为准 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2985 2020 代替 SN/T 29852011 马流行性感冒检疫技术规范 Quarantine protocol for equine influenza 2020-12-30 发布 2021-07-01 实施 ICS 11.220 CCS B 41 中华人民共和国海关总署发 布 以正式出版文本为准 以正式出版文本为准 SN/T 2985 2020 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.12020 给出的规则起草。 本文件代替 SN/T 29852011马流行性感冒检疫技术规范。 本文件与 SN/T 29852011 相

2、比，主要技术差异如下： 参照陆生动物诊断试验和疫苗手册（2016 版）优化了试验方法； 增加了单向辐射溶血试验； 增加了 H3N8 马流感病毒核酸检测荧光 RT-PCR 方法。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国北京海关、中华人民共和国长春海关、中华人民共和国天津 海关。 本文件主要起草人：史喜菊、柏亚铎、齐玮、汪琳、高志强、孟庆峰、张利峰、张伟、王伟利、 董志珍、槐硕。 本文件所代替文件的历次版本发布情况为： SN/T 29852011。 以正式出版文本为准 以正式出版文本为准 1 SN/T 2985 2020 马流行性感冒检疫技术规范 1 范围 本文

3、件规定了马流行性感冒的临床诊断和实验室诊断。 本文件适用于进出境马流感的检疫。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 GB/T 19489 实验室 生物安全通用要求 SN/T 1687 马流感血凝抑制试验操作规程 3 术语、定义和缩略语 本文件没有需要界定的术语和定义。下列缩略语适用于本文件。 EI ：马流感（equine influenza） EIV ：马流感病毒（equine influenza virus） HA ：血凝

4、试验（haemagglutination） HI ：血凝抑制试验（haemagglutination inhibition） MDCK ：犬肾细胞（madin-darby canine kidney） PBS ：磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline） RT-PCR ：反转录聚合酶链反应（reverse-transcription polymerase chain reaction） SRHT ：单向辐射溶血试验（single radial haemolysis test） 4临床诊断 4.1临床症状 马流行性感冒是由正黏病毒科A型流感病毒属中两个抗原性不同的A型流感

5、病毒亚型 （H7N7，称为马 -1 型；H3N8，称为马 -2 型）所引起的一种急性呼吸道疾病。易感马发病时， 临床症状表现为发热，发出刺耳的干咳，鼻流黏性脓性分泌物；有一定免疫力马发病时，上述症 状可能不会全部表现出来。 4.2病理变化 4.2.1病理解剖变化 眼观病变为结膜潮红、水肿、外翻，呈砖红色或淡黄色，常出现角膜浑浊。上呼吸道黏膜充 血、水肿和渗出，上皮细胞脱落与局灶性糜烂。头、颈部淋巴结肿大。肺脏充血、水肿，扩张不 全。肝脏一般无明显眼观病变。 以正式出版文本为准 2 SN/T 2985 2020 4.2.2 病理组织学变化 表现为急性支气管炎与细支气管炎，以管腔内有多量嗜中性粒细

6、胞渗出为主要特征。炎症一 过性，一般只见于发病后的头 4 d，其后炎症消退，黏膜内遗留有轻度淋巴细胞，浆细胞浸润。 严重的病例为急性支气管间质性肺炎，表现为肺泡纵膈普遍增厚，增生的细胞为组织细胞与淋巴 细胞。肝脏可发现肝窦状隙内有弥散性或结节性淋巴细胞、组织细胞浸润。 4.3 流行病学 自然条件下，只有马属动物易感，没有年龄、性别和品种差别。病马咳嗽喷出含有病毒的飞 沫，经呼吸道传染是本病主要的传播方式。实验证明，此病可通过空气传播，也可通过污染的饲 料、饮水经口传染。病毒在康复马匹的精液中存在很久，因此性交也是此病的一种重要传播方式。 本病传播极为迅速，引进易感畜群，呈爆发性流行，经 1 周

7、或稍多些时间，所有易感马都感染发 病。本病一年四季均可发生，我国北方地区以春秋多发。有些地区则多发生于冬末春初，而另一 些地区则流行于夏季。 5 实验室诊断 5.1 病原分离鉴定 5.1.1 实验室生物安全要求 马流感病毒病原分离鉴定应在生物安全 2 级实验室或相应级别的生物安全柜中进行，实验室 条件应符合 GB 19489 要求。 5.1.2 设备、材料和试剂 5.1.2.1 设备 高速台式冷冻离心机、台式离心机、旋涡振荡器、冰箱（4 和-20 ）、高压灭菌锅、酶标仪、 荧光 PCR 仪、PCR 反应管或反应板、倒置显微镜、微量可调移液器（10 L、200 L、1 000 L ）。 5.1.

8、2.2 材料和试剂 5.1.2.1 采样用：棉拭子、剪刀、镊子、注射器、1.5 mL离心管、研钵，采样工具应经121 2 、 15 min 高压灭菌并烘干，pH 7.2、0.01 mol/L PBS，配制方法见附录 A，抗生素（青霉素和链霉素）。 5.1.2.2 鸡胚接种用：照蛋器、打孔器、酒精灯，5% 碘酊，70% 酒精，1.0 mL 一次性灭菌注射 器，石蜡，911 日龄 SPF 鸡胚。 5.1.2.3 尿囊液活性测定用：96 孔 V 型微量反应板，振荡器，微量加样器，阿氏液，鸡红细胞悬 液，配制方法见附录 B。 5.1.2.4 细胞接种用：犬肾细胞，新生犊牛血清，细胞培养瓶，MEM 培养

9、液，配制方法见附录 C。 5.1.2.5 病毒抗原 ELISA 检测用：ELISA 检测试剂盒。 5.1.2.6 荧光 RT-PCR 用：TriZol 或其他病毒 RNA 提取试剂盒，反转录磁珠（RT-PCR Ready-To- GoTM beads）， Taq DNA 聚合酶，三氯甲烷、异丙醇、无水乙醇（分析纯）。 5.1.3 采样、送样和处理 5.1.3.1 在临床症状出现后立即采取样品，样品包括鼻咽拭子或鼻、气管冲洗物。 5.1.3.2 拭子是用缠在金属丝上的吸水棉或纱布做成。取样时将鼻咽拭子经前侧鼻道送入鼻咽部 并停留大约 1 min，粘取呼吸道黏液，取出后立即放入盛有运输培养液的小瓶

10、中。鼻、气管冲洗 以正式出版文本为准 3 SN/T 2985 2020 物通过鼻内窥镜检查采取。 5.1.3.3 运输培养液是含有 40% 甘油的 PBS，或是含有 2% 胰蛋白酶的磷酸盐肉汤加 2% 抗生 素溶液（青霉素和链霉素各 10 000 IU/100 mL）和两性霉素 B（250 mg/mL 母液）。 5.1.3.4 如果样品在 1 d2 d 内接种，则 4 保存即可；如果要长时间保存，则应在 -70 或更 低温度保存，运送样品也应冷藏运输。 5.1.3.5 将液体通过挤压从鼻咽拭子挤出，1 500 g离心15 min，取上清液使用。剩余液体放 在 -70 或更低温度保存。 5.1.

11、4 鸡胚病毒分离 5.1.4.1 将 911 日龄 SPF 鸡胚放在照蛋器上照视检查，并用铅笔画出气室与胚胎位置，在气室 边缘上 2 mm8 mm 处避开血管作一标记，并在鸡胚绒毛尿囊膜血管相对较少一侧气室作标记。 5.1.4.2 将鸡胚竖放在蛋座上，钝端向上。用 5% 碘酊消毒蛋壳气室后，用 70% 酒精脱碘消毒， 用无菌处理的打孔器在标记处钻一小孔，勿损伤壳膜。 5.1.4.3 用 1.0 mL 注射器吸取 0.2 mL 处理好的样品，针头刺入孔内，经绒毛尿囊膜注入尿囊腔。 每个样品接种 5 个鸡胚。 5.1.4.4 接种后，石蜡熔化封孔，于 34 35 孵化箱内继续孵育 3 d。接种后

12、24 h 内死亡的鸡 胚弃去。 5.1.4.5 将接种 24 h 后死亡和 3 d 内仍然存活的鸡胚转移到 4 冰箱中 4 h 或过夜，使鸡胚死亡， 无菌收取尿囊液。 5.1.5 尿囊液血凝性测定 5.1.5.1 操作步骤 5.1.5.1.1 在微量反应板的 112 孔内加入 PBS，每孔 0.025 mL。 5.1.5.1.2 再吸取按 5.1.4.5 步骤收集的鸡胚尿囊液 0.025 mL（尿囊液病毒抗原处理方法见 SN/T 16872005）加入第 1 孔，混匀。 5.1.5.1.3 从第 1 孔吸取 0.025 mL 液体加入第 2 孔，混匀后吸取 0.025 mL 液体加入第 3 孔

13、，如 此倍比稀释至第 12 孔，吸弃 0.025 mL。 5.1.5.1.4 每孔再加入 0.025 mL PBS。 5.1.5.1.5 每孔再加入 0.025 mL 1% 的鸡红细胞悬液，加之前，红细胞悬液要充分摇匀。 5.1.5.1.6 轻轻振荡混匀，在 20 25 下静置 40 min 后观察结果，也可于 4 下静置 60 min 后观察结果。 5.1.5.2 结果判定 当红细胞被凝集时，红细胞均匀分布在反应板底部，反应板倾斜片刻不下滑；红细胞未被凝 集时，反应板倾斜片刻，可见沉淀的红细胞向下滑动，形成流线。出现凝集的最高稀释倍数的倒 数为 HA 滴度。判定如下： a） 样品无血凝活性：

14、红细胞没有出现凝集时，则需将各样品尿囊液收集在一起，再经鸡胚 盲传，当传至第 5 代仍未出现血凝活性，判为马流感病毒阴性； b） 样品有血凝活性：将所有血凝试验阳性的样品做小量等份分装保存备用，取一份测 HA 滴度。HA 滴度大于或等于 1/16 时，判为马流感病毒阳性；滴度较低时，要继续传代， 共盲传 5 代，HA 滴度仍低于 1/16 时，判为马流感病毒阴性。 以正式出版文本为准 4 SN/T 2985 2020 5.1.6 细胞培养病毒分离 5.1.6.1 操作步骤 5.1.6.1.1 待犬肾细胞（MDCK）在细胞培养瓶中长成单层后，单层细胞用含 2 g/mL 胰蛋白酶的 组织培养液（无

15、血清）至少洗涤 2 次。 5.1.6.1.2 每孔加入 0.25 mL0.5 mL 接种液，设三个重复，37 二氧化碳培养箱中孵育 1 h。 5.1.6.1.3 再加入无血清含胰蛋白酶 0.5 g/mL2 g/mL 培养液，置 37 二氧化碳培养箱培养。 5.1.6.1.4 每天在显微镜下观察、记录细胞病变情况。 5.1.6.2 结果判定 培养 48 h96 h 后，细胞肿胀变圆，聚团，最后崩解，则为细胞病变。 出现细胞病变或者培养 7 d 后，收集上清液按照 5.1.5.7 进行 HA 测试。HA 滴度大于或等 于 1/16 的判为阳性；无细胞病变和 HA 滴度小于 1/16 的继续传代培养

16、，至少 5 代。 5.1.7 病毒抗原 ELISA 检测 5.1.7.1 操作步骤 5.1.7.1.1 将 100 L 鼻咽拭子的浸出物加到用多克隆兔抗 H3N8 亚型血清包被的微量反应板各孔 内，在 22 2 孵育 90 min，微量反应板用含 0.05% 吐温 -20 的 PBS 液（PBST）洗涤 3 次。 5.1.7.1.2 加100 L已用缓冲稀释液做1 : 50稀释的辣根过氧化物酶-单克隆抗体（MAb）结合物， 37 温箱孵育 1 h，用 PBST 洗涤微量反应板 6 次。 5.1.7.1.3 加 100 L 四甲基联苯胺溶液于微量反应板各孔中，22 2 孵育 10 min，然后加

17、 100 L 0.18 moL/L 硫酸终止反应。使用酶标仪在 450 nm 波长处测定 OD 值。 5.1.7.2 结果判定 按试剂盒说明书，对测定结果进行判定。 5.1.8 H3N8 亚型马流感病毒荧光 RT-PCR 检测方法 5.1.8.1 阳性对照 马流感病毒 RNA 或者体外转录的非感染性 RNA 片段。 5.1.8.2 阴性对照 马流感病毒阴性组织样品。 5.1.8.3 引物和探针序列 HA 基因正向引物：5-AAC CRG TGG CAA CAA CAC AG-3 HA 基因反向引物：5-TCA GTA GCA TTT GTC ACC TCA AT-3 HA 基因探针：5-FAM

18、CTG GGA CAC CAT GCA GTA GCA AAT GGTAMRA-3 NA 基因正向引物：5-CAG CTC CAT TGT GAT GTG TG-3 NA 基因反向引物：5-TCG TAA AYT ACA TCT TRT CGA TGT C-3 NA 基因探针：5-HEX AAG RAT AGC TCC ATC GTG CCA TGA CCTAMRA-3 5.1.8.4 病毒核酸的提取 5.1.8.4.1 向加有 600 L 裂解液的灭菌离心管中加入待测样本 200 L，用吸头反复吸打混匀。 以正式出版文本为准 5 SN/T 2985 2020 5.1.8.4.2 再加入 20

19、0 L 三氯甲烷，在混匀器上振荡混匀 5 s 或颠倒混匀 15 次（不宜过于强烈， 以免产生乳化层；离心（12 000 g，15 min）。 5.1.8.4.3 另取灭菌离心管，加入 600 L 异丙醇（-20 预冷），并加入上述离心后的上层液相 （注意不要吸出中间层，该层富含 DNA 和蛋白质），颠倒混匀。 5.1.8.4.4 离心（12 000 g，15 min）；轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，吸干液体。 5.1.8.4.5 加入 600 uL 75% 乙醇（-20 预冷），颠倒洗涤；离心（12 000 g，10 min）。 5.1.8.4.6 轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，尽量吸干液体；

20、离心 5 s，将管底部少量液体用微量 可调移液器吸干。 5.1.8.4.7 室温干燥 5 min ；于干燥后的沉淀中加入 30 L DEPC 处理水，轻轻混匀，溶解管壁上 的 RNA（即为所需 RNA）。 5.1.8.5 荧光 RT-PCR 检测 5.1.8.5.1 荧光 RT-PCR 反应体系 见表 1。 表 1H3N8 病毒荧光 RT-PCR 检测反应体系 试剂组份 终浓度 反转录磁珠 0.5 粒 10PCR 缓冲液 2.5 moL/L 25 mmoL/L MgCl 2 3.0 mmoL/L 2.0 mmoL/L dNTP 0.2 mmoL/L dNTP HA 正向引物 0.2 moL/L

21、 HA 反向引物 0.2 moL/L HA 探针 0.1 moL/L NA 正向引物 0.2 moL/L NA 反向引物 0.2 moL/L NA 探针 0.1 moL/L RNA 模板 1 L5 L 用 DEPC 处理水补充至总体积 25 L 5.1.8.5.2 荧光 RT-PCR 反应条件 将加入反应液的 PCR 管 5 000 r/min 离心 30 s，按照下列条件进行反应：反应参数为 42 30 min ； 94 3 min；92 10 s，45 30 s，72 60 s，5 个循环；92 3 min，92 5 s，60 30 s，40 个 循环，每个循环 60 结束时收集荧光。 5

22、.1.8.5.3 结果判定 本方法检验结果判定如下： a） 阈值设定：阈值设定原则以阈值线刚好超过正常阴性对照品扩增曲线的最高点。不同仪 以正式出版文本为准 6 SN/T 2985 2020 器可根据仪器噪音情况进行调整； b） 质控标准：阴性对照无 Ct 值并且无扩增曲线。阳性对照的 Ct 值应 30.0，并出现特定 的扩增曲线。如阴性对照和阳性条件不满足以上条件，此次实验视为无效。 c） 结果判定：无 Ct 值或 Ct 值 40 并且无扩增曲线，表明样品中无 H3N8 亚型马流感病毒； Ct 值 35.0，且出现特定的扩增曲线，表明样本中存在 H3N8 亚型马流感病毒；35 Ct 值 40

23、，判定为可疑样品，对于可疑样品应重新提取核酸重新检测。 5.2 血清学检测方法 5.2.1 设备、材料和试剂 5.2.2.1 设备和材料 台式离心机、旋涡振荡器、冰箱（4 和 -80 ）、水浴锅、高压锅、琼脂板、反应板微量可 调移液器（10 L、200 L、1 000 L ）。 5.2.2.2 试剂 盐水 / HEPES、盐水 / HEPES/BSA、三氯化铬母液、PBS（伦敦）/ PBS“A”、PBS 琼脂糖， 配制见附录 D。 5.2.2 血凝抑制试验 马流感血凝抑制试验方法见标准 SN/T 1687。 5.2.3 单向辐射溶血试验（SRHT） 5.2.3.1 材料准备 5.2.3.1.1

24、 病毒抗原：含有感染性病毒的尿囊液收获后要放在 -70 保存。制备绵羊 RBC 时，用 短滴定曲线测定尿囊液最适用量。H7N7 流感病毒株总能产生清晰的溶血环，H3N8 株有时产生模 糊不清的环，此时需要超速离心浓缩病毒。 5.2.3.1.2 绵羊血：采血加到等体积阿氏液中，于 4 保存。应试验几只绵羊的血，因各羊 RBC 特性不同，保存 2 d 后使用，如保持无菌状态，可使用 3 周。 5.2.3.1.3 补体：从体重 300 g350 g 年轻的豚鼠收集血清，小体积分装，置于 -70 保存。用 前用冷水融化，并置 4 保存。 5.2.3.1.4 血清处理：血清不稀释，56 灭活 30 mi

25、n，避免反复冻融。 5.2.3.2 SRHT 试验程序 5.2.3.2.1 用盐水 / HEPES 洗涤绵羊 RBC 至少三次。 5.2.3.2.2 用盐水 / HEPES 制备适当体积的 8% 的 RBC（V/V 压积细胞），可根据要使用的平板数 计算，每板大致 10 mL，流出余额大约 1 mL2。 5.2.3.2.3 加预定体积的病毒抗原到 8% RBC 溶液中，混合物在 4 静止 10 min，此时可能会看 到凝集现象。 5.2.3.2.4 取病毒 / RBC 液总体积 1/2 量的三氯化铬工作液（用 0.85% NaCl 将三氯化铬母液做 1 : 400 稀释）缓慢地加入病毒 / R

26、BC 悬液中，在 22 2 静置 5 min，偶尔摇动混合。 5.2.3.2.5 1 500 g 离心 5 min，沉积致敏的 RBC。 5.2.3.2.6 轻轻地再混悬于盐水 / HEPES/BSA 中，1 500 g 离心 5 min。 5.2.3.2.7 用 PBS“A”重悬浮 RBC 成 8% 悬液。 以正式出版文本为准 7 SN/T 2985 2020 5.2.3.3 平板制备 5.2.3.3.1 在致敏过程中，在压力消毒锅内融化琼脂糖。临用前用吸管吸取 7.8 mL 置于玻璃瓶内， 42 保温。用前检查琼脂糖是否冷至 42 。 5.2.3.3.2 加 0.9 mL 病毒致敏的绵羊

27、RBC 于 7.8 mL 的 42 琼脂糖内，快速轻轻混合。 5.2.3.3.3 加 0.3 mL 未稀释的豚鼠血清，再次混合后加到放在水平桌面上的免疫反应板上。待凝 固，不加盖，自然风干 5 min。 5.2.3.3.4 风干后加盖，并放在湿盒内置于 4 冰箱中保存备用。 5.2.3.3.5 用未致敏的红细胞，或者用无关的流感病毒（例如人 H1N1 流感病毒）致敏的红细胞 制备对照板，以检查有无非特异性溶血现象。一批制备好的反应板可以保存几个星期。 5.2.3.3.6 将琼脂板放在打孔图上，打 3 mm 直径的孔，打孔数以够 16 份被检血清和 1 份阳性对 照血清为准。在抗原对照板上准备

28、5 排，每排打 8 个孔。 5.2.3.3.7 吸取 10 L 经加热灭活（56 30 min）的被检血清和阳性对照血清加入相应的孔内， 在湿盒内于 34 孵育 20 h。 5.2.3.3.8 测量溶血环直径，扣除孔面积计算溶血环面积。 5.2.3.4 结果判定 5.2.3.4.1 阳性和阴性血清对照结果应与预期一致，对照血清的溶血面积必须清晰，变动不超过 预设值的 20%。 5.2.3.4.2 试验结果可用 mm 2 表示，也可用占对照血清值的比率表示。 5.2.3.4.3 急性发作期和恢复期血清应在同一反应板上进行检测，恢复期血清的溶血面积大于急 性发作期血清的溶血面积，则表示已被感染。

29、以正式出版文本为准 8 SN/T 2985 2020 附录A （规范性） 磷酸盐缓冲液配制方法 A.1A 液 0.2 moL/L 磷酸二氢钠水溶液：NaH 2 PO 4 H 2 O 27.6 g，溶于蒸馏水中，最后稀释至 1 000 mL。 A.2B 液 0.2 moL/L 磷酸氢二钠水溶液：NaH 2 PO 4 7 H 2 O 53.6 g（或 Na 2 HPO 4 12 H 2 O 71.6 g，或 Na 2 HPO 4 2 H 2 O 35.6 g）加蒸馏水溶解，最后稀释至 1 000 mL。 A.3 0.01 moL/L A 液 14 mL， 0.2 moL/L B 液 36 mL，加

30、氯化钠 8.5 g，用蒸馏水定容至 1 000 mL，高 压灭菌后室温保存。 以正式出版文本为准 9 SN/T 2985 2020 附录B （规范性） 阿氏（Alsevers ）液和鸡红细胞悬液配制方法 B.1阿氏（Alsevers ）液配制 葡萄糖 20.5 g 二水合柠檬酸钠 8.0 g 柠檬酸 0.55 g 氯化钠 4.2 g 溶于蒸馏水，并稀释至 1 000 mL，用 1 moL/L 的氢氧化钠或 1 moL/L 的盐酸调节 pH 至 6.1， 用孔径为 0.22 m 的滤膜进行过滤除菌。 B.21% 鸡红细胞悬液配制 采集至少 3 只 SPF 公鸡血液与等体积阿氏液混合摇匀，用 pH

31、7.2、0.01 moL/L PBS 洗涤 3 次， 每次均以 1 000 r/min 离心 10 min，洗涤后用 PBS 配成体积分数为 1% 红细胞悬液，4 保存备用。 以正式出版文本为准 10 SN/T 2985 2020 附录C （规范性） MEM 培养液配制方法 将 1 袋 MEM 溶于双蒸水，定容至 1 000 mL，充分溶解混匀，在超净工作台中过滤后，分装 于经高压灭菌的玻璃瓶中。分装后在 37 培养箱中培养 24 h，未污染长菌的放入 -20 备用。 待用时加入 7.5% 碳酸氢钠和犊牛血清即可。 以正式出版文本为准 11 SN/T 2985 2020 附录D （规范性） S

32、RHT 试验试剂配制 D.1盐水 / HEPES 0.85%NaCl（4.25 g/500 mL），0.05 moL/L HEPES（5.95 g/500 mL），0.02% 叠氮钠，用 NaOH 调整 pH 至 6.5。 D.2盐水 / HEPES/BSA 在盐水 / HEPES 中加入终浓度为 0.2%（质量浓度）的 BSA。 D.3三氯化铬母液 三氯化铬（2.25 moL/L，6 g/10 mL），使用时用 0.85% 的盐水作 400 倍稀释，现用现配。 D.4PBSE（伦敦）/ PBSE“A” NaCl 10.00 g，KCl 0.25 g，Na 2 PO 4 1.45 g， KH

33、2 PO 4 0.25 g，叠氮钠 0.20 g，蒸馏水添加至 1 L。 D.5PBS 琼脂糖 将盛有 1L PBS“A”的烧瓶放在搅拌器上，慢慢搅拌加入 10 g 琼脂糖，在压力锅中融化，玻 璃瓶分装，置 22 2 保存。 以正式出版文本为准 SN/T 2985 2020 中华人民共和国出入境检验检疫 开本 8801230 1/16 印张 1 字数 28 千字 2021 年 6 月第一版 2021 年 6 月第一次印刷 印数 1500 书号：155175150 定价 18.00 元 马流行性感冒检疫技术规范 行 业 标 准 SN/T 29852020 * * * 北京市朝阳区东四环南路甲 1 号（100023） 编辑部：（010）65194242-7509 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 中国海关出版社有限公司出版发行 网址