1、 ICS 13.080.01 CCS B 11 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 42152025 流动沙地土壤改良程度评价技术规范 Specification for evaluation of soil improvement degree in shifting sandy land 2025-10-30 发布2025-11-30 实施内蒙古自治区市场监督管理局发 布 DB15/T 42152025 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 评价指标体系.2 5 样品采集与测定.2 6 评价方法与等级划分.3 7 档案管理.4 附录 A（
2、规范性）评价指标体系及赋分.5 附录 B（规范性）实时定量 PCR 分析中使用的引物和反应条件.8 DB15/T 42152025 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由内蒙古自治区林业和草原局提出并归口。本文件起草单位：内蒙古自治区林业科学研究院、中国能源建设集团广西电力设计研究院有限公司、通辽市林业和草原科学研究所、通辽市森林公园管护中心。本文件主要起草人：张胜男、高海燕、范荣洋、张雷、黄海广、闫婷、杨制国、许宏斌、唐月坤、郭明凡、王玉芝
3、李俊文、王雪、丰洁、宝虎、李兰花、陈豪。DB15/T 42152025 1 流动沙地土壤改良程度评价技术规范 1 范围 本文件规定了评价指标体系、土壤样品采集与测定、评价方法与等级划分、档案管理。本文件适用于流动沙地生态修复和治理下的土壤改良程度评价。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 21141 防沙治沙技术规范 NY/T 87 土壤全钾测定法 NY/T 88 土壤全磷测定法 NY/T 889 土壤速效钾和缓效钾含
4、量的测定 NY/T 912 饲料添加剂纤维素酶活力的测定 分光光度法 NY/T 1121.4 土壤检测 第4部分：土壤容重的测定 NY/T 1121.6 土壤检测 第6部分：土壤有机质的测定 NY/T 1121.24 土壤检测 第24部分：土壤全氮的测定自动定氮仪法 NY/T 1121.25 土壤检测 第25部分：土壤有效磷的测定连续流动分析仪法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。土壤物理性粘粒 soil physical viscose particles 土壤中粒径小于0.01 mm的颗粒组分。生物土壤结皮 biological soil crust 生物结皮，由蓝绿藻、苔藓、地
5、衣、真菌等隐花植物及其分泌物与表层土壤颗粒通过生物-物理-化学作用形成的有机-无机复合体。流动沙地土壤改良 shifting sandy land soil improvement DB15/T 42152025 2 流动沙地固定后，随着固沙植被群落的自然演替，原流动风沙土的理化性质呈现系统性改良的生态过程。4 评价指标体系 指标体系构建 指标体系按照附录A的规定执行。指标赋值 指标赋值按照附录A的规定执行。5 样品采集与测定 评价样地选择 不同恢复年限的植被固沙样地。时间 8月至10月进行相关调查和采样。生物结皮调查 在样地内随机设置510个1 m1 m的样方，样方选择应具有代表性。如未能选
6、择具有代表性的样方，则采用样线法。沿20 m样线每隔2 m设置1 m1 m样方，样方数量增至810个。在样方内进行网格计数，网格规格采用2 cm2 cm，确定生物土壤结皮类型、厚度并估算生物土壤结皮覆盖度。土壤样品采集 样品采集应避开有降水的天气，避开目标植物根际以及植物群落边缘。采用直径为3 cm5 cm、高度为20 cm的土壤取样器，在样方内以对角线收集35份0 cm20 cm土壤（有生物结皮的，结皮应包含在内）等量均匀混合，同时去除植物残体。土壤样品分两部分保存，一部分样品带回实验室风干，测定土壤物理性粘粒、有机质、全氮、全磷、全钾、碱解氮、有效磷、速效钾以及酶活性等指标；另一部分至于无
7、菌袋中，在4 环境中保存时间不超过3 d，送至实验室后转至-80 超低温冰箱中保存，用于测定土壤细菌和真菌DNA含量，1个月内完成总DNA提取和测定。土壤测定 5.5.1 土壤物理性粘粒测定 采用土壤粒径分析仪分析土壤颗粒组成，并计算物理性粘粒占比。5.5.2 土壤容重的测定 按照NY/T 1121.4的规定执行。5.5.3 土壤有机质的测定 DB15/T 42152025 3 按照NY/T 1121.6的规定执行。5.5.4 土壤全氮的测定 按照NY/T 1121.24的规定执行。5.5.5 土壤全磷的测定 按照NY/T 88的规定执行。5.5.6 土壤全钾的测定 按照NY/T 87的规定执
8、行。5.5.7 土壤碱解氮的测定 按照碱解扩散法执行。5.5.8 土壤有效磷的测定 按照NY/T 1121.25的规定执行。5.5.9 土壤速效钾的测定 按照NY/T 889的规定执行。5.5.10 土壤脱氢酶活性的测定 按照氯化三苯基四氮唑（TCC）分光光度法执行。5.5.11 土壤脲酶活性的测定 按照靛酚蓝比色法执行。5.5.12 土壤纤维素酶活性的测定 按照NY/T 912 饲料添加剂纤维素酶活力的测定执行。该方法适用于土壤纤维素酶活性测定。5.5.13 土壤蔗糖酶活性的测定 按照3,5-二硝基水杨酸比色法执行。5.5.14 土壤细菌、真菌数量的测定 采用CTAB法提取总DNA，亦可采用
9、等效DNA提取试剂盒提取，其提取效率需经比对验证与本法相当。将提取的土壤DNA进行实时荧光定量PCR（qPCR），测定流动沙地修复治理下的土壤细菌（16S rRNA基因）和真菌（ITS）的绝对拷贝数。基因引物和扩增条件的详细信息按照附录B。PCR反应体系为20 l，包含10 l SYBR Green Super Mix，0.5 l正向和反向引物（各0.25 mol/L），1 l模板DNA（即上述提取的土壤总DNA）和8 l无菌水。将获得细菌、真菌拷贝数与提取总DNA时所用土壤重量换算，最终获得每克土壤中的细菌和真菌拷贝数。6 评价方法与等级划分 DB15/T 42152025 4 评价方法 综
10、合赋值法，各指标含量范围赋分情况见附录A。物理性粘粒等指标的分值分别以a1、a2a16表示，综合得分（S）计算公式如下：S=ai=a1n=16i=1+a2+a3 a16 （1）式中：S流动沙地土壤改良程度综合得分；ai各评价指标所赋分值。评价等级划分 内蒙古自治区流动沙地土壤改良程度分为四级：优、良、中、差。以综合得分计：差（S46.8）、中（46.8S73.4）、良（73.4S86.7）、优（S86.7）。7 档案管理 按照GB/T 21141的规定执行。DB15/T 42152025 5 A A附录A （规范性）评价指标体系及赋分 评价指标体系及各指标范围赋值见表A.1。表A.1 评价指标
11、体系及赋分 一级 指标 二级指标 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 物理性质指标（基础层）（35分）物理性粘粒%（15 分）a1 a16 15.0 6a15 12.9 5a14 10.8 4a13 8.7 3a12 6.6 2a11 4.5 1a1 2.4 生物土壤结皮覆盖度%（12 分）a2 a243 12.0 43a236 10.3 36a229 8.6 29a222 6.9 22a215 5.2 15a28 3.5 8a2 1.8 容重 g/cm3（8 分）a3 1.51a3 8.0 1.51a31.55 6.9 1.55a31.59 5
12、8 1.59a31.63 4.7 1.63a31.67 3.6 1.67a31.71 2.5 a31.71 1.4 DB15/T 42152025 6 表A.1 评价指标体系及赋分（续）一级 指标 二级指标 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 化学性质指标（功能层）（35分）有机质 g/kg（17 分）a4 a410 17 10a48 15 8a46 13 6a44 11 4a42 9 2a41 7 1a4 5 碱解氮 mg/kg（5 分）a5 a560 5.0 60a550 4.3 50a540 3.6 40a530 2.9 30a520 2
13、2 20a510 1.5 10a5 0.8 有效磷 mg/kg（4 分）a6 a616 4.0 16a613 3.5 13a610 3.0 10 a67 2.5 7a64 2.0 4a61 1.5 1a6 1.0 速效钾 mg/kg（3 分）a7 a7160 3.0 160a7130 2.6 130a7100 2.2 100 a7 70 1.8 70 a7 40 1.4 40 a7 10 1.0 10 a7 0.6 全氮 g/kg（3 分）a8 a82.0 3.0 2.0a81.6 2.6 1.6a81.2 2.2 1.2a80.8 1.8 0.8a80.4 1.4 0.4a80.2 1.0
14、 0.2a8 0.6 全磷 g/kg（2 分）a9 a92.6 2.0 2.6a91.9 1.8 1.9a91.3 1.6 1.3a90.8 1.4 0.8a90.4 1.2 0.4a90.1 1.0 0.1a9 0.8 全钾 g/kg（1 分）a10 a1025 1.0 25a1020 0.9 20a1015 0.8 15a1010 0.7 10a106 0.6 6a102 0.5 2a10 0.4 DB15/T 42152025 7 表A.1 评价指标体系及赋分（续）一级 指标 二级指标 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 范围 分值 生物学性质指标（活
15、性层）（30分）脱氢酶 g/g/h（7 分）a11 a113.0 7 3.0a112.5 6 2.5a112.0 5 2.0a111.5 4 1.5a111.0 3 1.0a110.5 2 0.5a11 1 脲酶 g/g/h（5 分）a12 a1220 5.0 20a1217 4.3 17a1214 3.6 14a1211 2.9 11a128 2.2 8a125 1.5 5a12 0.8 纤维素酶 g/g/h（3 分）a13 a132.0 3.0 2.0a131.7 2.6 1.7a131.4 2.2 1.4a131.1 1.8 1.1a130.8 1.4 0.8a130.5 1.0 0.5
16、a13 0.6 蔗糖酶 g/g/h（3 分）a14 a14600 3.0 600a14510 2.6 510a14420 2.2 420a14330 1.8 330a14240 1.4 240a14150 1.0 150a14 0.6 细菌数量（拷贝/g）（6 分）a15 a151010 6.0 1010a15109 5.2 109a15108 4.4 108a15107 3.6 107a15106 2.8 106a15105 2.0 105a15 1.2 真菌数量（拷贝/g）（6 分）a16 a16106 6.0 106a16105 5.2 105a16104 4.4 104a16103 3
17、6 103a16102 2.8 102a1650 2.0 50a16 1.2 DB15/T 42152025 8 B B附录B （规范性）实时定量 PCR 分析中使用的引物和反应条件 实时定量PCR所用引物和反应条件见表B.1。表B.1 实时定量 PCR 引物和反应条件 目标基因 基因引物 引物序列 扩增条件 16S rRNA 341F（正向）CCTACGGGAGGCAGCAG 95 10 min，95 30 s，60 60 s，72 40s；40个循环。518R（反向）ATTACCGCGGCTGCTGG ITS ITSF（正向）ACCGTAGGTGAACCTGCGG 95 3 min，95 30 s，57 30 s，72 30s；35 个循环。5.8s（反向）CGCTGCGTTCTTCATCG
