1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009. 36-2003 代替GB/T5009.36一1996粮食卫生标准的分析方法Method for analysis of hygienic standard of grains 2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生变发布中国国家标准化管理委员=GB/T 5009.36-2003 前士-目本标准代替GB/T5009.36-1996(粮食卫生标准的分析方法。本标准与GB/T5009.36-1996相比主要修改如下:按照GB/T2000 1. 4-2001 (标准编写规则第4部分z化学分析方法对原
2、标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所、卫生部食品卫生监督检验所、广东省食品卫生监督检验所、天津市卫生防疫站、大连食品卫生检验所、秦皇岛食品卫生检验所、中华人民共和国国家进出口商品检验局负责起草。本标准于1985年首次发布.1996年第一次修订，本次为第二次修订。286 GB/T 5009.36-2003 粮食卫生标准的分析方法1 范围本标准规定了原粮和成品粮中各项卫生指标的分析方法。本标准适用于原粮和成品粮中马拉硫磷、甲拌磷、杀旗硫磷、倍硫磷、敌敌畏、乐果、对硫磷、磷化物、氟化物、氯化苦、二硫化碳、碑、录、六六六、滴滴涕、
3、黄曲霉毒素岛、锅、氟、曼陀罗籽、麦角、二澳乙烧、七氯、艾氏剂、狄氏剂等卫生指标的分析。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 5009. 11 食品中总碑及无机畔的测定GB/T 5009. 15 食品中铺的测定GB/T 5009. 17 食品中总柔及甲基柔的测定GB/T 5009. 18 食品中氟的测定GB/T 5009. 19 食品中六六六、滴滴涕残留量
4、的测定GB/T 5009. 20 食品中有机磷农药残留量的测定GB/T 5009. 22 食品中黄曲霉毒素矶的测定3 感官检查具有正常粮食的色泽及气味，不得有发霉变质现象。4 理化检验4.1 马拉硫磁4. 1. 1 气相色谱法按GB/T5009.20操作。4. 1. 2 铜络合物比色法4. 1. 2. 1 原理马拉硫磷用有机溶剂提取，经氢氧化纳水解后，生成二甲基工硫代磷酸酶，再与铜盐生成黄色络合物，与标准系列比较定量。本方法取样量为20g时，检出限为1.25 mg/kg, 4. 1. 2. 2 试剂4. 1. 2. 2. 1 四氯化碳。4. 1. 2. 2. 2 无水乙醇。4. 1. 2. 2
5、. 3 硫酸锅溶液(45g/L):称取4.5g元水硫酸俐，溶于水中，并稀释至100mL, 4. 1. 2. 2. 4 酸性硫酸纳溶液:100mL硫酸纳溶液(45g/L)中，加2.5mL盐酸，混匀。4. 1. 2. 2. 5 二硫化碳四氯化碳混合液。+200)。4. 1. 2. 2. 6 盐酸(1十1):取50mL盐酸，用水稀释至100mL。4.1.2.2.7 氢氧化纳溶液(240g/L):取24g氢氧化销，加水溶解至100mL。287 GB/T 5009.36-2003 4. 1. 2. 2. 8 三氯化铁溶液(50g/L)。4. 1. 2. 2. 9 硫酸铜溶液(35g/L)，称取3.5g硫
6、酸铜(CuS. 5H，)溶于100mL水中。4.1.2.2.10 盼歌乙醇指示液(10g/L).称取1日盼歌，加乙醇(95%)溶解并稀释至100mL4. 1. 2. 2. 11 马拉硫磷标准溶液2先将50mL容量瓶准确称量，然后滴入约50mg马拉硫磷，再准确称量，加四氯化碳至刻度，混匀，并计算其浓度。4. 1. 2. 2. 12 马拉硫磷标准使用液:临用前于马拉硫磷标准溶液中加四氯化碳稀释至每毫升相当于100.0问马拉硫磷。4. 1. 2. 3 仪器设备分光光度计。4. 1. 2. 4 分析步骤称取约20.00g粉碎并全部通过20日筛的试样，置于200mL具塞锥形瓶中，加40mL四氯化碳，密塞
7、，振荡2h.然后过滤。吸取20mL滤液于125mL分液漏斗中，加0.2mL二硫化碳四氯化碳混合液，加10mL酸性硫酸销溶液，振摇1min静置分层，将四氯化碳层转入另一分液漏斗中，弃去水层。吸取0、O.5、1.0、1.5 , 2. 0 , 2.5 mL马拉硫磷标准使用液(相当0、50、100、150、200、250月马拉硫磷).分别置于125mL分液漏斗中，加四氯化碳至20mL.再各加0.2mL二硫化碳四氯化碳混合液。于试样溶液及马拉硫磷标准溶液中各加5mL元水乙醇，加0.4mL氢氧化纳溶液(240g/L).准确激烈振摇1mn，立即加入10mL硫酸纳溶液(45g/L).混匀，加1滴酣歌指示液，用
8、盐酸(1+1)中和至盼歌将褪色，再用盐酸(1十11)调pH为34(pH试纸试).再加0.5mL.:氯化铁溶液(50g/L).振摇1rnin，静置分层(如乳化可离心分离).弃去四氯化碳层，用2mL四氯化碳洗涤水层，振摇1min，分层后弃去四氯化碳层，如四氯化碳层带黄色，再用四氯化碳洗涤水层。在水层中准确加入4.0mL囚氯化碳、0.5mL硫酸铜溶液(35g/L).准确振摇1mino静置分层后将四氯化碳层通过脱脂棉滤入2cm 比色杯中，以四氯化碳调节零点，在20min内于波长415nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。4. 1. 2. 5 结果计算试样中马拉硫磷的含量按式(1)进行计算。x= _A过旦旦
9、旦m X V2/V, X 1 000 式中zX 试样中马拉硫磷的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); A 测定用样液中马拉硫磷的质量，单位为微克(g); m一一试样质量，单位为克(g); V，一一试样提取加入四氯化碳总体积，单位为毫升(mL); V2 测定用试样四氯化碳提取液体积，单位为毫升(mL)。计算结果保留两位有效数字。4.2 甲拌磷、杀螺硫磷、倍硫磷、敌敌畏、乐果、对硫磷以气相色谱法按GB/T5009.20操作。4.3 确化物4.3.1 定性4.3. 1. 1 原理( 1 ) 磷化物遇水和酸放出磷化氢，与硝酸银生成黑色磷化银，如有硫化物存在，同时放出硫化氢，与硝酸银生成黑色硫化银，干
10、扰测定，而硫化氢又能与乙酸铅生成黑色硫化铅，以此证明是否有硫化物干扰。4. 3. 1. 2 试剂4. 3. 1. 2. 1 酒石酸。288 GB/T 5009.36-2003 4. 3. 1. 2. 2 硝酸银溶液(100g/L) ，贮存于棕色瓶中94. 3. 1. 2. 3 乙酸铅溶液(100g/L)。4. 3. 1. 2. 4 乙酸铺溶液(100g/L)。4. 3. 1. 3 仪器取200mL250 mL锥形瓶，配一适宜双孔软木塞或橡皮塞，每孔内塞以内径。.4cmO. 5 cm、长5 cm的玻璃管，每管内悬挂一长7cm、宽O.3 cmO. 5 cm的滤纸条，临用时，一纸条用硝酸银溶液湿润，
11、另一纸条用乙酸铅溶液湿润。4. 3. 1. 4 分析步骤迅速称取20.00g试样，置于锥形瓶中，加适量水至浸没试样，再加约O.5 g酒石酸，立即塞好准备好的双孔塞，使滤纸条末端距液面约5cm，在暗处置40C50C水浴内加热30min，观察试纸颜色变化情况。如试纸均不变色，表明磷化物负反应或未超过规定;如硝酸银试纸变色，乙酸铅试纸不变色，表示可能有磷化物存在，需再定量.Jm两种试纸均变色，可能有磷化物和硫化物同时存在或仅有硫化物存在，遇此情况，重取试样，加水后再加5mL乙酸锅溶液(100g/L)，使形成黄色硫化铺沉淀，立即密塞，放置10 min，再加酒石酸，操作同前，如硝酸银试纸变黑，乙酸铅试纸
12、不变色，表示有磷化物存在，需再定量。4.3.2 定量4.3.2.1 原理磷化物遇水和酸，放出磷化氢，蒸出后吸收于酸性高锺酸饵溶液中被氧化成磷酸，与铝酸镀作用生成磷铝酸镀，遇氯化亚锡还原成蓝色化合物锢蓝，与标准系列比较定量。本方法取样量为50g时，检出限O.020 mg/kg. 4.3.2.2 试剂4.3.2.2.1 高锺酸饵溶液(16.5g/L)，称取16.5g高锺酸饵，加水溶解后稀释至1000 mL，静置三天或加热煮沸3min，冷却，放置过夜，用玻璃棉或石棉过滤备用。4.3.2.2.2 高锺酸饵溶液(3.3g/L)，将高锺酸饵溶液(16.5g/L)用水稀释5倍。4.3.2.2.3 硫酸(1十
13、17)，取28mL硫酸缓缓加入400mL水中，冷却后加水至500mL。4.3.2.2.4 硫酸。十日z取83.3mL硫酸缓缓加入400mL水中，冷却后加水至500mL. 4.3.2.2.5 饱和亚硫酸纳溶液=取28.5 g无水亚硫酸锅，加约70mL水，微热溶解后，放冷，稀释至100 mL。4.3.2.2.6 铝酸镀溶液(50g/L)。4.3.2.2.7 氯化亚锡溶液z取0.1g氯化亚锡，溶于5rnL盐酸中，临用时现配。4.3.2.2.8 磷化物标准溶液:准确称取0.0400 g经105C干燥过的元水磷酸氢饵，溶于水，移入100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度(可加1滴三氯甲统以增加保存时间)，此
14、溶液每毫升相当于0.10mg 磷化氢。4.3.2.2.9 磷化物标准使用液吸取10.0mL磷化物标准溶液，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于10月磷化氢。4.3.2.2. 10 盐酸0+1)。4. 3. 2. 2. 11 饱和硝酸录溶液。4.3.2.2. 12 饱和硫酸脐溶液。4.3.2.2.13 酸性高锺酸御溶液高锺酸饵溶液(16.5g/L)和硫酸(2mol!L)等量混合。4.3.2.3 仪器仪器如图l所示。289 GB/T 5009.36-2003 1, 6 分液漏斗;2 二氧化碳发生瓶:3、4、5洗气瓶g7-74.() g光J(磷般二二雪在仰和35.5g泥水磷酸
15、氢二锄，溶于水并稀稀至1000 mL , 4.4.2.2.9 试银汉(对工早氨基jJf:f营基罗丹宁7熔液称取0.02日试银灵，榕于1mL网翻中。4.4.2.2. 10 J丰烟酸-p比嗖阙溶液s称取1.5 g界烟图章溶于24mL氮氧化饷溶液(20g/L) 40C放It40 min.用2cm比色杯，以零智调节零点，于波1*638 nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。4.4.2.5 盖在jfl计算试样叶间氟化物(以氮氮酸计)的含最按式(3)进行计算。v A x 1 000 A再xV:I有x. ( 3 ) 式中gX试样中氟化物(以氢氟酸i十)的含盘，单位为毫克每千(mg!kg), 292 A 测定用试
16、样液氢氨酸的质量，单位为微克(g)，m一一试样质量，单位为克(g)，V , 试样蒸馆液总体积，单位为毫升(mL), V , 测定用蒸馆液体积，单位为毫升(mL)。计算结果保留两位有效数字。4.5 氯化苦4.5.1 原理GB/T 5009.36-2003 氯化苦可被乙醇纳分解形成亚硝酸盐，在弱酸性溶液中与氨基苯磺酸进行重氮化，然后再与N-1-茶基乙二胶盐酸偶合生成紫红色，与标准系列比较定量。本方法取样量20g时，检出限为O.050 mg/kg 0 4.5.2 试剂4.5.2.1 乙醇纳溶液:取金属销，先用滤纸将表面煤油吸干，并用小刀切去表面被氧化部分(切下表团部分，务必放回煤油中，切勿与水接触)
17、，然后取5g切成碎片，量取1000 mL无水乙醇，置于大烧杯中，将切好的金属销立即分次加入，待作用完毕，杯中不再有气体发生时，移入棕色瓶中备用。4.5.2.2 元水乙醇。4.5.2.3 对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4g对氨基苯磺酸溶于100mL盐酸。+1)中，贮存于棕色瓶中。4.5.2.4 N-1荼基乙二胶溶液(2g/L):称取0.2gN-1荼基乙二胶，溶于100mL水中，贮存于棕色瓶中。4.5.2.5 氯化苦标准储备溶液z量取约20mL元水乙酶，置于50mL容量瓶中，准确称量后，加入2滴氯化苦，再准确称量，两次的差即为氯化苦质量，加元水乙醇至刻度，混匀.4.5.2.6 氯化苦标准使
18、用液g吸取适量氯化苦标准储备溶液，置于50mL容量瓶中，加元水乙醇稀释至刻度，此溶液每毫升应相当于0.020mg氯化苦，贮存于冰箱中。4.5.3 仪器分光光度计。4.5.4 分析步骤称取约20.00g试样，置于100mL具塞锥形瓶中，加20mL乙醇销溶液，盖好，放置暗处8hlO h 或过夜，过滤，量取5.0mL滤液，置于10mL比色管中。吸取5.0mL氯化苦标准使用液，置于50mL容量瓶中，加20mL乙醇锅溶液，放置暗处8h10 h 或过夜，再加元水乙醇稀释至刻度，然后吸取0、1.0、2.。、3.0、4.。、5.0mL此液(相当于0、2、4、6、8、10问氯化苦)，分别置子10mL比色管中，再
19、各加元水乙醇至5mL，加乙酸(36%)1mL。于试样及标准管中各加1mL对氨基苯磺酸(4g/L)，混匀，静置3min-S min后，各加入0.5mL N-1-茶基乙二胶溶液(2g/L)，加元水乙醇至刻度，混匀后放置20min，用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。4.5.5 结果计算试样中氯化苦的含量按式(4)进行计算。X 一一生三i旦旦旦m X V2/V1 X 1 000 式中sX一试样中氯化苦的含量，单位为毫克每千克(mg/kg), A一一测运用试样中氯化苦的质量，单位为徽克仰自); V1 试样中加人乙醇纳总体积，单位为毫升(mL)，吭一一测定用试样
20、滤液的体积，单位为毫升(mL)，. ( 4 ) 293 GB/T 5009.362003 附一试串串质量，直辑、佼为5l(g计算结果保留两位有效数字。4.6 二确化碳4.6.1 顾现二硫化碳与二乙胶作用生成二乙胶磺酸，再与铜盐反应生成黄色复盐，与标准系列比较定量。本方法取非非绩为25g 时，检出限为0.20mg/kg, 4.6.2 试剂4.6.2.1 二乙股乙醇溶液(10g/L) 4.6.2.2 乙酸铜m乙醉榕液(0.5日/L)。4.6.2.3 硫酸铜揭穿液(50g/L)。4.6.2.4 二硫化碳标准储备溶液z最JI)t约20mL二乙JIl(.乙醉浓浓(10g/L)，驾驶于50mL容簸瓶中.准
21、确称量后，加人2滴二硫化碳，再准确称慧，两次的差即为二硫化碳质量，加一乙胶白乙醇溶液00g/L) 盗刻度，7昆匀.4.6.2.5 二硫化碳标准使用液:吸取激越二硫化碳标准溶液，建于50mL容it瓶中，加二二乙胶w乙喜事溶液(10g/U稀稀至j1J度，此溶液每星革开相当于0.020mg二硫化碳。4.6.2.6 乙回事(95%)。4.6.3 仪器4.6.3.1 装置1:盘问到3.4 6.3.2 分光光度计。I、2一气体吸收管g3一厕底烧瓶，4*俗，5一一洗气瓶，4.6 4 分析步骤因3称取约25.00g试样，置于500mL圆底烧瓶中，加入水适量至浸没试样，于气体吸收管内各加入10 mL二乙R贵阳乙
22、醇溶液00g/L) ，洗气瓶巾圳人50mL硫酸锵溶液(50日/U，以除送去空气中的硫化物，再将圆底烧瓶置于70C友有的水浴锅中，按图3连接好洗气瓶、吸收智、抽气装景，缓缓拍气2h后，取下气体吸收管停止加热和抽气U将气体吸收管中吸收液倒人50mL容簸瓶中，用少f置之乙胶肌乙回事溶液(10日/L)洗气体吸收管2次3次，洗液并人容量瓶中，再用工乙胶-乙醇榕液(10g/L)加窒刻度.r，昆匀。吸取5.0mL置于25 mL比15管中。吸取。、0.5、1.0、1.5、2.0，2.5时，二硫化碳标摊主使用液相当0、10、20、30、40、50吨二硫化碳)，分别鳖于25mL比色管中，梅各加之乙胶、乙醇溶液(1
23、0g/L)交10mL.混匀。于试样及标被管中备力n1 mL乙酸铜乙喜事溶液(0.5日/L).再加乙回事泵刻j度，混匀。用1cm比色294 杯，以骂章皆调节零点.子波长400nm处测吸光度，绘制你燃8ll线比较盼4.6.5 绩果计算试样中二硫化碳的含篮按式(5)进行计算。戏中sx = :.;.;:- 二一m X V,;V, X 1 000 X二一试样中二硫化碳的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); A测主运用吸收稀稀液中豆二硫化碳的质敛，单位3的微克(g); m一一试样质景，单位为克(g);V，一一一试样峻收稀稀液总体积.单位为攀升(mL), V2棋jiE用试样吸收稀释被体积，正在l为毫升(m
24、L)。汁算结果保留两位有效数字。4. 7硝按GB/T5009. 11操作。4.8兹按GB/T5009. 17煤作。4.9 六六六、滴滴涕* GB/T 5009.19操作。4.10 黄曲霉霉素B，f置GB/T5009. 22操作。4. 11铺按GB/T5009.15操作。4.12徽按GB/T5009. 18操作。4.13 .陀籽4.13.1 鉴别GB/T 5009.36一2003. ( 5 ) 盘陀箩籽釜三三角形成肾彤，腐平，远盖面有网点，是棕色或榕褐色，有的边缘有皱折，淡棕色，宽2 mm-3 mrn，有的较火，约5mm-6 mm. 4.13.2 生物被比色定性4.13.2.1 照耀试样中所含阿
25、托品等生物碱经提取后与发烟硝酸及氮氧化饵溶液有呈色反应.4.13.2.2试Jl!J4.13.2.2.1 氮水(1十1)04.13.2.2.2 乙隧。4. 13.2.2.3 馀殷(1个5) 4. 13.2.2.4 三氯甲烧。4.13.2.2.5 元水硫酸销。4刷13.2.2.6发烟硝贱。4.13.2.2.7 氮氧化佛一乙醇榕液(100日/Ll。4.13.2.3 分所涉随将约30校曼陀罗籽放入手L钵中，力。氨水(1十1)浸浪，浸溃片刻，研磨成粘满状，如乙滕研磨三次，古每次10mL，将乙隘合并于分割草漏斗中，加10mL放酸(1十5)，报销掩耳坦1mn，分tI:l然酸隧盗列分液漏斗中，加氨水(1十1)
26、调成碱蚀，用10mL二王氯甲烧振摇摄取1m阳，再提一次，合并二三氯甲烧层，通过295 GB/T 5009.36-2003 :x;水硫酸纳脱水后浓缩交O.S mL.备翩。取0.2mL试液予小蒸发皿中，挥干溶剂，加4滴发炯硝酸使残渣溶解，水裕上蒸干，残留物变黄色，冷却后加数漓氧氧化仰乙醉溶液(100g/L).则变紫蓝色，随即变红色。阿托品、1在警晴量和;东1草草雪曲曲均有i比反应。4.13.3 薄层包谛定性4. 13.3. 1 原理i式样巾所食阿托品等:!t物碱辈辈提取后，用薄E毒分离，得以蓝色剂.IiP:色，j对!照你般比较。4.13.3.2试Jl!J4. 13.3.2. 1 硅胶G薄层板，p事
27、度O.3 mmO. Smm , 10SC活化1h，放干燥将中备用。4. 13.3.2.2 展开JIIJ, .事部氮水(200+3)。4. 13.3.2.3 撮JliJ，称取0.85g 次硝目的岛，加10mL冰乙酸，加40mL水，溶解。取5mL.加5mL 隙化御溶液(4g模化仰溶于5mL水中).再加20mL冰乙酸，加水稀释至100mL。4.13.3.2.4 阿托品标准浴液2称.llit120. 0 mg硫酸阿托品，溶于10mL水巾.Jm氟J(1十1)妓晴在1世.用三三氯甲烧摄取二次，每次8mL.无氯甲烧提取液经少许无水硫酸纳脱水，滤人20mL具比1牙中，再用少许三氯咱炕洗滤器，洗液并入比色管中，
28、加三氯甲;皖至20mL.此溶液每毫步t栩当于5.0mg问托品。4.13.3.2.5 1Jq在萦晴在标准溶液z称取145.0m自氮浪费费东!I:装碱，以H贵阿托品标准溶液同样处理，配成每毫升相当于5.0mg东蔑碧碱。4.13.3.3 分析步骤在薄底板下端2cm处，点10L阿托品及东lt费碱标准溶液.30L100L试样摄取浓缩液，各点间距1.5 cm.毁于预先用展开剂饱和的展开槽中，待溶剂前沿上展至10cm-15 cm，取出，挥千展开剂，同赏E置色押呈现俊红色斑点为阳性反应。4.13.4 :l宫.称取1000日粮食，从中检出曼陀罗籽，不得超过5糕。4. 14 爱角4.14.1 跟别4.14.1.1
29、 形态发角垒三三条或四条饨的阴柱形，微弯，两端稍窄绵，长。.3cm ., O. 4 cm，粗1mm_7 mm，外l是熊位成紫棕色.有纵沟均横裂纹，贯脆，扬折断，断丽钝三角形，边缘暗紫色，中心:!i!灰白紫白色。4.14. 1. 2 组织切片将麦角泡入水中，浸泡24h，使膨胀，夹在土豆豆或箩f、中间并固定.周小手术刀切成尽可能湾的小片，用次基蓝?将被(1g/L)显像，在身边微镜下观察，其组织紧密。4.14.2 麦角缸，量和麦角生物黯定校4.14.2.1 试剂4. 14.2. 1. 1 确有股浓浓(20g/Ll, 4. 14.2. 1. 2 无水乙贼。4. 14.2. 1. 3 饱和碳酸氢销溶液。
30、4. 14.2. 1. 4 氨水。十1)。4. 14.2. 1. 5 :三氯甲烧。4. 14. 2. 1. 6 对二甲氨基笨隆溶液:称取O.125 g对二甲氨基苯申隆，加100mL稀硫酸(65mL硫酸缕缕倒入35mL水中，混匀，冷却)溶解，然后加0.1mL三氯化铁梅液(50日/L).混匀。4.14.2.1.7 硫酸。4. 14.2. 1. 8 元水乙醇s紫外光灯波长365nm r观察元荧光。296 4. 14.2. 1. 9 乙酸乙醋。4. 14. 2. 1. 10 过氧化氢溶液(3%)。4.14.2.2 分析步GB/T 5009.36-2003 取20粒可疑麦角于研钵中，研碎，加酒石酸溶液(
31、20g/L)研成粘稠状，加10mL乙酶，仔细研磨，分取乙隧，反复进行三次，合并乙隧层于试管中，保留残渣于研钵内。在试管内加0.5mL饱和碳酸氢锅溶液，振摇，碳酸氢纳溶液层变红色，即表示检出麦角红。取保留的残渣，加氨水0+1)研磨呈碱性，用三氯甲统提取三次，每次10mL，合并三氯甲烧层，分成两部分，一部分小心加2mL对二甲氨基苯甲醒溶液，在两液层接触面呈蓝紫色环，数分钟后，三氯甲烧层均显蓝色，即表示检出麦角生物碱。另一部分三氯甲皖提取液置于试管中，在热水浴上使三氯甲烧挥尽，残留物力日无水乙醇溶解，在波长365nm紫外光灯下观察有强烈蓝色荧光，即表示检出麦角生物碱。4. 14.3 定量称1000
32、g粮食，检出麦角后称量，不得超过O.10 g. 4. 15 毒麦4. 15. 1 根据形态鉴别，毒麦籽实被内外得紧包，紧贴于内将内，其芒联接于外将部，芒长7mm 15 mm，籽实长椭圆型，坚硬无光泽，呈灰褐色，长4mm-6 mm，腹沟较宽，籽实1000位，质量10g 13 g，如图4所示.回44. 15.2 定量:称取1000 g粮食，拣出的毒爱不得超过1g, 4.16 二澳Z筷4. 16. 1 蒸锢法(SGS法4. 16. 1. 1 试剂4. 16.1. 1. 1 己烧z重蒸，使用前以气相鱼谱法检验，应元干扰峰.4. 16. 1. 1. 2 去泡剂(bakerantifoam B) . 4.
33、 16. 1. 1. 3 元水硫酸俐，4. 16. 1. l. 4 二澳乙炕(ED目标准使用液g用己提配制成含1.0、2.5、5.0、10.0 ng/ mL EDB的标准使用液。4. 16. 1. 2 仪器4. 16. 1. 2. 1 气相色谱仪:附有电子捕获检测器。4. 16. 1. 2. 2 蒸馆装置:如图5所示.297 GB/T 5009.36-2003 1 加热器，2一二1000mL圆底烧瓶，卜-10mL接收管z4一一冷凝管。4. 16. 1. 3 分析步骤4. 16. 1. 3. 1 试样处理回5快速称取50.0g试样(贮存于5C以下)于1000 mL圆底烧瓶中，加300mL水、10
34、.0mL己烧，连接烧瓶、接收管、冷凝管，放在加热器上缓缓加热，用去泡剂避免过多的发泡几滴硅汹或液体石蜡或吐温(Tween)80J.加热到己统全部蒸出，水分开始在己统层下集聚，移去加热器，待其冷却后，记下回收的己烧毫升数，并转入具塞试管内，加2g3 g无水硫酸销脱水，供气相色谱测定。4. 16. 1.3.2 气榈色谱参考条件色谱柱:2mX3 mm(内径)不锈钢柱，内装涂有10%Squalene的80目100目ChromosorbWHP。温度z柱温:75C，检测器:275C或300C，进样口:200C , 载气2氮气50mL/min. 4. 16. 1.3.3 测定准确吸取2L样液及不同浓度EDB
35、标准使用液，注入气相色谱仪中，每个试样重复三次，取平均峰高，以标准浓度值对相应的色谱峰高值作EDB标准曲线，再以样液峰高与标准曲线比较定量。4. 16. 1. 3. 4 结果计算试样中二澳乙烧的含量按式(6)进行计算。298 GB/T 5009.36-2003 1-一加热器$2-1000 mL圆底烧瓶$3一10mL接收管，4一一冷凝管。4. 16. 1. 3 分析步骤4. 16. 1. 3. 1 试样处理图5快速称取50.0g试样(贮存于5C以下)于1000mL圆底烧瓶中，加300mL水、10.0mL己烧，连接烧瓶、接收管、冷凝管，放在加热器上缓缓加热，用去泡剂避免过多的发泡C几滴硅汹或液体石
36、蜡或吐温(Tween)80 ，加热到己烧全部蒸出，水分开始在己烧层下集聚，移去加热器，待其冷却后，记下回收的己统毫升数，并转入具塞试管内，加2g-3 g元水硫酸销脱水，供气相色谱测定。4. 16. 1. 3. 2 气相色谱参考条件色谱柱:2mX3 mm(内径)不锈钢柱，内装涂有10%Squalene的80目-100目ChromosorbW HPo 温度2柱温:75C;检测器:275C或300C;进样口:200C; 载气.氮气50mL/min。4.16. 1. 3.3 测定准确吸取2L样液及不同浓度EDB标准使用液，注入气相色谱仪中，每个试样重复三次，取平均峰高，以标准浓度值对相应的色谱峰高值作
37、EDB标准曲线，再以样液峰高与标准曲线比较定量。4. 16. 1. 3. 4 结果计算试样中二澳乙婉的含量按式(6)进行计算。298 GB/T 5009.36-2003 nu nu n 1 飞J-nu-o U-r，、-A-1-一A-VH -/Jd -1 -v 一-m x ( 6 ) 式中zx一一试样中二澳乙烧的含量，单位为微克每千克(g/kg), A一一进样样液相当二澳乙炕的质量，单位为纳克(ng)，V1一一试样进样体积，单位为微升(L)，V, 收集的己烧蒸馆液的体积，单位为毫升(mL), m一一试样质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。4.16.2 漫溃法4. 16.2. 1 试剂
38、4. 16. 2. 1. 1 丙嗣重蒸，使用前以气相色谱法检验，应无干扰峰。4. 16.2. 1. 2 元水氯化钙。4. 16.2. 1. 3 氯化俐。4. 16.2. 1. 4 丙酶-水(5+1)。4. 16.2. 1. 5 二澳乙统标准使用液z用丙酣配制并稀释至每毫升含O.2问三澳乙烧。4.16.2.2 仪器气相色谱仪，附有电子捕获检测器。4.16.2.3 分析步骤4. 16.2.3. 1 试样处理快速称取50.0g试样(贮存于5C以下)，置于250mL具塞锥形瓶中，加150mL丙酬-水溶液，密塞，摇匀，在20C25C暗处浸泡48h. 24 h振摇一次，吸取10.0mL上清液于25mL具塞
39、试管中，加2 g氯化锅，密塞，剧烈振摇2min，放置分层后，吸取5.0mL上清液于10mL具塞试管中，加1g无水氯化钙，密寡，剧烈振摇2min，静置30min以上，供气相色谱测定用。4.16.2.3.2 气相色谱参考条件色谱柱:2mX 3 mm(内径)不锈钢柱，内装涂有15%聚丙二醇(Polypropylene glycol)或15%Ucon LB-550X的60目80目ChromosorbW。温度z柱温:140C，检测器、进样口温度:200C。载气z氮气70mL/min. 4.16.2.3.3 测定每天做标准曲线。吸取0、0.5、1.0、3.0、5.0、7.0L=澳乙炕标准使用液(相当于0、
40、O.1、0.2、0.6、1.0、1.4 ngEDB)，直接进样，与测得峰高绘制标准曲线。准确吸取0.5L试样澄清液，进祥。为避免检测器超载，可将样液用无水丙酣稀释10倍或100倍再进样。每个样液都进样3次，取平均峰高与标准曲线比较定量。4. 16.2.3.4 结果计算试样中二澳乙饶的含量按式(7)进行计算。X二AX1000 m X V /125 X 1 000 X 1 000 ( 7 ) 式中-X一一-试样中二澳乙饶的含量，单位为微克每千克(g/kg), A一一进样样液相当于二澳乙炕的质量，单位为纳克Cng)，V一一试样进样体积，单位为微升(L), m 试样质量，单位为克(g), 299 GB
41、/T 5009.36-2003 125-150 mL浸溃液中丙嗣的体积，单位为毫升(mL)。注2如元以上介绍的固定液，以下色谱柱也可用.20%OV-10l涂于ChromosorbW HP 80目100目上。30%以:-200涂于GasChrom Q 80目100目上.10%DC-200涂于ChromosorbW A W DMCS 60目80日上.( 6%OV-210+4% SE-30涂于GasChrom Q 80目100目上。计算结果保留两位有效数字。4.17 七氯、艾氏1111、狄氏荆4.17.1 试剂4.17. 1. 1 石油酶，30C60C. 4.17. 1. 2 乙隧。4.17. 1.
42、 3 硅镣型吸附剂，60目100目，取100g，于300C高温炉中加热120min，在炉内自然冷却后，取出加水5mL，强烈振摇至完全混匀，立即装柱使用.4.17. 1. 4 无水硫酸纳.4.17. 1. 5 淋洗液z石油酶z乙隧(96 4)。4.17. 1. 6 标准液z准确称取适量上述有机氯标准品，用苯配制成储备液，放冰箱中保存。4. 17. 1. 7 标准使用液s临用时，用石油隧稀释为使用液，其浓度为-666、666为0.01g/mL，日-666、七氯、艾氏剂、狄氏剂为O.02g/mL， p, p-DDE为0.04g/mL，0 , p巳DDT、p，p-DDD、p，p-DDT为0.10g/m
43、L。4. 17.2 仪跚4.17.2.1 气相色谱仪(具有电子捕获检测器)。4.17.2.2 小型粉碎机。4.17.2.3 电动振荡器。4.17.2.4 电水浴。4.17.2.5 真空泵。4.17.2.6 全玻浓缩器。4.17.2.7 垂融漏斗4号。4.17.2.8 柱层析管2直径1.5 cm，长40cm, 4.17.2.9 色谱柱的制备z称取担体ChromosorbW A W DMCS 60目80目20g，固定液QF-1(0.6 g)和OV-1(0.4g)，然后将固定液用三氯甲统正丁醇0+1)混合液100mL冲洗于圆底烧瓶中，在98C水浴中加热回流(3h4 h)使其完全溶解，然后将担体倒人，
44、加热回流片刻(边加热边摇动困底烧瓶，并使担体与固定液完全混合)，然后倒入大玻璃平皿中，于红外灯下烘干，装柱后250C通氮气老化27h , 4.17.3 分析步骤4.17.3.1 提取z称取粉碎后通过20目筛的50g试样，置于500mL锥形瓶中，加150mL石油酷于电动振荡器上振荡60min取下待沉淀后，将上清液倒入垂融漏斗中，减压过滤到全玻璃浓缩器中，然后向残渣中再加100mL石油隧振荡30min，减压过滤，再用30mL石油隧分二次洗锥形瓶和瓶内残渣，收集全部滤液于50C水浴中真空减压浓缩至5mL。4.17.3.2 净化s称取20g硅续型吸附剂于烧杯中，加石油隧20mL左右，用玻璃棒轻轻搅动至
45、完全湿润后待装柱，层析柱下端放少许脱脂棉，倒少量石油酿湿润并排出空隙中气泡，用小玻璃漏斗将硅筷型吸附剂均匀充实装人，然后在上层加4g无水硫酸锅，放出石油酶至无水硫酸钩上部仅留一薄层时，将试样浓缩液加人净化柱内，每分钟约4mL流速，待试样仅剩一薄层时分次加入淋洗液300mL，每分钟约4mL流速淋洗，收集全部淋洗液于全玻璃浓缩器中，在50C水浴上减压浓缩至10mL，取2L300 GB/T 5009.36-2003 进样.4.17.4 色谱参考条件Ni电子捕获检测器气化室温度:250 C 色谱柱温度:218C检测器温度:250 C 载气氮气)流速:70mL/min 其他参数调至最佳状态。4.17.5
46、 色谱桂内径3mm，长2m的玻璃柱，内装涂以2%OV-l和3%QF-l的60目80目的Chromosorb W AW DMCS. 4.17.6 计算电子捕获检测器的线性范围狭窄，为了便于定量，选择适宜的试样进样量使之适合各组分的线性范围，根据试样中七氯、艾氏剂、狄氏剂、六六六和滴滴涕存在形式，相应地制备各组分的标准曲线。4.17.7 结果计算试样中七氯、艾氏剂、狄氏剂、六六六、滴滴涕及其异构体的含量按式(8)进行计算。X A 1000 一m X V,/V2 X 1000 .( 8 ) 式中=X一一试样中七氯、艾氏剂、狄民剂、六六六、滴滴涕及其异构体的含量，单位为毫克每千克(mg/kg), A一一被测样液中七氯、文氏剂、狄氏剂、六六六、滴滴涕的质量，单位为微克(g)，V2一一试样净化液体积，单位为毫升(mL)，V, 样液进样体积，单位为毫升(mL)，m 试样质量，单位为克(g).计算结果保留两位有效数字.301
