1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.20-2003 代替GBjT5009.20-1996 食品中有机磷农药残留量的测定Determination of organophosphorus pesticide residues in foods 2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生变发布中国国家标准化管理委员高GB/T 5009.20-2003 前言本标准代替GB/T5009.20-1996(食品中有机磷农药残留量的测定方法儿本标准与GB/T5009.20-1996相比主要修改如下g修改了标准的中文名称，标准中文名称改为食品中有机
2、磷农药残留量的测定h按照GB/T20001. 42001(标准编写规则第4部分g化学分析方法对原标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准第一法由中国农业科学院分析测试中心、南京农业大学、卫生部食品卫生监督检验所负责起草。158 本标准第二法由卫生部食品卫生监督检验所、上海市卫生防疫站、北京市卫生防疫站负责起草。本标准第二法由江苏省卫生防疫站负责起草。本标准于1985年首次发布，1996年第一次修订，本次为第二次修订。GB/T 5009.20-2003 食品中有机磷农药残留量的测定第一法水果、蔬菜、谷类中有机磷农药的多残留的测定1 范围本标准规定了水果、蔬菜、谷类中敌
3、敌畏、速灭磷、久效磷、甲拌磷、巳胶磷、二嚓磷、乙略硫磷、甲基略院磷、甲基对硫磷、稻瘟净、水胶硫磷、氧化喳硫磷、稻丰散、甲喳硫磷、克线磷、乙硫磷、乐果、喳硫磷、对硫磷、杀棋硫磷的残留量分析方法。本标准适用于使用过敌敌畏等二十种农药制剂的水果、蔬菜、谷类等作物的残留量分析。2 原理含有机磷的试样在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式，放射出波长526nm的特性光;这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。3 试剂3.1 丙酬。3.2 二氯甲烧。3.3 氯化锅。3.4 元水硫酸销。3.5 助滤剂Celit
4、e545。3.6 农药标准品如下g3.6.1 敌敌畏(DDVP):纯度二三99%。3.6.2 速灭磷(mevi即hos):顺式纯度二三60%，反式纯度二三40%。3.6.3 久效磷(monocrotophos):纯度二三99%。3.6.4 甲拌磷(phorate):纯度二三98%。3.6.5 巴胶磷(propetumphos):纯度99%。3.6.6 二嗦磷(diazinon):纯度二三98%。3.6.7 乙暗硫磷(etrimfos):纯度二三97%。3.6.8 甲基略咙磷(pirimiphos-methyl):纯度二三99%。3.6.9 甲基对硫磷(parathion-methy):纯度二三
5、99%。3.6.10 稻瘟净(kitazine):纯度二三99%。3.6.11 水胶硫磷(isocarbophos):纯度注99%。3.6.12 氧化喳硫磷(po-quinalphos):纯度二三99%。3.6.13 稻丰散(phenthoate)纯度99.6%。3.6.14 甲噎硫磷(methdathion):纯度二三99.6%。3.6.15 克线磷(phenamiphos):纯度二0，99.9%。3.6.16 乙硫磷(ethion):纯度95%。3.6.17 乐果(dimethoate):纯度二三99.0%。3.6.18 喳硫磷(quinaphos):纯度98.2%。3.6.19 对硫磷(
6、parathion):纯度99.0%。159 GB/T 5009.20-2003 3.6.20 杀螺硫磷(fenitrothion):纯度?98.5%。3.7 农药标准溶液的配制g分别准确称取3.6. 1 3. 6. 20标准品，用二氯甲烧为溶剂，分别配制成1. 0 mg/mL的标准储备液，贮于冰箱(4C)中，使用时根据各农药品种的仪器响应情况，吸取不同量的标准储备液，用工氯甲烧稀释成混合标准使用液。4 仪器4.1 组织捣碎机。4.2 粉碎机。4.3 旋转蒸发仪。4.4 气相色谱仪=附有火焰光度检测器(FPD)。5 试样的制备取粮食试样经粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样;水果、蔬菜试样去掉非
7、可食部分后制成待分析试样。6 分析步骤6.1 提取6. 1. 1 水果、蔬菜称取50.00 g试样，置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酣(提取液总体积为150 mL)，用组织捣碎机提取1min.2 mino匀浆液经铺有两层滤纸和约10g Celite 545的布氏漏斗减压抽滤。取滤液100mL移至500mL分液漏斗中。6. 1. 2 谷物称取25.00g试样，置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙圃，以下步骤同6.1.L 6.2 净化向6.1. 1或6.1. 2的滤液中加入10g 15 g氯化纳使溶液处于饱和状态。猛烈振摇2 min,._ 3 min，静置10min
8、，使丙固与水相分层，水相用50mL二氯甲烧振摇2min，再静置分层。将丙嗣与二氯甲统提取液合并经装有20g30 g无水硫酸纳的玻璃漏斗脱水滤入250mL圆底烧瓶中，再以约40mL二氯甲烧分数次洗涤容器和无水硫酸销。洗涤液也并入烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至约2mL，浓缩液定量转移至5mL25 mL容量瓶中，加工氯甲烧定容至刻度。6.3 气相色谱测定6.3.1 色谱参考条件6.3. 1. 1 色谱柱a) 玻璃柱2.6mX3 mm(i. d)，填装涂有4.5%DC-200+2. 5%OV一17的ChromosorbW A W DMCS(80目100目)的担体。b) 玻璃柱2.6mX3 mm(i. d)
9、，填装涂有质量分数为1.5%的QF-1的ChromosorbW A W DMCS(60目80日)。6. 3. 1. 2 气体速度氮气50mL/min、氢气100mL/min、空气50mL/min. 6.3.1.3 温度柱箱240C、汽化室260C、检测器270C。6.4 测定吸取2L5L混合标准液及试样净化液注入色谱仪中，以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。160 GB/T 5009.20-2003 7 结果计算z组分有机磷农药的含量按式(1)进行计算。x，=， x Vj X V3 X E. X 1 000 - A , X V, X V, X m X 1 000 ( 1 ) 式
10、中2X，-i组分有机磷农药的含量，单位为毫克每千克(mg/kg), A一一试样中z组分的峰面积，积分单位，A. 混合标准液中z组分的峰面积，积分单位pk 试样提取液的总体积，单位为毫升(mL)，V，一一净化用提取液的总体积，单位为毫升(mL)，V 3 浓缩后的定容体积，单位为毫升(mL)，吭一一进样体积，单位为微升(L)，E. 注入色谱仪中的z标准组分的质量，单位为纳克(ng), m一一试样的质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。B 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。9 其他9.1 16种有机确农药的色谱圄16种有机磷农药(标准溶液)的色
11、谱图，见图Ll一一敌敌畏最低检测浓度O.005 mg/kg, 2一一速灭磷最低检测浓度O.004 mg/kg, 3一一久效磷最低检测浓度。014mg/kg, 4一一甲拌磷最低检测浓度O.004 mg/kg, 5 巴肢磷最低检测浓度。.011mg/kg, 6 二嚓磷最低检测浓度0.003mg/kg, 7 乙嘈硫磷最低检测浓度0.003mg/kg; 8 甲基略院磷最低检测浓度O.004 mg/kg, 9 甲基对硫磷最低检测浓度O.004 mg/kg, 10 稻瘟净最低检测浓度O.004 mg/kg; 11-在胶硫磷最低检测浓度0.005mg/kg, 12 氧化噎硫磷最低检测浓度。025mg/峙，1
12、3 稻丰散最低检测浓度0.017mg/kg; 14 甲喳硫磷最低检测浓度0.014mg/kg, 15 克线磷最低检测浓度O.009 mg/kg, 16 乙硫磷最低检测浓度0.014mg/kgo回116种有机磁农药(标准溶液)的色谱圄161 GB/T 5009.20-2003 9.2 13种有机磷农药的色谱固13种有机磷农药的色谱图，见图2。1 敌敌畏8乐果s2 甲拌磷;9 哇硫磷;3 2 3 二嚓磷;10 甲基对硫磷;4 乙略硫磷;11 杀蟆硫磷s5 巳胶磷;12 对硫磷g6一一甲基嘻晓磷;13 乙硫磷.7异稻瘟净p6 7 12 13 国213种有机磁农药的色谱图第二法粮、菜、油中有机磷农药残
13、留量的测定10 范围本标准规定了粮食、蔬菜咱食用油等食品中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀旗硫磷、倍硫磷、虫蜻磷的测定方法。本标准适用于粮食、蔬菜、食用泊使用过敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀旗硫磷、倍硫磷、虫蜻磷等的农药的残留量分析。最低检出量为O.1 ng O. 3 ng，进样量相当于O.01 g试样，最低检出浓度范围为0.01mg/kg-O. 03 mg/kg, 162 GB/T 5009.20-2003 11 原理试样中有机磷农药经提取、分离净化后在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式，放射出波长526nm 光，这种特征光通过滤光片选择后，由光电倍增管接
14、收，转换成电信号，经微电流放大器放大后，被记录下来。试样的峰高与标准的峰高相比，计算出试样相当的含量。12 试剂12.1 二氯甲烧。12.2 无水硫酸锅。12.3 丙酬。12.4 中性氧化铝2层析用，经300C活化4h后备用。12.5 活性炭:称取20g活性炭用盐酸(3mol/L)浸泡过夜，抽滤后，用水洗至元氯离子，在120C烘干备用。12.6 硫酸锅溶液(50g/L)。12.7 农药标准储备液z准确称取适量有机磷农药标准品，用苯(或三氯甲炕)先配制储备液，放在冰箱中保存。12.8 农药标准使用液z临用时用二氯甲烧稀释为使用液，使其浓度为敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷和甲拌磷每毫升各相当于1.
15、0吨，稻瘟净、倍硫磷、杀旗硫磷和虫蜻磷每毫升各相当于2.0问。13 仪器13.1 气相色谱仪具有火焰光度检测器。13.2 电动振荡器。14 分析步骤14.1 提取与净化14. 1. 1 蔬菜z将蔬菜切碎混匀。称取10.00 g 7，昆匀的试样，置于250mL具塞锥形瓶中，加30 g100 g无水硫酸销(根据蔬菜含水量)脱水，剧烈振摇后如有固体硫酸纳存在，说明所加元水硫酸销己够。加O.2 gO. 8 g活性炭(根据蔬菜色素含量)脱色。加70mL二氯甲饶，在振荡器上振摇。.5h，经滤纸过滤。量取35mL滤液，在通风柜中室温下自然挥发至近干，用二氯甲烧少量多次研洗残渣，移入10mL(或5mL)具塞刻
16、度试管中，并定容至2.0mL，备用。14. 1. 2 稻谷=脱壳、磨粉、过20目筛、混匀。称取10.00g，置于具塞锥形瓶中，加入0.5g中性氧化铝及20mL二氯甲烧，振摇0.5h，过滤，滤液直接进样。如农药残留量过低，则加30mL二氯甲烧，振摇过滤，最取15mL滤液浓缩并定容至2.0mL进样。14. 1. 3 小麦、玉米:将试样磨碎过20日筛、混匀。称取10.00g置于具塞锥形瓶中，加入0.5g中性氧化铝、0.2g活性炭及20mL二氯甲烧，振摇0.5h，过滤，滤液直接进样。如农药残留量过低.则加30 mL二氯甲烧，振摇过滤，量取15mL滤液浓缩，并定容至2mL进样。14. 1. 4 植物油g
17、称取5.0g 混匀的试样，用50mL丙酣分次溶解并洗入分液漏斗中，摇匀后，加10mL 水，轻轻旋转振摇1rnin，静置1h以上，弃去下面析出的油层，上层溶液自分液漏斗上口倾入另一分液漏斗中，当心尽量不使剩余的油滴倒入(如乳化严重，分层不清，则放入50mL离心管中，以2500 r/min 离心0.5h，用滴管吸出上层溶液)。加30mL二氯甲烧.100mL硫酸纳溶液(50g/L).振摇1mino静置分层后，将二氯甲烧提取液移至蒸发皿中。丙嗣水溶液再用10mL二氯甲烧提取一次，分层后，合并至蒸发皿中。自然挥发后，如无水，可用二氯甲烧少量多次研洗蒸发皿中残液移入具塞量筒中，并定容至5mL。加2g无水硫
18、酸销振摇脱水，再加1日中性氧化铝、0.2g活性炭(毛泊可加0.5g)振摇脱油和163 GBI囚09.20-2003脱色，过滤，滤液直接进样。二氯甲炕提取液自然挥发后如有少量水，可用5mL二氯甲烧分次将挥发后的残液洗入小分液漏斗内，提取1min，静置分层后将二氯甲烧层移入具塞量筒内，再以5mL二氯甲炕提取一次，合并入具塞量筒内，定容至10mL.加5g无水硫酸锅，振摇脱水，再加1g中性氧化铝、0.2 g活性炭，振摇脱油和脱色，过滤，滤液直接进样。或将二氯甲烧和水一起倒入具塞量筒中，用二氯甲烧少量多次研洗蒸发皿，洗液并入具塞量筒中，以二氯甲烧层为准定容至5mL.加3g无水硫酸锅，然后如上加中性氧化铝
19、和活性炭依法操作。14.2 色谱条件14.2.1 色谱柱z玻璃柱，内径3mm，长1.5 m2.0 m. 14.2. 1. 1 分离测定敌敌畏、乐果、马拉硫磷和对硫磷的色谱柱。a)内装涂以2.5%SE-30和3%QF-1混合固定液的60目80目ChromosorbW A W DMCS , b)内装涂以1.5% OV-17和2%QF-1混合固定液的60目80目ChromosorbW AW DMCS, c)内装涂以2%OV-101和2%QF-1混合固定液的60目80目ChromosorbW A W DMCS. 14.2. 1. 2 分离、测定甲拌磷、虫蜻磷、稻瘟净、倍硫磷和杀蟆硫磷的色谱柱。a)内装
20、涂以3%PEGA和5%QF-1混合固定液的60目80日ChromosorbW AW DMCS , b)内装涂以2%NPGA和3%QF-1混合固定液的60目80目ChromosorbW A W DMCS。14.2.2 气流速度载气为氮气80mL/min，空气50mL/min，氢气180mL/min(氮气、空气和氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件)。14.2.3 温度:进样口，220C，检测器，240C，柱温，180C.但测定敌敌畏为130C。15 测定将12.8所述的混合农药标准使用液2L5L分别注入气相色谱仪中，可测得不同浓度有机磷标准溶液的峰高，分别绘制有机磷标准曲线。同时取试样
21、溶液2L5L注入气相色谱仪中，测得的峰高从标准曲线图中查出相应的含量。16 计算试样中有机磷农药的含量按式(2)进行计算。-AU -AU -nU A-zi 一l一。一A-1 -m x .( 2 ) 式中zX 试样中有机磷农药的含量，单位为毫克每千克(mg/kg), A 进样体积中有机磷农药的质量，单位为纳克(ng), m 进样体积(L)相当于试样的质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。17 精密度敌敌畏、甲拌磷、倍硫磷、杀蟆硫磷在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。乐果、马拉硫磷、对硫磷、稻瘟净在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过
22、算术平均值的15%。18 其他其他有机磷农药的气相色谱图，见阁3图6。164 2.5% SE-30和3%QF-l柱，柱温180C1 乐果g2 马拉硫磷$3一一对硫磷.固33种有机磷农药的气相色谱固3%PEGA+5%QF-!柱1一一甲拌磷p2 稻瘟净;3 倍硫磷$4 杀蟆硫磷。圄54种有机确农药的气相色谱固GB/T 5009.20-2003 散敌畏2.5% SE-30和3%QF-l柱，桂温!30C固4散散畏农茵的气相色谱团1 2 2%NPGA+3%QF-!柱l 甲拌磷$2 稻瘟净$3一一倍硫磷$4一一杀螺硫磷。因64种有机确农药的气相色调圈165 GB/T 5009.20-2003 第三法肉类、
23、鱼类申有机磷农药残留量的测定19 范圄本标准规定了肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷的残留分析方法。本标准适用于肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷农药的残留分析。敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷检出限分别为0.03、0.015、0.015、0.008mg/峙。20 原理同第2章。21 试剂21.1 丙酬。21. 2 二氯甲烧。2 1. 3 无水硫酸纳=在700l:灼烧4h后备用。2 1. 4 中性氧化铝z在550l:灼烧4人2 1. 5 硫酸铺溶液(20g/L)。2 1. 6 农药标准溶液z准确称取敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷标准品各10.0mg，用丙酣溶解并定容至100mL，
24、混匀，每毫升相当农药。10mg，作为储备液，保存于冰箱中。2 1. 7 农药标准使用液g临用时用丙酣稀释至每毫升相当2.0问。22 仪器22.1 气相色谱仪z附火焰光度检测器(FPDl。22.2 电动振摇器。2 分析步禀23.1 提取净化将有代表性的肉、鱼试样切碎混匀，称取20.00g于250mL具塞锥瓶中，加60mL丙隅，于振荡器上振摇0.5h，经滤纸过滤，取滤液30mL于125mL分液漏斗中，加60mL硫酸销溶液(20g/L)和30 mL二氯甲烧，振摇提取2min后，静置分层，将下层提取液放入另一个125mL分液漏斗中，再用20 mL二氯甲炕于丙酬水溶液中同样提取后，合并二次提取液，在二氯
25、甲烧提取液中加1g中性氧化铝(如为鱼肉加5.5g)，轻摇数次，加20g无水硫酸销。振摇脱水，过滤于蒸发皿中，用20mL二氯甲烧分二次洗涤分液漏斗，倒入蒸发皿中，在55l:水浴上蒸发浓缩至1mL左右，用丙酶少量多次将残液洗人具塞刻度小试管中，定容至2mL5 mL，如溶液含少量水，可在蒸发皿中加少量无水硫酸销后，再用丙酣洗入具塞刻度小试管中，定容。23.2 色谱条件23.2.1 色谱柱E内径3.2mm，长1.6m的玻璃柱，内装涂以1.5%OV-17和2%QF-l混合固定液的80目100目ChromosorbW A W DMCSo 23.2.2 流量:氮气60mL/min;氢气0.7kg/cm2;空气0.5kg/cm20 23.2.3 温度z检测器2500C，进样口2500C，柱温2200C(测定敌敌畏时为1900C)。如同时测定四种农药可用程序升温。23.2.4 4种有机磷农药的包谱阁，见图70166 GB/T 5009.20-2003 1一一敌敌畏$2一-乐果g3 马拉硫磷$4 对硫磷。23.3 测定圄74种有机磷农药的色谱图将标准使用液或试样液进样lL3L.以保留时间定性;测量峰高，与标准比较进行走量。24 结果计算同第7章。25 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。167
